專利名稱：一種制備脫細胞骨的方法
技術領域：
本發明涉及一種制備脫細胞骨的方法。
背景技術：
骨修復一直是臨床上的難題，目前治療骨缺損的方法仍然以自體和異體骨移植為主。臨床上關于異種骨移植存在的抗原性強、排斥反應強的問題尚未有效解決，異種骨的抗原性主要來自于異種骨細胞，目前的工藝制備的異種骨材料存在以下不足操作較復雜，周期較長，效率較低；脫細胞不徹底，容易造成骨基質的損壞。因此，需要提供一種新的技術方案來解決上述問題。

發明內容
本發明的目的是提供一種周期較短、效率較高、脫細胞徹底、對骨細胞外基質天然結構損害輕的制備脫細胞骨的方法。本發明采用的技術方案是
一種制備脫細胞骨的方法，該脫細胞骨由豬骨、牛骨或羊骨制備而成，其特征在于，包括以下步驟
a、制備異種骨工藝將動物骨切成的O. 2-0. 4cm片狀骨片，清除表面油脂； b、病毒滅活工藝將片狀骨片用質量濃度O. 1°/Γ2%的過氧乙酸和質量濃度1°/Γ5%的氯化鈉組成的病毒滅活溶液進行病毒滅活O. 5-1. O小時,片狀骨片與病毒滅活溶液的質量比為 I: 3-5 ；
C、脫脂工藝采用質量濃度3. 09Γ5. 0%純堿、質量濃度3. 09Γ5. 0%燒堿和質量濃度 O. 59Γ1. 0%表面活性劑組成的混合脫脂劑進行脫脂I. 0-5. O小時，所述表面活性劑為平平加、十二烷基氨基丙酸鈉、脂肪醇聚氧乙烯醚、曲拉酮中的一種，片狀骨片與混合脫脂劑的質量比為I: 3-5 ；
d、脫細胞工藝采用質量濃度O.1%-0. 5%胰酶、激活劑和脫脂劑組成的脫細胞液進行脫細胞工藝I. 0-2. O小時，所述激活劑為質量濃度O. 19Γ0. 3%硫酸銨，所述脫脂劑為質量濃度O. 29ΓΟ. 5%平平加，片狀骨片與脫細胞液的質量比為1: 3-5 ；
e、凍干、裁剪、定型工藝將經脫細胞工藝后制備好的骨片，放入冷凍干燥機凍干后，進一步將脫細胞骨根據臨床不同的適應癥的需要，分別裁剪、定型；
f、包裝和輻照消毒工藝成型包裝、經Y射線輻照滅菌，即為成品。本發明的有益效果(l)b步驟采用過氧乙酸和氯化鈉溶液組成的病毒滅活液進行病毒滅活，既達到了病毒滅活的效果，又避免了過氧乙酸溶液滅活病毒而產生的骨腫脹的問題；(2) c步驟中的由純堿、燒堿、表面活性劑組成的混合脫脂劑具有脫脂時間短、效率高、對骨組織天然結構的保護作用強的優點；(3) d步驟中采用酶、激活劑和脫脂劑組成的脫細胞液進行脫細胞，具有脫細胞徹底，對骨細胞外基質天然結構損害輕的優點。
具體實施例方式實施例I
本發明的一種制備脫細胞骨的方法，該脫細胞骨由豬骨、牛骨或羊骨制備而成，包括以下步驟
a、制備異種骨工藝將動物骨切成的O.2cm片狀骨片，清除表面油脂；
b、病毒滅活工藝將片狀骨片用質量濃度O.1%的過氧乙酸和質量濃度1%的氯化鈉組成的病毒滅活溶液進行病毒滅活O. 5小時,片狀骨片與病毒滅活溶液的質量比為1:3 ;
C、脫脂工藝采用質量濃度3. 0%純堿、質量濃度3. 0%燒堿和質量濃度O. 5%平平加組成的混合脫脂劑進行脫脂I. O小時，片狀骨片與混合脫脂劑的質量比為1:3 ;
d、脫細胞工藝采用質量濃度O.1%胰酶、激活劑和脫脂劑組成的脫細胞液進行脫細胞工藝I. O小時，激活劑為質量濃度O. 1%硫酸銨，脫脂劑為質量濃度O. 2%平平加，片狀骨片與脫細胞液的質量比為1:3 ;
e、凍干、裁剪、定型工藝將經脫細胞工藝后制備好的骨片，放入冷凍干燥機凍干后，進一步將脫細胞骨根據臨床不同的適應癥的需要，分別裁剪、定型；
f、包裝和輻照消毒工藝成型包裝、經Y射線輻照滅菌，即為成品。實施例2
本發明的一種制備脫細胞骨的方法，該脫細胞骨由豬骨、牛骨或羊骨制備而成，包括以下步驟
a、制備異種骨工藝將動物骨切成的O.3cm片狀骨片，清除表面油脂；
b、病毒滅活工藝將片狀骨片用質量濃度1%的過氧乙酸和質量濃度3%的氯化鈉組成的病毒滅活溶液進行病毒滅活O. 8小時,片狀骨片與病毒滅活溶液的質量比為1:4 ;
C、脫脂工藝采用質量濃度4. 0%純堿、質量濃度4. 0%燒堿和質量濃度O. 8%十二烷基氨基丙酸鈉組成的混合脫脂劑進行脫脂3. O小時，片狀骨片與混合脫脂劑的質量比為1:4 ；
d、脫細胞工藝采用質量濃度O.3%胰酶、激活劑和脫脂劑組成的脫細胞液進行脫細胞工藝I. 5小時，激活劑為質量濃度O. 2%硫酸銨，脫脂劑為質量濃度O. 3%平平加，片狀骨片與脫細胞液的質量比為1:4 ;
e、凍干、裁剪、定型工藝將經脫細胞工藝后制備好的骨片，放入冷凍干燥機凍干后，進一步將脫細胞骨根據臨床不同的適應癥的需要，分別裁剪、定型；
f、包裝和輻照消毒工藝成型包裝、經Y射線輻照滅菌，即為成品。實施例3
本發明的一種制備脫細胞骨的方法，該脫細胞骨由豬骨、牛骨或羊骨制備而成，包括以下步驟
a、制備異種骨工藝將動物骨切成的O.4cm片狀骨片，清除表面油脂；
b、病毒滅活工藝將片狀骨片用質量濃度2%的過氧乙酸和質量濃度5%的氯化鈉組成的病毒滅活溶液進行病毒滅活I. O小時,片狀骨片與病毒滅活溶液的質量比為1:5;
C、脫脂工藝采用質量濃度5. 0%純堿、質量濃度5. 0%燒堿和質量濃度I. 0%脂肪醇聚氧乙烯醚組成的混合脫脂劑進行脫脂5. O小時，片狀骨片與混合脫脂劑的質量比為1:5 ;
d、脫細胞工藝采用質量濃度O. 5%胰酶、激活劑和脫脂劑組成的脫細胞液進行脫細胞工藝2. O小時，激活劑為質量濃度O. 3%硫酸銨，脫脂劑為質量濃度O. 5%平平加，片狀骨片與脫細胞液的質量比為1:5 ;
e、凍干、裁剪、定型工藝將經脫細胞工藝后制備好的骨片，放入冷凍干燥機凍干后，進一步將脫細胞骨根據臨床不同的適應癥的需要，分別裁剪、定型；
f、包裝和輻照消毒工藝成型包裝、經Y射線輻照滅菌，即為成品。c步驟脫脂工藝中，表面活性劑還可以為曲拉酮。本發明的有益效果(l)b步驟采用過氧乙酸和氯化鈉溶液組成的病毒滅活液進行病毒滅活，既達到了病毒滅活的效果，又避免了過氧乙酸溶液滅活病毒而產生的骨腫脹的問題；(2) c步驟中的由純堿、燒堿、表面活性劑組成的混合脫脂劑具有脫脂時間短、效率高、對骨組織天然結構的保護作用強的優點；(3) d步驟中采用酶、激活劑和脫脂劑組成的脫細胞液進行脫細胞，具有脫細胞徹底，對骨細胞外基質天然結構損害輕的優點。本發明涉及一種脫細胞骨的應用。該脫細胞骨供醫療機構用于各種原因引起的人體骨組織缺損的修復治療。
權利要求
1.一種制備脫細胞骨的方法，該脫細胞骨由豬骨、牛骨或羊骨制備而成，其特征在于， 包括以下步驟a、制備異種骨工藝將動物骨切成的O. 2-0. 4cm片狀骨片，清除表面油脂；b、病毒滅活工藝將片狀骨片用質量濃度O. 1°/Γ2%的過氧乙酸和質量濃度1°/Γ5%的氯化鈉組成的病毒滅活溶液進行病毒滅活O. 5-1. O小時,片狀骨片與病毒滅活溶液的質量比為 I: 3-5 ；C、脫脂工藝采用質量濃度3. 09Γ5. 0%純堿、質量濃度3. 09Γ5. 0%燒堿和質量濃度O.59Γ1. 0%表面活性劑組成的混合脫脂劑進行脫脂I. 0-5. O小時，所述表面活性劑為平平加、十二烷基氨基丙酸鈉、脂肪醇聚氧乙烯醚、曲拉酮中的一種，片狀骨片與混合脫脂劑的質量比為I: 3-5 ；d、脫細胞工藝采用質量濃度O.1%-0. 5%胰酶、激活劑和脫脂劑組成的脫細胞液進行脫細胞工藝I. 0-2. O小時，所述激活劑為質量濃度O. 19Γ0. 3%硫酸銨，所述脫脂劑為質量濃度O. 29ΓΟ. 5%平平加，片狀骨片與脫細胞液的質量比為1: 3-5 ；e、凍干、裁剪、定型工藝將經脫細胞工藝后制備好的骨片，放入冷凍干燥機凍干后，進一步將脫細胞骨根據臨床不同的適應癥的需要，分別裁剪、定型；f、包裝和輻照消毒工藝成型包裝、經Y射線輻照滅菌，即為成品。
全文摘要
本發明公開了一種制備脫細胞骨的方法，將動物骨通過制備骨片、病毒滅活、脫脂、脫細胞、凍干、裁剪、成型、包裝和輻照消毒工藝后得到脫細胞骨。本發明的優點脫脂時間短、效率高、對骨組織結構的保護作用強，脫細胞徹底，對骨細胞外基質天然結構損害輕的優點。
文檔編號A61L27/36GK102580152SQ20121006065
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月9日 優先權日2012年3月9日
發明者潘華倩, 潘銀根 申請人:潘銀根