專利名稱：一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑的制作方法
一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑。
背景技術(shù)：
足癖(Tinea pedis)俗稱腳氣、香港腳，主要是由紅色毛癖菌(Trichophyton rubrum)等皮膚淺部致病菌引起的傳染性腳部皮膚病，容易反復(fù)發(fā)作，我國足癬發(fā)病率高達(dá) 45. 2%，而74. 5%的人卻沒有得到有效治療，市場上很多抗真菌藥物用來治療皮膚癬菌的感染，大多都難以根治足癬，而且隨著抗真菌藥物的廣泛應(yīng)用、新的菌種的出現(xiàn)及患者個體情況的差異，抗真菌藥物的耐藥問題也越來越嚴(yán)重。
近年來，由于抗生素的不合理使用和藥物的亂用，導(dǎo)致致病菌耐藥性不斷增強(qiáng)，臨床耐藥菌株不斷增加。細(xì)菌的耐藥性是全球關(guān)注的熱點，中草藥降低或抑制細(xì)菌的耐藥性是防止細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生的措施之一。中草藥作為我國的優(yōu)勢國藥，其品種多，來源廣泛，對人體的毒副作用小，易于代謝，抗菌作用明顯，不易產(chǎn)生耐藥性，因此其廣闊前景凸顯出來。 本課題組旨在探究大黃-黃柏藥對提取物對紅色毛癬菌等皮膚淺部致病菌的抑菌活性，為中草藥在臨床上治療由紅色毛癬菌等皮膚淺部致病菌引起的傳染性皮膚病提供科學(xué)·依據(jù)。發(fā)明內(nèi)容
1、一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑，其特征在于包括以下步驟
(I)復(fù)方黃柏制劑重量配比為黃柏10. 0-15. 0g、丁香10. 0-15. 0g、大黃6.0-10. 0g、龍膽草 6. 0-10. Og ；
(2)將(I)中黃柏 10. 0-15. 0g、大黃 6. 0-10. 0g、龍膽草 6. 0-10. Og,加入 350-450mL水浸泡3_4h，煎煮30_40min，用4層絹布過濾，得濾液，濾渣再加300_350mL水煎煮20-30min,用4層絹布過濾,得濾液；
(3)合并⑵中兩次濾液，濃縮至相當(dāng)于黃柏重量lg/mL，得到濃縮液；
(4)稱取丁香10. 0-15. 0g，加200-300mL水浸泡3-4h，采用水蒸氣蒸餾法獲得揮發(fā)油；
(5)將(4)中丁香揮發(fā)油與(3)中濃縮液混勻，得到復(fù)方黃柏制劑，調(diào)pH值到7.4 7. 6之間，高壓蒸汽滅菌30min，密封后O 4°C保存，待用。
2、復(fù)方黃柏制劑用于制備抗足癬作用的藥物制劑。
具體實施方式
本發(fā)明所述的一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑包括以下實施例，下面的實施例可進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
實施例1 :
1、一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑，其特征在于包括以下步驟
(I)復(fù)方黃柏制劑重量配比為黃柏10. 0g、丁香10. 0g、大黃6. 0g、龍膽草6. Og ；
(2)將(I)中黃柏lO.Og、大黃6.0g、龍膽草6.0g，加入350-450mL水浸泡3h，煎煮 30min,用4層絹布過濾,得濾液,濾洛再加300mL水煎煮20min,用4層絹布過濾,得濾液；
(3)合并⑵中兩次濾液，濃縮至相當(dāng)于黃柏重量lg/mL，得到濃縮液；
(4)稱取丁香10. OgJP 200mL水浸泡3h，采用水蒸氣蒸餾法獲得揮發(fā)油；
(5)將(4)中丁香揮發(fā)油與(3)中濃縮液混勻，得到復(fù)方黃柏制劑，調(diào)pH值到 7. 4 7. 6之間，高壓蒸汽滅菌30min，密封后O 4°C保存，待用。
2、復(fù)方黃柏制劑用于制備抗足癬作用的藥物制劑。
實施例2
1、一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑，其特征在于包括以下步驟
(I)復(fù)方黃柏制劑重量配比為黃柏15. 0g、丁香15. 0g、大黃10. 0g、龍膽草10. Og ；
(2)將(I)中黃柏15.0g、大黃10.0g、龍膽草10.0g，加入450mL水浸泡4h，煎煮 40min,用4層絹布過濾,得濾液,濾洛再加350mL水煎煮30min,用4層絹布過濾,得濾液；
(3)合并⑵中兩次濾液，濃縮至相當(dāng)于黃柏重量lg/mL，得到濃縮液；
(4)稱取丁香15. Og,加300mL水浸泡4h，采用水蒸氣蒸餾法獲得揮發(fā)油；
(5)將(4)中丁香揮發(fā)油與(3)中濃縮液混勻，得到復(fù)方黃柏制劑，調(diào)pH值到 7. 4 7. 6之間，高壓蒸汽滅菌30min，密封后O 4°C保存，待用。
2、復(fù)方黃柏制劑用于制備抗足癬作用的藥物制劑。
藥理試驗一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑
I材料及方法
1.1供試材料
1.1.1供試菌株
本實驗所使用的三種具有代表性皮膚淺部致病菌均培養(yǎng)自山東大學(xué)(威海)微生物實驗室，分別是HS (紅色毛癬菌T. rubrum)，DC (大腸埃希氏菌E. coli), JH(金黃色葡萄球菌S. aureus)。金黃色葡萄球菌和大腸桿菌分別為革蘭陽性和革蘭陰性細(xì)菌，且金黃色葡萄球菌常引起癤、癰和毛囊炎等皮膚感染，大腸桿菌則是最常見的泌尿道感染病原菌；紅色毛癬菌是人皮膚癬病最常見的病原菌，因此，選擇上述細(xì)菌和真菌作為受試菌有較好的代表性。
1.1.2 培養(yǎng)基
實驗菌株所需培養(yǎng)基馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖蛋白胨瓊脂(SDA)。
(I)SDA :葡萄糖 40. 0g、蛋白胨 10. 0g、瓊脂 15. 0g、蒸懼水 IOOOmL ；
(2) PDA :馬鈴薯 200. 0g、葡萄糖 20. 0g、瓊脂 15. 0g、蒸餾水 IOOOmL ；
(3)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏3. 0g、蛋白胨10. 0g、氯化鈉5. 0g、瓊脂15. 0g、 蒸餾水 IOOOmL ρΗ7· O 7. 2。
1.1. 3供試中草藥
復(fù)方黃柏制劑重量配比為黃柏10. 0-15. 0g、丁香10. 0-15. 0g、大黃6. 0-10. 0g、龍膽草6. 0-10. 0g，購自威海市頤和堂醫(yī)藥連鎖山大店。
1.1. 4試驗儀器超凈工作臺、真菌培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、電子天平、冷藏用冰箱、數(shù)碼照相機(jī)、烘箱、離心機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、電子游標(biāo)卡尺等。
L 2實驗方法
1. 2.1菌懸液的制備
細(xì)菌菌株經(jīng)活化后，接種于固體平板于37°C過夜培養(yǎng)，挑取適量菌苔接種于液體培養(yǎng)基，置于振蕩培養(yǎng)箱內(nèi)37°C培養(yǎng)24h，渾濁后平板涂布計數(shù)，稀釋至I X IO6Cfuzl備用。
紅色毛癬菌于28°C用PDA活化7d,挑取適量菌苔接種于液體培養(yǎng)基制備菌懸液， 振蕩15s，渾濁后涂布平板計數(shù)并調(diào)整至lX106cfu/L。
1. 2. 2復(fù)方黃柏制劑的制備
將黃柏15. 0g、大黃10. 0g、龍膽草10. Og,加入450mL水浸泡4h,煎煮40min,用4層絹布過濾，得濾液，濾渣再加350mL水煎煮30min，用4層絹布過濾，得濾液；合并兩次濾液， 濃縮至相當(dāng)于黃柏重量lg/mL，得到濃縮液；稱取丁香15. 0g，加300mL水浸泡4h，采用水蒸氣蒸餾法獲得揮發(fā)油；將丁香揮發(fā)油與濃縮液混勻，得到復(fù)方黃柏制劑，調(diào)PH值到7. 4 7.6之間，高壓蒸汽滅菌30min ;密封后O 4°C保存，待用。
1. 2. 3復(fù)方黃柏制劑對皮膚淺部致病菌抑菌活性試驗
采用平板擴(kuò)散法，制備直徑為IOcm平板厚度4mm的PDA固體培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板，各菌懸液加100 μ I涂布均勻后放置20min，平板底部十字劃線平分為四個區(qū)域，以每區(qū)域中心為打孔器打孔中心打孔，打孔器直徑為5_ ;另外配制對照組空白對照組(培養(yǎng)基)、陰性對照組(培養(yǎng)基、菌懸液、無菌水)、陽性對照組(培養(yǎng)基、菌懸液、紅霉素)，來觀察細(xì)菌的生長情況、培養(yǎng)基和復(fù)方黃柏制劑對細(xì)菌生長的影響。每種菌做四個平行，于各個孔滴加提取液50 μ L，結(jié)束后放置50min。放置完畢后將培養(yǎng)有細(xì)菌的平板置于37°C培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h，，將培養(yǎng)有真菌的平板置于28°C培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3d，游標(biāo)卡尺測量抑菌圈直徑。
抑菌效果的判定參照參考文獻(xiàn)，抑菌圈直徑> 20mm為極敏，以表示； 15-19mm為高敏，以“**”表示；10_14為中敏，以表示；10以下為低敏，以表示。
2結(jié)果與分析
復(fù)方黃柏制劑對皮膚淺部致病菌抑制作用
表I復(fù)方黃柏制劑對皮膚淺部致病菌的抑制活性(η = 4)
權(quán)利要求
1.一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑，其特征在于包括以下步驟(1)復(fù)方黃柏制劑重量配比為黃柏10.0-15. 0g、丁香10. 0-15. 0g、大黃6. 0-10. 0g、龍膽草 6. 0-10. Og ；(2)將(I)中黃柏10.0-15.(^、大黃6.0-10.(^、龍膽草6.0-10.(^，加入 350-4501^水浸泡3-4h，煎煮30-40min，用4層絹布過濾，得濾液，濾渣再加300_350mL水煎煮20_30min， 用4層絹布過濾，得濾液；(3)合并(2)中兩次濾液，濃縮至相當(dāng)于黃柏重量lg/mL，得到濃縮液；(4)稱取丁香10.0-15. OgJP 200-300mL水浸泡3_4h，采用水蒸氣蒸餾法獲得揮發(fā)油；(5)將(4)中丁香揮發(fā)油與(3)中濃縮液混勻，得到復(fù)方黃柏制劑，調(diào)pH值到7.4 7.6之間，高壓蒸汽滅菌30min，密封后O 4°C保存，待用。
2.如權(quán)利要求1所述制劑方法制備的復(fù)方黃柏制劑的用途，其特征在于用于制備抗足癬作用的藥物制劑。
全文摘要
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種抗足癬作用的復(fù)方黃柏制劑。將黃柏、大黃、龍膽草，加入水浸泡，煎煮，過濾，濾渣再加水煎煮，過濾；合并兩次濾液，濃縮，得到濃縮液；稱取丁香，采用水蒸氣蒸餾法獲得揮發(fā)油；將丁香揮發(fā)油與濃縮液混勻，得到復(fù)方黃柏制劑。復(fù)方黃柏制劑用于制備抗足癬作用的藥物制劑。
文檔編號A61P31/10GK103041010SQ201310019580
公開日2013年4月17日 申請日期2013年1月4日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月4日
發(fā)明者張崇禧, 張成城, 王超, 侯欣池, 李永斌, 江長優(yōu), 戚婷, 劉朝輝, 張婷婷 申請人:山東大學(xué)(威海)