專利名稱：乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種具有抗腫瘤的活性化合物——乙酰氟苯水楊酰胺類 化合物，及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。
(二)
背景技術：
惡性腫瘤是嚴重危害人類健康的常見病之一。據最新報道，全世界有
4000多萬人患惡性腫瘤，其中每年新增患者卯O多萬、死亡700多萬，我國 每年惡性腫瘤發病人數約160萬、死亡約130萬。目前惡性腫瘤發生與死亡 還有日趨嚴重的趨勢，有些地區已經成為人口死亡的首要原因。因此，開 發新穎的抗腫瘤藥物具有重要的意義。
乙酰氟苯水楊酰胺類化合物是一種含氟原子的化合物。由于氟原子半 徑小、又具有最大的電負性，所形成的C-F鍵能要比C-H鍵能大得多， 增加了含氟有機物的穩定性；且由于氟原子的體積小，因而常認為是H 原子的非經典的電子等排體，易產生拮抗作用，即不干擾含氟藥物與相 應細胞受體間的相互作用，能在分子水平代替正常代謝藥物，欺騙性地摻 入生物大分子，導致致死合成。當藥物分子中引入氟原子時，其電效應和 模擬效應不僅改變了分子內部電子密度的分布，而且還能提高化合物的脂 溶性和滲透性，在生物膜上的溶解性得到增強，促進其在生物體內吸收與 傳遞速度，使生理作用發生變化。所以，含氟藥物具有用量少、毒性低、 藥效高、代謝能力強等特點。含氟藥物的研究開發，主要集中在含氟芳香、雜環化合物的研究開發 上，如二氟尼柳(氟苯水楊酸)具有很好的抗炎活性。雖然二氟尼柳作為 非甾體抗炎藥已經應用于臨床中，但通過對二氟尼柳進行結構修飾，制備 具有抗腫瘤活性的含氟新藥，具有非常重大的意義，也必將引起越來越多 的科學工作者的關注。
發明人前期研究中，制備了結構如式(I)所示的乙酰氟苯水楊酰胺 類化合物。
式(I )中
Ri為C1 C6的烷基或取代垸基、C3 C6的環烷基、C6 C10的芳 基或取代芳基，所述取代垸基的取代基為苯基、鹵素、硝基或C1 C3 垸氧基，所述取代芳基的取代基為鹵素、硝基、C1 C3垸氧基、Cl C3的烷基。
式(I)所示的化合物已在中國專利公開號CN101029010A中公開， 并公開了在制備抗炎藥物中的應用。

發明內容
本發明公開了式(I)所示化合物的醫藥新用途，如式(1-1) ~式(1-7) 所示之一的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用<formula>formula see original document page 6</formula>
本發明所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應 用，所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物優選為式(1-1 )、式(1-3)、式(1-4)、 式(1-5)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物，更優選為式(1-1)、式(1-3)、 式(1-4)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物，最優選為式(1-1)、式(1-6) 或式(1-7)所示的化合物。
較為具體的，經發明人實驗證實，所述的腫瘤為A549細胞株導致的 肺癌時，式(1-1)、式(1-2)或式(1-7)所示的化合物具有一定的抗腫瘤活性。
所述的腫瘤為Ishikawa細胞導致的子宮內膜癌時，式(1-1)、式(1-6) 或式(1-7)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤活性，式(1-3)或(1-4) 所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性，式(1-5)具有較好的抗腫瘤活性。
本發明所涉及的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物的制備方法及性質和特 性參數，已在中國專利公開號CN101029010A和Bioorg&MedChemLett, 2009, 19(2)， 516-519中所述。
本發明所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物應用的有益效果主要體現
在(l)提供了一種新的有顯著抗腫瘤活性的抗腫瘤藥物，為新藥篩選提 供了研究基礎；(2)式(1-1)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物具有非 常顯著的抗腫瘤作用，式(1-3)或式(1-4)所示的化合物具有顯著的抗 腫瘤作用，式(1-5)所示的化合物具有較好的抗腫瘤作用，式(1-2) 所示的化合物具有一定的抗腫瘤作用。(3)所述的腫瘤為A549細胞株 導致的肺癌時，式(1-1)、式(1-2)或式(1-7)所示的化合物具有一定的 抗腫瘤活性。(4)所述的腫瘤為Ishikawa細胞導致的子宮內膜癌時，式 (1-1)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤活性， 式(1-3)或(1-4)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤活性。
具體實施例方式
下面結合具體實施例對本發明進行進一步描述，但本發明的保護范圍 并不僅限于此
制備乙酰氟苯水楊酰胺類化合物
按照中國專利公開號CN101029010A所述的制備方法制備式(1-1) ~式(1-7)所示的化合物I-l I-7。
實施例1~7:抗肺癌活性測試 體外抗腫瘤活性測試方法
A. 原理細胞通過線粒體水解酶將噻唑蘭(MTT)分解為不溶于水
的蘭紫色結晶并沉積在細胞中，結晶物能被二甲基亞砜溶解，用酶聯免疫
檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，間接反映細胞的增殖情況和數 量變化。
B. 細胞A549，肺癌細胞株。
C. 實驗步驟
(1)樣品的準備對于可溶樣品，每lmg用20pLDMSO溶解， 取2pL用1000 培養液稀釋，使濃度為100pg/mL，再用培養液連續 稀釋至使用濃度。
(2) 細胞的培養
培養基的配制每1000 mL培養基中含80萬單位青霉素、1.0 g鏈 霉素、10%滅活小牛血清。
細胞的培養將腫瘤細胞接種于培養基中，置37°C、 5% CCb培養 箱中培養，3 5d傳代。
(3) 測定樣品對腫瘤細胞生長的抑制作用
將細胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培養基稀釋成lxl06/mL，加 到96孔細胞培養板中，每孔100(iL，置37'C、 5% C02培養箱中培養。 接種24h后，傾去培養基，加入用培養基稀釋的樣品，每孔200^iL，每 個濃度加3孔，置37'C、 5% C02培養箱中培養，72h后在細胞培養孔 中加入5 mg/mL的MTT，每孔10 ^L，置37'C孵育3h，加入DMSO，每孔150pL，用振蕩器振蕩，使甲臢完全溶解，用酶標儀在490nm波長下 比色。以同樣條件用不含樣品、含同樣濃度DMSO的培養基培養的細胞 作為對照，計算樣品對腫瘤細胞生長的半數抑制濃度(IC50)。 對比例1
按照實施例1 7的體外抗腫瘤活性測試方法進行測試，所不同的是，
使用的樣品是順鉑藥 品。
抗腫瘤活性測試結果
將制備的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物I -1 I -7進行了抗八549活性
測試，試驗結果如下
表h各化合物對A549的IC5Q (,d/L)
實施例化合物IC50 pmol/L評價
1I -120.49弱效
2I國242.64弱效
3I -386.21無效
4I -4111.12無效
5I -5124.71無效
61-6101.12無效
7I 730.70弱效
對比例l順鉑8.73顯著
按照抗腫瘤活性的評價標準，化合物I -1、 I -2和I -7具有一定的抗 A549肺癌細胞活性。
實施例8 14:抗子宮內膜癌活性測試 測試方法體外抗腫瘤活性測試方法。
9A. 原理細胞通過線粒體水解酶將噻唑蘭(MTT)分解為不溶于水 的蘭紫色結晶并沉積在細胞中，結晶物能被二甲基亞砜溶解，用酶聯免疫
檢測儀在4卯nm波長處測定其光吸收值，間接反映細胞的增殖情況和數 量變化。
B. 細胞Ishikawa，子宮內膜癌細胞株。
C. 實驗步驟
(1)樣品的準備對于可溶樣品，每lmg用20^LDMSO溶解， 取2pL用1000 |止培養液稀釋，使濃度為100pg/mL，再用培養液連續 稀釋至使用濃度。
(2) 細胞的培養
培養基的配制每1000 mL培養基中含80萬單位青霉素、1.0 g鏈 霉素、10%滅活小牛血清。
細胞的培養將腫瘤細胞接種于培養基中，置37°C、 5% C02培養 箱中培養，3 5d傳代。
(3) 測定樣品對腫瘤細胞生長的抑制作用
將細胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培養基稀釋成lxl06/mL，加 到96孔細胞培養板中，每孔100)aL，置37。C、 5% C02培養箱中培養。 接種24h后，傾去培養基，加入用培養基稀釋的樣品，每孔200pL，每 個濃度加3孔，置37"C、 5% C02培養箱中培養，72h后在細胞培養孔 中加入5 mg/mL的MTT，每孔10 ^L，置37'C孵育3h，加入DMSO，每 孔150pL，用振蕩器振蕩，使甲臢完全溶解，用酶標儀在490nm波長下 比色。以同樣條件用不含樣品、含同樣濃度DMSO的培養基培養的細胞 作為對照，計算樣品對腫瘤細胞生長的半數抑制濃度(IC50)。對比例2
按照實施例8 14的體外抗腫瘤活性測試方法進行測試，所不同的是，
使用的樣品是順鉑藥 品。 抗腫瘤活性測試結果
將制備的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物I -1 I -7進行了抗Ishikawa活 性測試，試驗結果如下
表2:化合物對Ishikawa的IC5Q (pmol/L)
實施例化合物IC50 萍ol/L評價
8I -10.94非常顯著
91-281.18無效
101-34.74顯著
11I -46.11顯著
12I國512.54有效
13I -60.35非常顯著
141-70.47非常顯著
對比例2順鉑12.20有效
按照抗腫瘤活性的評價標準，化合物I-1、 I-6和I-7具有非常顯著 的抗Ishikawa子宮內膜癌細胞活性，化合物I -3和I -4具有顯著的抗 Ishikawa子宮內膜癌細胞活性，化合物I -5具有較好的抗151^&&*3子宮內
膜癌細胞活性。
ii
權利要求
1. 如式(I-1)～式(I-7)所示之一的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用；
2.如權利要求1所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥 物中的應用，其特征在于，所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物為 式(1-1)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-5)、式(1-6)或式(1-7) 所示的化合物。
3. 如權利要求1所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥 物中的應用，其特征在于，所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合 物。
4. 如權利要求1所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥 物中的應用，其特征在于，所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物為 式(1-1)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物。
5. 如權利要求1所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥 物中的應用，其特征在于所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)、式(1-2)或式(1-7)所示的化合物，所述的腫瘤為A549細胞株導致的肺癌。
6. 如權利要求1所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥 物中的應用，其特征在于所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-5)、式(1-6)或式(I隱7)所 示的化合物，所述的腫瘤為Ishikawa細胞導致的子宮內膜癌。
7. 如權利要求1所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥 物中的應用，其特征在于所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)、式(1-3)、式(1-4)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物， 所述的腫瘤為Ishikawa細胞導致的子宮內膜癌。
8. 如權利要求1所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥 物中的應用，其特征在于所述的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物為式(1-1)、式(1-6)或式(1-7)所示的化合物，所述的腫瘤為Ishikawa 細胞導致的子宮內膜癌。
全文摘要
本發明公開了如式(I-1)～式(I-7)所示之一的乙酰氟苯水楊酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。本發明提供了一種新的有顯著抗腫瘤活性的抗腫瘤藥物，為新藥篩選提供了研究基礎；其中，式(I-1)、式(I-6)或式(I-7)所示的化合物具有非常顯著的抗腫瘤作用，式(I-3)或式(I-4)所示的化合物具有顯著的抗腫瘤作用，式(I-5)所示的化合物具有較好的抗腫瘤作用，式(I-2)所示的化合物具有一定的抗腫瘤作用。
文檔編號A61P35/00GK101502524SQ20091009668
公開日2009年8月12日 申請日期2009年3月13日 優先權日2009年3月13日
發明者胡紅丹, 胡金清, 鐘光祥 申請人:浙江工業大學