專利名稱：化合物茯苓酸作為制備藥物的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及化合物茯苓酸(3β乙酰氧基16α羥基羊毛甾8，24(31)二烯21酸)的用途，尤其涉及在制藥領域中的用途。

背景技術：
化合物茯苓酸的結構式為
該化合物的分子式為C33H52O5，白色針狀結晶，分子量528，該化合物可由中藥白茯苓中提取制備，目前尚無其該單一化合物在制藥中的應用。


發明內容
本發明的目的在于提供化合物茯苓酸的新用途，即在制藥中的新應用。
實際上，本項目涉及化合物茯苓酸作為制備治療或預防移植后排斥反應的藥的應用。
涉及化合物茯苓酸在制備治療或預防外周血淋巴細胞凋亡的藥中的應用。
涉及化合物茯苓酸在制備治療或預防外周血CD4+和CD8+淋巴細胞數量百分比異常的藥中的應用。
為了更好的理解本發明的實質，下面用化合物茯苓酸與橄欖油的混合物的藥理實驗及結果來說明其在制藥領域中的新用途，橄欖油僅僅作為載體，無實質的藥理作用，實驗中用使用相同的橄欖油的對照組進行對比。
采用中藥白茯苓粉末150kg，乙醚冷浸三次，每次48小時，過濾，取冷浸液，減壓回收乙醚后得淡黃色浸膏(150g)，經Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1-20∶1)處理，得Fr.1、Fr.2、Fr.3(20g)、Fr.4和Fr.5，五種物質，取Fr.3(20g)再次予以Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1)處理，得Fr.3.1、Fr.3.2(15g)和Fr.3.3三種物質，取Fr.3.2(15g)予以ODS C.C.MeOH∶H2O(85∶15)處理，得Fr.3.2.1、Fr.3.2.2、Fr.3.2.3(8g)Fr.3.2.4和Fr.3.2.5五種物質，取Fr.3.2.3(8g)甲醇反復重結晶，化合物茯苓酸-白色結晶(1500mg)。消毒后與橄欖油混合成1mg/ml和10mg/ml兩種濃度備用。
1.毒性試驗 口服給藥健康雄性SD大鼠，體重250-300克，清潔級，視給藥劑量選用1mg/ml或10mg/ml兩種濃度的茯苓酸橄欖油混合物予以0.5mg/kg，1.0mg/kg，2.0mg/kg，10.0mg/kg劑量分組，對照組采用相同體積的橄欖油，每組10只，予以灌胃治療，每日一次，觀察七天無一只死亡。
2.用常規藥理試驗觀察了茯苓酸橄欖油溶液灌胃對大鼠外周血淋巴細胞線粒體膜電位的改變，外周血淋巴細胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴細胞和CD8+淋巴細胞數量百分比變化。試驗結果證明，在1.0mg/kg和10mg/kg上述灌胃劑量條件下，茯苓酸可以有效降低外周血淋巴細胞凋亡百分比。小劑量茯苓酸(0.5m/kg，1.0mg/kg，2.0mg/kg)條件下，可以有效提高CD4+淋巴細胞數量百分比，在大劑量(10mg/kg)條件下，對CD4+淋巴細胞數量百分比調節不顯著。對各劑量茯苓酸均可有效提高CD8+淋巴細胞數量百分比。
上述結果說明，茯苓酸在一般情況下，可以有效降低外周血淋巴細胞凋亡；同時可以通過調整劑量，達到調節CD4+淋巴細胞和CD8+淋巴細胞數量百分比的目的。
3.茯苓酸抑制器官移植后排斥反應的研究試驗采用以Wister大鼠為供體，SD大鼠為受體，建立改良的Ono心臟移植模型，給模型予以10mg/kg的茯苓酸每日一次灌胃治療。通過對模型的供體心臟病理檢查、外周血淋巴細胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴細胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴細胞和CD8+淋巴細胞數量百分比進行研究。結果表明在接受移植物的機體免疫狀態較為極端的條件下，一定劑量的茯苓酸(10mg/kg)可以有效發揮抗移植排斥反應的作用，保護移植的心臟，同時保護外周血淋巴細胞減少其凋亡百分比，穩定外周血CD8+淋巴細胞數量百分比，避免其異常增高，而且該特點具有相對特異性，即茯苓酸對外周血CD4+淋巴細胞數量百分比仍未見明顯調節作用。
從以上結果，可以得出本發明優點在于 (1).本發明對已知化合物茯苓酸(3β乙酰氧基16α羥基羊毛甾8，24(31)二烯21酸)發掘了新的醫藥用途，開拓了一個新的應用領域。
(2).本發明的茯苓酸提取自天然藥物，安全無毒，藥理作用強，預示著很好的藥理作用前景。
(3).本發明的產品配制成的藥物具有顯著的抗排斥反應的藥理學作用。
(4).本發明的產品配制成的藥物具有顯著的降低接受移植的受體的外周血淋巴細胞凋亡的作用。
(5).本發明的產品配制成的藥物在一定條件和劑量下，具有特異性調節接受移植的受體的外周血CD8+淋巴細胞的藥理學作用。
(6).本發明的產品配制成的藥物在一定條件和劑量下，具有顯著調節CD4+和CD8+淋巴細胞數量百分比的作用。

具體實施例方式 下面描述本發明的幾個實施例，但本發明的內容完全不局限于此。
實施例1 采用中藥白茯苓粉末150kg，乙醚冷浸三次，每次48小時，過濾，取冷浸液，減壓回收乙醚后得淡黃色浸膏(150g)，經Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1-20∶1)處理，得Fr.1、Fr.2、Fr.3(20g)、Fr.4和Fr.5，五種物質，取Fr.3(20g)再次予以Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1)處理，得Fr.3.1、Fr.3.2(15g)和Fr.3.3三種物質，取Fr.3.2(15g)予以ODS C.C.MeOH∶H2O(85∶15)處理，得Fr.3.2.1、Fr.3.2.2、Fr.3.2.3(8g)Fr.3.2.4和Fr.3.2.5五種物質，取Fr.3.2.3(8g)甲醇反復重結晶，化合物茯苓酸-白色結晶(1500mg)。與橄欖油混合成100mg/ml濃度混合物，消毒，密封后制成產品。
實施例2 用實施例1所得的化合物茯苓酸-白色結晶與橄欖油混合成10mg/ml濃度混合物，消毒，密封后制成產品。
實施例3 用實施例1所得的化合物茯苓酸-白色結晶200mg按照已知的方法制成膠囊劑成為產品。
權利要求
1.化合物茯苓酸在制備治療或預防移植排斥反應的藥中的應用。
2.化合物茯苓酸在制備治療或預防外周血淋巴細胞凋亡的藥中的應用。
3.化合物茯苓酸在制備穩定外周血CD8+淋巴細胞數量百分比的藥中的應用。
4.化合物茯苓酸在制備調節外周血CD4+淋巴細胞數量百分比的藥中的應用。
全文摘要
本發明涉及化合物茯苓酸在制藥領域中的用途，該產品具有降低移植手術后受體對移植物的排斥反應，保護受體外周血淋巴細胞線粒體膜電位穩定，減少外周血淋巴細胞凋亡百分比，穩定外周血CD8+淋巴細胞數量百分比等功能，在非移植條件下，降低外周血淋巴細胞凋亡百分比，調節CD4+和CD8+淋巴細胞數量百分比等功能，用于治療在動物和人類器官、組織、細胞等移植時降低移植物排斥反應，調節、穩定機體的淋巴細胞數量、比例和功能。
文檔編號A61P7/00GK101301295SQ200710144479
公開日2008年11月12日 申請日期2007年10月23日 優先權日2007年10月23日
發明者劉宏宇, 張學峰, 帆 張 申請人:劉宏宇, 張學峰, 帆 張