專利名稱：8－氨基－[1,2,4]三唑并[1,5－a]吡啶－6－甲酰胺的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及通式I的化合物及其可藥用鹽， 其中R1是-NR′R″，其中R′和R″彼此獨立地是低級烷基、-(CH2)n-C(O)NRaRb、-(CH2)n-雜芳基、-(CH2)n-芳基、-(CH2)n-CN、-(CH2)n-O-低級烷基或-(CH2)n-環(huán)烷基，或者R′和R″與N原子一起形成5或6元非芳族環(huán)，該環(huán)可包含一個另外的O或S雜原子，并且該環(huán)可以是未取代的或者被一或兩個選自低級烷基、-C(O)NRaRb或-(CH2)n-O-低級烷基的取代基取代，其中Ra和Rb彼此獨立地是氫或低級烷基；R2是未取代的或被低級烷基或鹵素取代的芳基或雜芳基；n是0、1、2或3。
現(xiàn)出人意料地發(fā)現(xiàn)通式I化合物是腺苷受體的配體。
腺苷通過與特定的細胞表面受體相互作用來調節(jié)多種生理學功能。在1982年首次提出了腺苷受體作為藥物靶點的可能性。腺苷同時在結構學和代謝方面與生物活性的核苷三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)和環(huán)腺苷一磷酸(cAMP)有關；并且同時在結構學和代謝方面與生物化學甲基化試劑S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)有關；其在結構上與輔酶NAD、FAD和輔酶A有關；并且與RNA有關。腺苷和這些相關的化合物一起對于調節(jié)細胞代謝的許多方面以及調節(jié)不同的中樞神經(jīng)系統(tǒng)活性具有重要意義。
腺苷受體被分類成A1、A2A、A2B和A3受體，屬于G蛋白偶聯(lián)的受體家族。腺苷激活腺苷受體引發(fā)信號傳導機制。這些機制依賴于與G蛋白結合的受體。每一種腺苷受體亞型均通過腺苷酸環(huán)化酶效應器系統(tǒng)進行分類表征，該系統(tǒng)使用cAMP作為第二信使。與Gi蛋白偶聯(lián)的A1和A3受體抑制腺苷酸環(huán)化酶，導致細胞cAMP水平降低；而A2A和A2B受體與Gs蛋白偶聯(lián)并激活腺苷酸環(huán)化酶，導致細胞cAMP水平升高。已知A1受體系統(tǒng)包括磷脂酶C的激活以及鉀和鈣離子通道的調節(jié)。A3亞型除了與腺苷酸環(huán)化酶結合外，還可以刺激磷脂酶C，從而激活鈣離子通道。
由各種物種(犬、人、大鼠、狗、雞、牛、豚鼠)克隆了A1受體(326-328個氨基酸)，在哺乳動物物種之間該受體具有90-95％的序列同一性。由犬、大鼠、人、豚鼠和小鼠克隆了A2A受體(409-412個氨基酸)。由人和小鼠克隆了A2B受體(332個氨基酸)，人A2B與人A1和A2A受體具有45％的同源性。由人、大鼠、狗、兔子和綿羊克隆了A3受體(317-320個氨基酸)。
有人提出A1和A2A受體亞型在腺苷對能量供給的調節(jié)中起補充作用。腺苷是一種ATP的代謝產(chǎn)物，它從細胞擴散并局部地產(chǎn)生作用而激活腺苷受體，以降低氧的需求(A1)或增加氧供給(A2A)，從而恢復組織內能量的供需平衡。兩種亞型的作用都是增加組織可以利用的氧的量，并使細胞免受因短時間的氧失衡所引起的損傷。內源性腺苷的一個重要功能是防止創(chuàng)傷例如組織缺氧、局部缺血、低血壓和癲癇發(fā)作過程中的損傷。
此外，已知腺苷受體激動劑與表達大鼠A3受體的肥大細胞的結合導致三磷酸肌醇和胞內鈣濃度增高，這增強了抗原誘導的炎性介質的分泌。因此，A3受體在介導哮喘發(fā)作和其它過敏反應中起作用。
腺苷還是一種神經(jīng)調質，它通過介導中樞抑制作用對生理學腦功能的許多方面所涉及的分子機制的調節(jié)具有整體重要性。在創(chuàng)傷例如組織缺氧、局部缺血和癲癇發(fā)作后會出現(xiàn)神經(jīng)遞質釋放的增加。這些神經(jīng)遞質最終與神經(jīng)變性和神經(jīng)死亡有關，而神經(jīng)變性和神經(jīng)死亡會引起大腦損傷或個體的死亡。因此，模擬腺苷的中樞抑制作用的腺苷A1激動劑可用作神經(jīng)保護劑。有人提出腺苷是一種內源性抗驚厥劑，可以抑制興奮性神經(jīng)元釋放谷氨酸并抑制神經(jīng)元放電。因此，腺苷激動劑可用作抗癲癇劑。腺苷拮抗劑可以刺激CNS的活性，并且已證實其可用作認知促進劑。選擇性的A2a-拮抗劑在治療各種形式的癡呆例如早老性癡呆中具有潛在治療作用并且可用作神經(jīng)保護劑。腺苷A2a-受體拮抗劑可以抑制中樞突觸末梢釋放多巴胺并降低運動活性，從而改善帕金森氏病的癥狀。腺苷的中樞活性還與鎮(zhèn)靜、催眠狀態(tài)、精神分裂癥、焦慮、疼痛、呼吸、抑郁癥和藥物濫用所涉及的分子機制有關。因此，作用于腺苷受體的藥物具有作為鎮(zhèn)靜劑、肌肉松弛劑、抗精神病藥、抗焦慮藥、鎮(zhèn)痛藥、呼吸興奮藥和抗抑郁藥的潛在治療價值。
腺苷在心血管系統(tǒng)中的一個重要作用是作為心臟保護劑。內源性腺苷水平會在局部缺血和組織缺氧時增加，并在創(chuàng)傷期間和之后(預適應)保護心臟組織。因此，腺苷激動劑是潛在的心臟保護劑。
腺苷調節(jié)腎功能的許多方面，包括腎素釋放、腎小球濾過率和腎臟血流。拮抗腺苷的腎臟作用的化合物是潛在的腎臟保護劑。此外，腺苷A3和/或A2B拮抗劑可以用于治療哮喘和其它過敏反應。
許多文獻描述了關于腺苷受體的現(xiàn)有知識，例如下列出版物Bioorganic & Medicinal Chemistry，6，(1998)，619-641，Bioorganic & Medicinal Chemistry，6，(1998)，707-719，J.Med.Chem.，(1998)，41，2835-2845，J.Med.Chem.，(1998)，41，3186-3201，J.Med.Chem.，(1998)，41，2126-2133，J.Med.Chem.，(1999)，42，706-721，J.Med.Chem.，(1996)，39，1164-1171，Arch.Pharm.Med.Chem.，(1999)，332，39-41。
本發(fā)明的目的是式I化合物及其可藥用鹽本身和作為藥物活性物質的這些化合物、它們的生產(chǎn)方法，基于本發(fā)明化合物的藥物及它們的生產(chǎn)方法，以及式I化合物在控制或預防基于腺苷系統(tǒng)的調節(jié)作用的疾病中的應用，這些疾病是例如早老性癡呆、帕金森氏病、神經(jīng)保護、精神分裂癥、焦慮、疼痛、呼吸不足、抑郁、哮喘、過敏反應、組織缺氧、局部缺血、癲癇發(fā)作和藥物濫用。此外，本發(fā)明的化合物可用作鎮(zhèn)靜劑、肌肉松弛劑、抗精神病藥、抗癲癇藥、抗驚厥藥和心臟保護劑。本發(fā)明最優(yōu)選的適應癥是基于A2A受體拮抗活性的那些，包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥，例如某些抑郁癥、神經(jīng)保護和帕金森氏病的預防或治療。
本文中所用的術語“低級烷基”是指含有1-6個碳原子的飽和的直鏈或支鏈的烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、2-丁基、叔丁基等。優(yōu)選的低級烷基是具有1-4個碳原子的基團。
術語“環(huán)烷基”是指含有3-8個碳原子的飽和碳環(huán)基團。優(yōu)選的環(huán)烷基是環(huán)己基。
術語“鹵素”是指氯、碘、氟和溴。
術語“低級烷氧基”是指其中的烷基是如上定義的并且通過氧原子連接的基團。
術語“芳基”是指苯基或萘基。優(yōu)選的芳基是苯基。
術語“雜芳基”是指具有雜原子，如O、N或S的5或6元環(huán)，例如吡啶基、噻吩基、呋喃基和噻唑基。
術語“5或6元非芳族環(huán)”是指除N原子外，還可包含一個另外的雜原子，如O或S的環(huán)，例如嗎啉基、硫代嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基或3，6-二氫-2H-吡啶-1-基。
術語“可藥用酸加成鹽”包括與無機酸和有機酸形成的鹽，所述酸是例如鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、富馬酸、馬來酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等。
優(yōu)選其中R2是被溴取代的雜芳基、例如呋喃-2-基的本發(fā)明式I化合物。例如下列化合物[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-哌啶-1-基-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-吡咯烷-1-基-甲酮，三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮，1-[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-羰基]-哌啶-3-甲酸二乙基酰胺，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(3，5-二甲基-哌啶-1-基)-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(2-甲基-哌啶-1-基)-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(2-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-((S)-2-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮，1-[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(S)-二甲基酰胺，8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸二甲基氨基甲酰基甲基-甲基-酰胺，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(3-甲基-哌啶-1-基)-甲酮，8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲基-丙基-酰胺，8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸乙基-(2-吡啶-2-基-乙基)-酰胺，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-硫代嗎啉-4-基-甲酮，或8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲基-苯乙基-酰胺。
其它優(yōu)選的是其中R2是未取代的雜芳基，例如呋喃-2-基的化合物。該組的實例是下列化合物(8-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基)-吡咯烷-1-基-甲酮，
(8-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基)-(2-R-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮，(8-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基)-(2-S-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮或8-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸二芐基酰胺。
還優(yōu)選其中R2是雜芳基、例如噻吩-2-基的本發(fā)明式I化合物。例如下列化合物8-氨基-2-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸二芐基酰胺。
其它優(yōu)選的化合物是其中R2是被甲基取代的雜芳基、例如呋喃-2-基的化合物。該組的實例是下列化合物[8-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-吡咯烷-1-基-甲酮，[8-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-哌啶-1-基-甲酮，[8-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮或8-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲基-丙基-酰胺。
式I化合物及其可藥用鹽可通過本領域已知的方法制備，例如采用下述方法制備，該方法包括將式II化合物 與式III的胺反應HNR′R″III得到式I化合物
其中R′、R″和R2具有上面給出的含義，并且如果需要，將所得化合物轉化為可藥用酸加成鹽。
按照上述方法的改變方法，為獲得式I化合物(8-氨基-2-(芳基或雜芳基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基)-哌啶-1-基-甲酮)，將式III的胺(HNR′R″)的二噁烷溶液用三甲基鋁的甲苯液處理并在室溫攪拌1小時。加入8-氨基-2-(芳基或雜芳基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(II)在1ml二噁烷中的溶液并將該混合物在90℃加熱72小時。加入鹽酸并除去揮發(fā)物。將殘余物加到甲酸和甲醇中并經(jīng)反相制備型HPLC純化，用乙腈和水梯度洗脫。
按照先前已知的和本領域技術人員熟悉的方法在室溫下形成鹽。與無機酸形成的鹽以及與有機酸形成的鹽均包括在內。所述鹽的例子為鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽等。
在實施例9-108和下面的反應方案1中詳細描述了式I化合物的制備。
反應方案1
按照反應方案1，如下所述獲得式V化合物(6-羥基-5-硝基-煙酸)在低于20℃下，向式IV化合物(6-羥基-煙酸)的濃硫酸溶液中加入濃硫酸和濃硝酸的混合物并在室溫攪拌1小時，之后將該溶液在80℃加熱4小時。將該混合物傾倒在冰上，收集沉淀并使之干燥。然后將所得式V化合物與POCl3混合并在130℃加熱5小時，之后減壓蒸除過量的POCl3。使殘余物冷卻到0℃并緩慢地加入150ml甲醇。該混合物在0℃攪拌2小時。加入25％氨水溶液后，將該混合物在室溫攪拌4小時。過濾沉淀，用乙醚洗滌一次并真空干燥，得到6-氨基-5-硝基-煙酸甲酯(VI)。形成6-氨基-5-硝基-煙酸甲酯的甲醇懸浮液，然后加入Pd/C(10％)催化劑并在室溫下氫化14小時。濾除催化劑，將溶液濃縮，得到5，6-二氨基-煙酸甲酯(VII)。將(VII)在二噁烷中的混合物用O-均三甲苯磺酰基羥胺(由O-均三甲苯磺酰基乙酰氧肟酸乙酯和HClO4制備)在室溫處理1小時。向噻吩-2-甲醛或另一種式R2CHO的醛中(其中R2是如說明書中所述的芳基或雜芳基)加入4分子篩并在100℃加熱4小時，之后加入KOH的甲醇溶液。將該混合物在70℃加熱2小時并在室溫攪拌14小時。減壓除去揮發(fā)物，殘余物經(jīng)快速柱色譜純化，得到8-氨基-2-(芳基或雜芳基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(II)。為獲得式I化合物(8-氨基-2-(芳基或雜芳基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基)-哌啶-1-基-甲酮)，將式III的胺(HNR′R″)的二噁烷溶液用三甲基鋁的甲苯溶液處理并在室溫攪拌1小時。加入8-氨基-2-(芳基或雜芳基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(II)在1ml二噁烷中的溶液并將該混合物在90℃加熱72小時。加入HCl水溶液并除去揮發(fā)物。將殘余物加到甲酸和甲醇中并經(jīng)反相制備型HPLC純化，用乙腈和水梯度洗脫。
式I化合物及其可藥用加成鹽具有有價值的藥理學特性。具體而言，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物是腺苷受體配體。
按照下文中給出的試驗對化合物進行研究。
人腺苷A2A受體用塞姆利基森林病毒表達系統(tǒng)在中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中重組表達人腺苷A2A受體。收獲細胞，通過離心洗滌兩次，勻化并再次通過離心進行洗滌。將最后洗滌的膜沉積物懸浮在Tris(50mM)緩沖液中，所述緩沖液中含有120mM NaCl、5mM KCl、2mM CaCl2和10mM MgCl2(pH 7.4)(緩沖液A)。在96孔培養(yǎng)板中進行[3H]-SCH-58261(Dionisotti等，1997，Br.J.Pharmacol.121，353)結合試驗，試驗在2.5μg膜蛋白、0.5mg Ysi-聚-L-賴氨酸SPA珠和0.1U腺苷脫氨酶的存在下、在最終體積為200μl的緩沖液A中進行。用黃嘌呤胺同類物(XAC；2μM)測定非特異性結合。在10μM至0.3nM的10種濃度下對化合物進行測定。所有試驗均一式兩份地進行并且重復至少兩次。將測定培養(yǎng)板在室溫下保溫1小時，然后離心并用Packard Topcount閃爍計數(shù)器測定結合的配體。用非線性曲線擬合程序計算IC50值并用Cheng-Prussoff方程計算Ki值。
根據(jù)本發(fā)明，證實式I化合物對A2A受體具有高度親和性。下表中描述了所制備的化合物的具體值。優(yōu)選的化合物是對hA2a的Ki值小于100nM的化合物，例如下列的那些
式I化合物及式I化合物的可藥用鹽可，例如以藥物制劑的形式用作藥物。藥物制劑可例如以片劑、包衣片、糖衣丸、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳液或混懸液的形式經(jīng)口服給藥。但也可例如以栓劑的形式直腸給藥，或者以注射液的形式胃腸外給藥。
式I化合物可用藥物惰性的、無機或有機載體加工以生產(chǎn)藥物制劑。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽等，可用作例如制備片劑、包衣片、糖衣丸和硬明膠膠囊的載體。用于軟明膠膠囊的適宜載體是，例如植物油、蠟、脂肪、半固體和液體的多元醇等。根據(jù)活性物質的性質，在軟明膠膠囊的情況下通常不需要載體。用于制備溶液和糖漿的適宜載體是，例如水、多元醇、甘油、植物油等。用于栓劑的適宜載體是，例如天然的或硬化的油、蠟、脂肪、半液體或者液體多元醇等。
此外，藥物制劑還可包含防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、矯味劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧劑。它們還可包含其它治療學上有益的物質。
含有式I化合物或其可藥用鹽以及治療惰性的載體的藥物及其生產(chǎn)方法也是本發(fā)明的目的，所述生產(chǎn)方法包括，將一種或多種式I化合物和/或可藥用酸加成鹽以及，如果需要的話，一種或多種其它治療學上有益的物質與一種或多種治療學惰性的載體一起制成蓋侖給藥形式。
根據(jù)本發(fā)明，式I化合物及其可藥用鹽可用于控制或預防基于腺苷受體拮抗活性的疾病，例如早老性癡呆、帕金森氏病、神經(jīng)保護、精神分裂癥、焦慮、疼痛、呼吸不足、抑郁、哮喘、過敏反應、組織缺氧、局部缺血、癲癇發(fā)作和藥物濫用。此外，本發(fā)明的化合物還可用作鎮(zhèn)靜劑、肌肉松弛劑、抗精神病藥、抗癲癇藥、抗驚厥藥和心臟保護劑以及用于生產(chǎn)相應的藥物。
根據(jù)本發(fā)明，首選的適應癥包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，例如某些抑郁癥、神經(jīng)保護和帕金森氏病的治療或預防。
劑量可在較寬的限度內變化，但在每個具體病例中，當然應根據(jù)個體需求進行調整。在口服給藥的情況下，對于成人的日劑量可以為約0.01mg-約1000mg通式I化合物或相應量的其可藥用鹽。該日劑量可以以單次劑量給藥，或者以劃分的劑量給藥，此外，當需要時，劑量也可超過上限。
中間體實施例18-氨基-2-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯a)6-羥基-5-硝基-煙酸在低于20℃下，向30g(0.217mol)6-羥基-煙酸在50ml濃硫酸中的溶液中加入60ml 1∶1濃硫酸與濃硝酸的混合物并在室溫下攪拌1小時，之后在80℃加熱4小時。將該混合物傾入冰中，收集形成的沉淀并干燥，得到14.2g(36％)黃色非晶固體狀標題化合物。
MS m/e(％)184(MH+，100)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝13.3(s，br，2H，COOH/OH)，8.65(d，J＝2.5Hz，1H，H-4)，8.38(d，J＝2.5Hz，1H，H-2)。
b)6-氨基-5-硝基-煙酸甲酯將14.2g(78mmol)6-羥基-5-硝基-煙酸在50ml POCl3中的混合物在130℃加熱5小時，之后減壓蒸餾過量的POCl3。使殘余物冷卻到0℃并緩慢地加入150ml甲醇。該混合物在0℃攪拌2小時。加入300ml 25％NH3水溶液后，該混合物在室溫攪拌4小時。過濾沉淀，用乙醚洗滌一次，真空干燥，得到5.97g(39％)黃色固體狀標題化合物。
MS m/e(％)197(MH+，100)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝8.83(d，J＝2.1Hz，1H，H-4)，8.72(d，J＝2.1Hz，1H，H-2)，8.38(s，br，2H，NH2)，3.85(s，3H，OCH3)。
c)5，6-二氨基-煙酸甲酯形成5.97g(30mmol)6-氨基-5-硝基-煙酸甲酯在30ml甲醇中的懸浮液，加入600mg Pd/C(10％)催化劑并在室溫氫化14小時。濾除催化劑并將溶液濃縮，得到4.74g(94％)白色非晶固體狀標題化合物。
MS m/e(％)167(MH+，100)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝7.95(d，J＝1.5Hz，1H，H-4)，7.16(d，J＝1.5Hz，1H，H-2)，6.25(s，br，2H，NH2)，4.91(s，br，2H，NH2)，3.74(s，3H，OCH3)。
d)8-氨基-2-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯將1.114g(6.66mmol)5，6-二氨基-煙酸甲酯在40ml二噁烷中的混合物用1.578g(7.33mmol)O-均三甲苯磺酰基羥胺(由O-均三甲苯磺酰基乙酰氧肟酸乙酯和HClO4(70％)制備)在室溫處理1小時。加入0.897g(8mmol)噻吩-2-甲醛和4分子篩并在100℃加熱4小時，然后加入1.6ml 5M KOH的甲醇溶液。將該混合物在70℃加熱2小時并在室溫攪拌14小時。減壓除去揮發(fā)物，殘余物經(jīng)快速硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯和正己烷的混合液洗脫，蒸發(fā)后，得到0.88g(48％)標題化合物。
MS m/e(％)275.3(MH+，100)
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝8.65(d，J＝1.4Hz，1H，H-5)，7.81(dd，J1＝3.5Hz，J2＝1Hz，1H，噻吩H-2)，7.76(dd，J1＝4.8Hz，J2＝1Hz，1H，噻吩H-4)，7.24(dd，J1＝4.8Hz，J2＝3.5Hz，1H，噻吩H-3)，7.09(d，J＝1.4Hz，1H，H-7)，6.31(s，br，2H，NH2)，3.88(s，3H，OCH3)。
實施例28-氨基-2-苯基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯按照實施例1的一般方法，由5，6-二氨基-煙酸甲酯、O-均三甲苯-磺酰基羥胺和苯甲醛制備該標題化合物，M/S m/e(％)269(M+，100)。通過快速硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯和正己烷的混合液洗脫。
實施例38-氨基-2-噻唑-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯按照實施例1的一般方法，由5，6-二氨基-煙酸甲酯、O-均三甲苯磺酰基羥胺和噻唑-2-甲醛制備該標題化合物，M/S m/e(％)276.1(M+，100)。通過快速硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯和正己烷的混合液洗脫。
實施例48-氨基-2-(5-甲基-噻吩-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯按照實施例1的一般方法，由5，6-二氨基-煙酸甲酯、O-均三甲苯磺酰基羥胺和5-甲基噻吩-2-甲醛制備該標題化合物，M/S m/e(％)289.2(M+，100)。通過快速硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯和正己烷的混合液洗脫。
實施例58-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯按照實施例1的一般方法，由5，6-二氨基-煙酸甲酯、O-均三甲苯磺酰基羥胺和呋喃-2-甲醛制備該標題化合物，M/S m/e(％)259.1(M+，100)。通過快速硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯和正己烷的混合液洗脫。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝8.65(d，J＝1.5Hz，1H，H-5)，7.92(dd，J1＝1.7Hz，J2＝0.8Hz，1H，呋喃H-5)，7.16(dd，J1＝3.4Hz，J2＝0.8Hz，1H，呋喃H-3)，7.08(d，J＝1.5Hz，1H，H-7)，6.73(dd，J1＝3.4Hz，J2＝1.7Hz，1H，呋喃H-4)，6.35(s，br，2H，NH2)，3.89(s，3H，OCH3)。
實施例68-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯按照實施例1的一般方法，由5，6-二氨基-煙酸甲酯、O-均三甲苯磺酰基羥胺和5-甲基呋喃-2-甲醛制備該標題化合物，M/S m/e(％)273.2(M+，100)。通過快速硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯和正己烷的混合液洗脫。
實施例78-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯按照實施例1的一般方法，由5，6-二氨基-煙酸甲酯、O-均三甲苯磺酰基羥胺和5-溴呋喃-2-甲醛制備該標題化合物，M/S m/e(％)338.2(M+，100)。通過快速硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯和正己烷的混合液洗脫。
實施例88-氨基-2-吡啶-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯按照實施例1的一般方法，由5，6-二氨基-煙酸甲酯、O-均三甲苯磺酰基羥胺和吡啶-2-甲醛制備該標題化合物，M/S m/e(％)270.3(M+，100)。通過快速硅膠柱色譜純化，用乙酸乙酯和正己烷的混合液洗脫。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝8.75(dd，J1＝2Hz，J2＝0.6Hz，1H，吡啶H-6)，8.70(d，J＝1.5Hz，1H，H-5)，8.25(dd，J1＝7.8Hz，J2＝0.6Hz，1H，吡啶H-3)，8.00(dd，J1＝7.8Hz，J2＝2Hz，1H，吡啶H-4)，7.54(dd，J1＝7.8Hz，J2＝1.2Hz，1H，吡啶H-5)，7.09(d，J＝1.5Hz，1H，H-7)，6.41(s，br，2H，NH2)，3.89(s，3H，OCH3)。
藥物活性化合物實施例9[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-哌啶-1-基-甲酮將20mg(0.24mmol)哌啶在1ml二噁烷中的溶液用0.24ml(0.24mmol)三甲基鋁的甲苯溶液處理并在室溫攪拌1小時。加入20mg(0.06mmol)8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲酯在1ml二噁烷中的溶液并將該混合物在90℃加熱72小時。加入0.5ml 1N HCl水溶液并除去揮發(fā)物。將殘余物加到1.5ml甲酸和0.5ml甲醇中，并通過反相制備型HPLC純化，用乙腈和水梯度洗脫。蒸發(fā)洗脫溶劑，獲得7mg(29％)標題化合物。
MS m/e(％)391.3(MH+，100)1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝8.21(s，1H，H-5)，7.14(dd，J1＝3.5Hz，1H，呋喃H-4)，6.82(d，J＝3.5Hz，1H，呋喃H-3)，6.56(s，1H，H-7)，6.26(s，br，2H，NH2)，1.62(m，4H，NCH2)，1.52(m，6H，CH2)。
根據(jù)實施例9，由實施例1-8所述的酯和相應的胺合成了其它[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酰胺衍生物。下面包括實施例10-實施例108的表中匯總了結果。



















片劑(濕法制粒)項成分mg/片5mg 25mg 100mg 500mg1.式I化合物 5251005002.無水乳糖DTG 125 105 30 1503.Sta-Rx 1500 66 6 304.微晶纖維素30 3030 1505.硬脂酸鎂 11 1 1總計167167167831制備方法1.混合1、2、3和4項并用純水制粒。
2.在50℃下干燥該顆粒。
3.用適宜的研磨設備使該顆粒過篩。
4.加入第5項并混合3分鐘；在適宜的壓片機上壓片。
膠囊制劑項成分mg/膠囊5mg 25mg 100mg 500mg1.式I化合物 5251005002.含水乳糖 159 123 148---3.玉米淀粉 25 3540 704.滑石粉10 1510 255.硬脂酸鎂 12 2 5總計200200300600制備方法1.將1、2和3項在適宜的混合器中混合30分鐘。
2.加入第4和5項并混合3分鐘。
3.填充到適合的膠囊中。
權利要求
1.通式I的化合物及其可藥用鹽， 其中R1是-NR′R″，其中R′和R″彼此獨立地是低級烷基、-(CH2)n-C(O)NRaRb、-(CH2)n-雜芳基、-(CH2)n-芳基、-(CH2)n-CN、-(CH2)n-O-低級烷基或-(CH2)n-環(huán)烷基，或者R′和R″與N原子一起形成5或6元非芳族環(huán)，該環(huán)可包含一個另外的O或S雜原子，并且該環(huán)可以是未取代的或者被一或兩個選自低級烷基、-C(O)NRaRb或-(CH2)n-O-低級烷基的取代基取代，其中Ra和Rb彼此獨立地是氫或低級烷基；R2是未取代的或被低級烷基或鹵素取代的芳基或雜芳基；n是0、1、2或3。
2.權利要求1的式I化合物，其中R2是雜芳基。
3.權利要求2的式I化合物，其中R2是被溴取代的呋喃-2-基。
4.權利要求3的式I化合物，其中該化合物是[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-哌啶-1-基-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-吡咯烷-1-基-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮，1-[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-羰基]-哌啶-3-甲酸二乙基酰胺，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(3，5-二甲基-哌啶-1-基)-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(2-甲基-哌啶-1-基)-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(2-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-((S)-2-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮，1-[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-羰基]-吡咯烷-2-甲酸(S)-二甲基酰胺，8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸二甲基氨基甲酰基甲基-甲基-酰胺，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(3-甲基-哌啶-1-基)-甲酮，8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲基-丙基-酰胺，8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸乙基-(2-吡啶-2-基-乙基)-酰胺，[8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-硫代嗎啉-4-基-甲酮，或8-氨基-2-(5-溴-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲基-苯乙基-酰胺。
5.權利要求2的式I化合物，其中R2是未取代的呋喃-2-基。
6.權利要求5的式I化合物，其中該化合物是(8-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基)-吡咯烷-1-基-甲酮，(8-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基)-(2-R-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮，(8-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基)-(2-S-甲氧基甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮或8-氨基-2-呋喃-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸二芐基酰胺。
7.權利要求2的式I化合物，其中R2是噻吩-2-基。
8.權利要求7的式I化合物，其中該化合物是8-氨基-2-噻吩-2-基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸二芐基酰胺。
9.權利要求2的式I化合物，其中R2是被甲基取代的呋喃-2-基。
10.權利要求9的式I化合物，其中該化合物是[8-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-吡咯烷-1-基-甲酮，[8-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-哌啶-1-基-甲酮，[8-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-基]-(2-甲基-吡咯烷-1-基)-甲酮或8-氨基-2-(5-甲基-呋喃-2-基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-6-甲酸甲基-丙基-酰胺。
11.權利要求1的式I化合物，其中R2是芳基。
12.權利要求11的式I化合物，其中R2是苯基。
13.一種藥物，包含一種或多種權利要求1-12任一項所述的式I化合物和可藥用賦形劑。
14.用于治療與腺苷受體有關之疾病的權利要求13的藥物。
15.權利要求1的式I化合物的制備方法，該方法包括將式II化合物 與式III的胺反應HNR′R″III得到式I化合物 其中R′、R″和R2具有上面給出的含義，并且如果需要，將所得化合物轉化為可藥用酸加成鹽。
16.通過權利要求15的方法或相當?shù)姆椒ㄖ苽涞臋嗬?-12任一項所述的化合物。
17.權利要求1-12任一項所述的化合物用于治療疾病的用途。
18.權利要求1-12任一項所述的化合物在制備用于治療與腺苷A2A受體有關之疾病的相應藥物中的用途。
19.前述的本發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(I)化合物或其可藥用鹽，其中R
文檔編號A61P11/06GK1564686SQ02819912
公開日2005年1月12日 申請日期2002年10月4日 優(yōu)先權日2001年10月8日
發(fā)明者M·H·內特科文, S·施米特 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司