專利名稱：還原型輔酶q的制作方法
技術領域：
本發明涉及還原型輔酶Q10(reduced coenzyme Q10)的穩定方法和利用它的保存方法、分離(結晶)方法以及組合物，還涉及還原型輔酶Q10的制備方法。與現已用作食品等的氧化型輔酶Q10相比，還原型輔酶Q10表現出高的口服吸收性，它是可以用作優質食品、營養功能食品、特定保健用食品、營養輔助劑、營養劑、動物藥物、飲料、飼料、化妝品、藥品、治療藥物、預防藥物等的化合物。
背景技術：
生物界中廣泛分布的苯醌衍生物——氧化型輔酶Q10，由于其維生素樣功能也被稱為維生素Q，是作為使減弱的細胞活性恢復健康狀態的營養源而使機體恢復活力的的成分。另一方面，還原型輔酶Q10是氧化型輔酶Q10的二電子還原體，氧化型輔酶Q10為橙色結晶，而還原型輔酶Q10為白色結晶。已知還原型輔酶Q10和氧化型輔酶Q10存在于線粒體、溶酶體、高爾基體、微粒體、過氧化物酶體或細胞膜等，作為電子傳遞系統的構成成分，參與ATP的生成活化、機體內的抗氧化作用、膜穩定化，是維持機體機能必不可少的物質。
還原型輔酶Q10容易被分子氧氧化成氧化型輔酶Q10，在工業規模的制備、保存和處理中極難完全除去或阻斷氧，并且，各操作所需的時間不同于實驗室規模的制備，需要極長的時間，因此，還原型輔酶Q10被殘留氧氧化成氧化型輔酶Q10等的不良影響大。這樣就難于在工業規模上獲得高質量的還原型輔酶Q10的結晶，即使制備了高品質的還原型輔酶Q10，在加工成食品、營養功能食品、特定保健用食品、營養輔助劑、營養劑、動物藥物、飲料、飼料、化妝品、藥品、治療藥物、預防藥物等或這些的原材料或組合物時，和/或加工后保存時，還原型輔酶Q10的氧化穩定性是極其重要的問題。在上述加工和保存時也極難完全除去或阻斷氧，特別是加工時的加熱或長期保存的過程中，殘留或混入的氧造成很大的不良影響。上述制備、保管、處理以及加工、保存中的氧化防護及其重要。上述還原型輔酶Q10氧化產生的副產物氧化型輔酶Q10降低還原型輔酶Q10的收率，并且，氧化型輔酶Q10難于從還原型輔酶Q10中分離，因此作為雜質混入產品還原型輔酶Q10中，出現純度降低，或者結晶變黃而給消費者和顧客不好的感覺的問題。
已知還原型輔酶Q10可以通過下述方法獲得(特開平10-109933好公報)例如，通過合成、發酵、從天然物提取等以外公知的方法得到輔酶Q10后，將還原型輔酶Q10的色譜洗脫液進行濃縮的方法等。該公開公報中記載，此時可以用硼氫化鈉、連二亞硫酸鈉等普通還原劑將上述還原型輔酶Q10中作為雜質存在的氧化型輔酶Q10還原，然后通過色譜法進行濃縮，另外，也可以通過上述還原劑作用于現有的高純度輔酶Q10的方法獲得還原型輔酶Q10。還已知用鋅作為還原劑的方法(Journal of Lavelled Compounds，第6卷，1970年，66-75)。但是，還原型輔酶Q10的上述制備方法不一定能滿足要求。例如，使用色譜法的方法在工業規模使用中比較麻煩，上述還原劑在工業規模使用時，或者在制備用于食品、營養功能食品、特定保健用食品、營養輔助劑、營養劑、動物藥物、飲料、飼料、化妝品、藥品、治療藥物、預防藥物等的還原型輔酶Q10時，存在產生氣體(氫、二氧化硫等)、臭氣、安全性、使用后的處理、處理困難等問題，因此不一定是優選的。通過色譜法獲得輔酶Q10的級分后用上述還原劑獲得還原型輔酶Q10的方法離優選的工業制備方法就更遠了。當工序和后處理的復雜時后述分子氧引起的氧化導致質量降低的原因。
進一步地，即使想分離通過上述方法獲得的還原型輔酶Q10，從還原型輔酶Q10對分子氧的不穩定性方面考慮，以高純度的狀態進行分離并不一定容易，例如，多得到含有以氧化型輔酶Q10為首的雜質的低純度結晶、半固體狀或油狀物。這樣，即使通過還原反應得到了完全或幾乎不含氧化型輔酶Q10的還原型輔酶Q10的反應混合物，也極難獲得高質量的還原型輔酶Q10的結晶。
因此，穩定還原型輔酶Q10，即保護其不被氧化是非常重要的課題，但是迄今為止還原型輔酶Q10沒有上市，有關穩定保持還原型輔酶Q10的方法等的研究基本上尚未進行。只發現上述WO01/52822A1稍微涉及了包含還原劑的組合物及其制備方法。
上述WO01/52822A1公開了下述方法用維生素C(即抗壞血酸、棕櫚酸抗壞血酸酯、硬脂酸抗壞血酸酯等抗壞血酸類)或維生素E等多種還原劑作為可以用于食品等的更優選的還原劑進行還原，由此制備還原型輔酶Q10。另外，還提出了將還原型輔酶Q10、還原劑和表面活性劑或植物油或它們的混合物等組成的組合物、以及用于將上述組合物制成明膠膠囊或片劑進行口服的組合物，進一步地，作為獲得上述組合物的方法，提出了用氧化型輔酶Q10和還原劑通過進行原位制備的方法。
上述組合物及其制備方法復雜、麻煩，這是由于期待上述組合物有多種作用(即，第一，用于將氧化型輔酶Q10還原成還原型輔酶Q10的反應的組合物；第二，用于穩定保持還原型輔酶Q10的組合物)的原因。換而言之，在極特殊的環境中，將氧化型輔酶Q10還原成還原型輔酶Q10的同時，可以穩定地保持還原型輔酶Q10。但是，該方法是在表面活性劑或植物油等高沸點成分或脂溶性成分中進行還原的方法，還原反應后還原型輔酶Q10的分離很困難，實質上限制了上述穩定方法和組合物直接應用到食用等方面。上述方法僅在反應混合物中可以保持還原型輔酶Q10的純粹狀態，是原位制備。
上述WO01/52822A1記載的組合物中，作為溶劑，可以根據需要含有例如甘油、1，2-丙二醇等多元醇或乙醇等有機溶劑0.25～50重量％，優選1～25重量％，更優選1.5～15-20重量％。但是，上述多元醇或乙醇不是必需成分，本發明說明書的實施例中，實施例2記載了不含這些物質的組合物，實施例4記載了含甘油或丙二醇1.63重量％的組合物，實施例1和3中分別記載了含甘油4重量％、3.55重量％的組合物。
本發明對還原型輔酶Q10的穩定化進行了預備研究，結果發現，維生素C類有穩定效果，但維生素E沒有穩定效果，另外，維生素C類與甘油等3元或3元以上的醇一起使用時，穩定效果非常小。
上述WO01/52822A1中沒有詳細記載組合物中所含的還原型輔酶Q10的質量和穩定效果等，也沒有特別公開與一元醇的組合發揮極其優良的穩定效果。進一步地，對利用維生素C類與一元和/或二元醇的并用產生的穩定效果的結晶方法、組合物以及處理、保存(包括在通常遇到的溫度下的長期穩定保存)也沒有描述。
因此，在還原氧化型輔酶Q10來制備還原型輔酶Q10并穩定保存的方法中，現有方法并不一定能滿足要求。在這種情況下，亟待開發克服了上述問題的適用性高的穩定方法和利用該方法的保存方法、分離(結晶)方法以及組合物。另外，也希望開發不僅以反應混合物的形式得到高質量的還原型輔酶Q10、還可以方便地獲得結晶，便于用于各種用途的制備方法。
發明概述鑒于上述問題，本發明的目的是提供還原型輔酶Q10的簡便并且合適的穩定方法、利用該方法的保存方法、分離(結晶)方法和組合物。進一步地，本發明的目的是提供利用上述穩定方法制備具有廣泛應用性的還原型輔酶Q10的方法。
本發明認為，如果能夠建立優良的穩定方法，則可以將該穩定方法恰當地用于保存方法、分離(結晶、制備)方法或組合物。因此，進行悉心研究，發現以下結果，從而完成本發明(1)在枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的存在下，可以很好地保護還原型型輔酶Q10不被分子氧氧化，特別是在一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性溶劑的存在下，可以很好地防護。
(2)通過在枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的存在下進行結晶，還原型輔酶Q10可以在使氧化型輔酶Q10的附帶生成最小化的狀態下轉化成結晶狀態，從而獲得高質量的還原型輔酶Q10結晶，特別是在一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性溶劑的存在下，可以很好地結晶。
(3)用抗壞血酸類將氧化型輔酶Q10還原成還原型輔酶Q10后，通過使生成的還原型輔酶Q10在抗壞血酸類的存在下繼續結晶，可以在使氧化型輔酶Q10的附帶生成最小化的狀態下轉化成結晶狀態，從而獲得高質量的還原型輔酶Q10結晶，特別是在一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性有機溶劑的存在下，可以很好地實施。
即，本發明涉及還原型輔酶Q10的穩定方法，其特征在于，使還原型輔酶Q10與枸櫞酸類共存。
本發明還涉及還原型輔酶Q10的穩定方法，其特征在于，該方法是通過使還原型輔酶Q10與抗壞血酸類共存將還原型輔酶Q10穩定化的方法，所述共存在一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑的存在下進行，一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑占全部混合物的5重量％或以上。
另外，本發明還涉及還原型輔酶Q10的結晶方法，其特征在于，使還原型輔酶Q10在含有枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的溶劑中結晶。
進一步地，本發明還涉及還原型輔酶Q10的制備方法，其特征在于，用抗壞血酸類將氧化型輔酶Q10還原成還原型輔酶Q10后，生成的還原型輔酶Q10的枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的存在下繼續結晶。
另外，本發明還涉及將通過上述方法穩定的還原型輔酶Q10在50℃或50℃以下保存的還原型輔酶Q10的保存方法。
本發明進一步涉及含有還原型輔酶Q10的組合物，其特征在于，含有還原型輔酶Q10和枸櫞酸類。本發明和涉及含有還原型輔酶Q10的組合物，其特征在于，含有還原型輔酶Q10、抗壞血酸類以及一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑，并且一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑占全部混合物的5重量％或以上。
根據本發明，用安全并且容易處理的試劑，可以根據其目的或用途適當選擇溶劑，可以適用于還原型輔酶Q10的分離或進一步衍生化、食用或藥物用等的組合物，是可以廣法使用的方法，因此其益處很大。
發明詳述下面詳細說明本發明。
實施本發明時，采用枸櫞酸類和/或抗壞血酸類，抑制還原型輔酶Q10氧化成氧化型輔酶Q10，從而使還原型輔酶Q10穩定化，或者穩定地保存還原型輔酶Q10。從而獲得高質量的還原型輔酶Q10。
對枸櫞酸類(citric acid or a related compound thereof)沒有特別限制，可以列舉枸櫞酸、枸櫞酸異丙酯、枸櫞酸乙酯、枸櫞酸丁酯、枸櫞酸甘油酯等枸櫞酸酯和枸櫞酸鈉、枸櫞酸鉀等鹽。特別優選枸櫞酸、枸櫞酸異丙酯、枸櫞酸甘油酯。本發明還原型輔酶Q10的穩定方法、保存方法、結晶方法和組合物中，可以根據其目的或用途自由選擇上述枸櫞酸類。這些枸櫞酸類可以單獨或多種混合使用，也可以與后述抗壞血酸類并用。
對抗壞血酸類(ascorbic acid or a related compound thereof)沒有特別限制，不僅包括抗壞血酸、還包括例如鼠李糖型抗壞血酸(rhamno-ascorbic acid)、阿拉伯糖型抗壞血酸、葡糖型抗壞血酸、巖藻糖型(fuco)抗壞血酸、葡庚糖型(glucohepto)抗壞血酸、木糖型抗壞血酸、半乳糖型抗壞血酸、古洛糖型(gulo)抗壞血酸、阿洛糖型(allo)抗壞血酸、赤糖型(erythro)抗壞血酸、6-脫氧抗壞血酸等抗壞血酸衍生物，也可以是它們的酯或鹽。這些物質可以是L-構型、D-構型或外消旋體。具體地，可以列舉例如L-抗壞血酸、棕櫚酸L-抗壞血酸酯(L-ascorbyl palmitate)、硬脂酸L-抗壞血酸酯、2棕櫚酸L-抗壞血酸酯、L-抗壞血酸鈉、L-抗壞血酸鈣、D-阿拉伯糖型-抗壞血酸等。在本發明的還原型輔酶Q10結晶制備方法中，可以適當使用上述抗壞血酸中的任何一種，但考慮到與生成的還原型輔酶Q10的分離容易性等，上述抗壞血酸系列化合物中，特別優選用水溶性高的物質，從便于獲得、價格等方面考慮，最優選L-抗壞血酸、D-阿拉伯糖型-抗壞血酸等游離體。在本發明還原型輔酶Q10的穩定方法、保存方法、結晶方法和組合物中，可以根據其目的或用途自由選擇上述抗壞血酸類。這些抗壞血酸類可以單獨或多種混合使用，也可以與前述枸櫞酸類并用。
本發明還原型輔酶Q10的穩定方法、保存方法、結晶方法和組合物中均可以使用上述枸櫞酸類和/或抗壞血酸類。另外，在本發明的還原型輔酶Q10的制備方法中，可以特別優選使用上述抗壞血酸類，根據需要，也可以與上述枸櫞酸類并用。
還原型輔酶Q10不特別限于與枸櫞酸類和/或抗壞血酸類共存的形態，即，使還原型輔酶Q10與枸櫞酸類和/或抗壞血酸類接觸的形態。可以列舉下述情況，例如，還原型輔酶Q10和枸櫞酸類和/或抗壞血酸類一起以固相存在的情況；在含有還原型輔酶Q10的液相中，至少一種枸櫞酸類和/或抗壞血酸類以固相存在的情況；在含有至少一種枸櫞酸類和/或抗壞血酸類中的液相中，還原型輔酶Q10以固相存在的情況；還原型輔酶Q10與枸櫞酸類和/或抗壞血酸類都為液相，或都存在于液相中的情況等。上述液相可以均勻，也可以不均勻(由不同的多種液相構成)，但優選均勻。當然，還原型輔酶Q10與枸櫞酸類和/或抗壞血酸類接觸效率高的系統有利于氧化防護，特別優選還原型輔酶Q10與枸櫞酸類和/或抗壞血酸類都為液相，或都存在于液相中的情況，另外，優選液相均勻。當然，包含還原型輔酶Q10的液相可以是還原型輔酶Q10的溶液，也可以是還原型輔酶Q10的熔融液(melt)。
對本發明所用的溶劑沒有特別限制，可以列舉烴類、脂肪酸酯類、醚類、醇類、脂肪酸類、酮類、氮化合物類(包括腈類、酰胺類)，硫化合物類和水等。上述溶劑也可以任意兩種或兩種以上混合使用。
對烴沒有特殊限制，可以列舉脂肪烴、芳烴、鹵代烴等。特別優選脂肪烴、芳烴，更優選脂肪烴。
作為脂肪烴、不論環狀或非環狀，或者飽和或不飽和，對其沒有特殊限制，但一般優選使用飽和脂肪烴。通常優選使用碳原子數為3～20，特別優選碳原子數為5～12，更優選碳原子數為5～8的脂肪烴。具體例子可以列舉丙烷、丁烷、異丁烷、戊烷、2-甲基丁烷、己烷、2-甲基戊烷、2，2-二甲基丁烷、2，3-二甲基丁烷、庚烷、庚烷異構體(例如2-甲基己烷、3-甲基己烷、2，3-二甲基戊烷、2，4-二甲基戊烷)、辛烷、2，2，3-三甲基戊烷、異辛烷、壬烷、2，2，5-三甲基己烷、癸烷、十二烷、2-戊烯、1-己烯、1-庚烯、1-辛烯、1-壬烯、1-癸烯、環戊烷、甲基環戊烷、環己烷、甲基環己烷、乙基環己烷、對-薄荷烷(p-menthane)和環己烯等。優選戊烷、2-甲基丁烷、己烷、2-甲基戊烷、2，2-二甲基丁烷、2.3-二甲基丁烷、庚烷、庚烷異構體(例如2-甲基己烷、3-甲基己烷、2，3-二甲基戊烷、2，4-二甲基戊烷)、辛烷、2，2，3-三甲基戊烷、異辛烷、壬烷、2，2，5-三甲基己烷、癸烷、十二烷、環戊烷、甲基環戊烷、環己烷、甲基環己烷、乙基環己烷和對薄荷烯等。特別優選戊烷、2-甲基丁烷、己烷、2-甲基戊烷、2，2-二甲基丁烷、2，3-二甲基丁烷、庚烷、庚烷異構體(例如2-甲基己烷、3-甲基己烷、2，3-二甲基庚烷、2，4-二甲基庚烷)、辛烷、2，2，3-三甲基戊烷、異辛烷、環戊烷、甲基環戊烷、環己烷、甲基環己烷、乙基環己烷等。一般來說，優選庚烷，優選使用具有7個碳原子的甲基環己烷等多種庚烷或它們的多種混合物。通常優選使用碳原子數為5的戊烷類(例如戊烷等)、碳原子數為6的己烷類(例如己烷、環己烷等)、碳原子數為7的庚烷類(例如庚烷、甲基環己烷等)，但最優選庚烷類(例如庚烷、甲基環己烷等)，特別優選庚烷。
對芳烴沒有特別限制，但通常優選使用碳原子數為6～20，特別優選碳原子數為6～12，更優選碳原子數為7～10的芳烴。具體例子可以列舉苯、甲苯、二甲苯、鄰二甲苯、間二甲苯、對二甲苯、乙基苯、枯烯、均三甲苯、四氫萘(tetralin)、丁基苯、對甲基異丙基苯、環己基苯、二乙基苯、戊基苯、二戊基苯、月桂基苯和苯乙烯等。優選甲苯、二甲苯、鄰二甲苯、間二甲苯、對二甲苯、乙基苯、枯烯、均三甲苯、四氫萘、丁基苯、對甲基異丙基苯、環己基苯、二乙基苯、戊基苯等。特別優選甲苯、二甲苯、鄰二甲苯、間二甲苯、對二甲苯、枯烯和四氫萘等。最優選枯烯。
作為鹵代烴，不論環狀或非環狀，或者飽和或不飽和，對其沒有特殊限制，但一般優選使用非環狀的鹵代烴。通常優選使用氯代烴、氟代烴，特別優選氯代烴。適合使用碳原子數為1～6，特別優選碳原子數為1～4，更優選碳原子數為1～2的鹵代烴。具體例子可以列舉二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1，1-二氯乙烷、1，2-二氯乙烷、1，1，1-三氯乙烷、1，1，2-三氯乙烷、1，1，1，2-四氯乙烷、1，1，2，2-四氯乙烷、五氯乙烷、六氯乙烷、1，1-二氯乙烯、1，2-二氯乙烯、三氯乙烯、四氯乙烯、1，2-二氯丙烷、1，2，3-三氯丙烷、氯苯、1，1，1，2-四氟乙烷等。優選二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1，1-二氯乙烷、1，2-二氯乙烷、1，1，1-三氯乙烷、1，1，2-三氯乙烷、1，1-二氯乙烯、1，2-二氯乙烯、三氯乙烯、1，1，1，2-四氟乙烷等。特別優選二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、三氯乙烯、氯苯、1，1，1，2-四氟乙烷等。
對脂肪酸酯類沒有特殊限制，可以列舉丙酸酯、醋酸酯、甲酸酯等。特別優選醋酸酯、甲酸酯，更優選乙酸酯。沒有特別限制，但一般使用碳原子數為1～8的烷基酯或芳烷基酯，優選碳原子數為1～6的烷基酯，更優選碳原子數為1～4的烷基酯。丙酸酯的具體例子可以列舉丙酸甲酯、丙酸乙酯、丙酸丁酯、丙酸異戊酯等。醋酸酯的具體例子可以列舉醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸丙酯、醋酸異丙酯、醋酸丁酯、醋酸異丁酯、醋酸仲丁酯、醋酸戊酯、醋酸異戊酯、醋酸仲己酯、醋酸環己酯、醋酸芐酯等，優選醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸丙酯、醋酸異丙酯、醋酸丁酯、醋酸異丁酯、醋酸仲丁酯、醋酸戊酯、醋酸異戊酯、醋酸仲己酯、醋酸環己酯等，最優選醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸丙酯、醋酸異丙酯、醋酸丁酯、醋酸異丁酯等，尤其優選醋酸乙酯。甲酸酯的具體例子可以列舉甲酸甲酯、甲酸乙酯、甲酸丙酯、甲酸異丙酯、甲酸丁酯、甲酸異丁酯、甲酸仲丁酯、甲酸戊酯等。優選甲酸甲酯、甲酸乙酯、甲酸丙酯、甲酸丁酯、甲酸異丁酯、甲酸戊酯等，最優選甲酸乙酯。
作為醚類，不論環狀或非環狀，或者飽和或不飽和，對其沒有特殊限制，但一般優選使用飽和醚類。通常優選使用碳原子數為3～20，特別優選碳原子數為4～12，更優選碳原子數為4～8的醚類。具體例子可以列舉乙醚、甲基叔丁基醚、二丙基醚、二異丙基醚、二丁基醚、二己基醚、乙基乙烯基醚、丁基乙烯基醚、苯甲醚、苯乙醚、丁基苯基醚、甲氧基甲苯、二噁烷、呋喃、2-甲基呋喃、四氫呋喃、四氫吡喃、乙二醇二甲基醚、乙二醇二乙基醚、乙二醇二丁基醚、乙二醇一甲基醚、乙二醇一乙基醚、乙二醇二丁基醚等。優選乙醚、甲基叔丁基醚、二丙基醚、二異丙基醚、二丁基醚、二己基醚、苯甲醚、苯乙醚、丁基苯基醚、甲氧基甲苯、二噁烷、2-甲基呋喃、四氫呋喃、四氫吡喃、乙二醇二甲基醚、乙二醇二乙基醚、乙二醇二丁基醚、乙二醇一甲基醚、乙二醇一乙基醚等。特別優選乙醚、甲基叔丁基醚、苯甲醚、二噁烷、四氫呋喃、乙二醇一甲基醚、乙二醇一乙基醚等。最優選乙醚、甲基叔丁基醚、苯甲醚、二噁烷、四氫呋喃等。尤其優選二噁烷、四氫呋喃。
作為腈類，不論環狀或非環狀，或者飽和或不飽和，對其沒有特殊限制，但一般優選使用飽和腈類。通常優選使用碳原子數為2～20，特別優選碳原子數為2～12，更優選碳原子數為2～8的腈類。具體例子可以列舉乙腈、丙腈、丙二腈(マロノニトリル)、丁腈、異丁腈、丁二腈、戊腈、戊二腈、己腈、庚基腈、辛基腈、十一烷基腈、十二烷基腈、十三烷基腈、十五烷基腈、硬脂腈、氯代乙腈、溴代乙腈、氯代丙腈、溴代丙腈、甲氧基乙腈、氰基乙酸甲酯、氰基乙酸乙酯、甲苯基腈、芐腈、氯代芐腈、溴代芐腈、氰基苯甲酸、硝基芐腈、茴香腈、對苯二甲腈、溴代甲苯基腈、甲基氰基苯甲酸酯、甲氧基芐腈、乙酰基芐腈、萘甲腈、二苯基腈、苯基丙腈、苯基丁腈、甲基苯基乙腈、二苯基乙腈、萘基乙腈、硝基苯基乙腈、氯苯乙腈、環丙烷腈、環己烷腈、環庚烷腈、苯基環己烷腈、甲苯基環己烷腈等，其中優選乙腈。
作為醇類，不論環狀或非環狀，或者飽和或不飽和，對其沒有特殊限制，但一般優選使用飽和醇類。通常使用碳原子數為1～20，特別是碳原子數為1～12，尤其是碳原子數為1～6的醇類，其中優選碳原子數為1～5的一元醇或優選碳原子數為2～5的二元醇。這些醇類的具體例子可以列舉甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇、叔戊醇、3-甲基-2-丁醇、新戊醇、1-己醇、2-甲基-1-戊醇、4-甲基-2-戊醇、2-乙基-1-丁醇、1-庚醇、2-庚醇、3-庚醇、1-辛醇、2-辛醇、2-乙基-1-己醇、1-壬醇、1-癸醇、1-十一烷醇、1-十二烷醇、烯丙醇、炔丙醇、芐醇、環己醇、1-甲基環己醇、2-甲基環己醇、3-甲基環己醇、4-甲基環己醇、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、2-(甲氧基甲氧基)乙醇、2-異丙氧基乙醇、2-丁氧基乙醇、2-(異戊氧基)乙醇、2-(己氧基)乙醇、糠醇、二乙二醇單甲基醚、二乙二醇單乙基醚、二乙二醇單丁基醚、三乙二醇單甲基醚、1-甲氧基-2-丙醇、1-乙氧基-2-丙醇、二丙二醇單甲基醚、二乙二醇單乙基醚、三乙二醇單甲基醚、1，2-乙二醇、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、1，2-丁二醇、1，3-丁二醇、1，4-丁二醇、2，3-丁二醇、1，5-戊二醇、2-丁烯-1，4-二醇、2-甲基-2，4-戊二醇、2-乙基-1，3-己二醇、二乙二醇、三乙二醇、四乙二醇、聚乙二醇、二丙二醇、聚丙二醇等。
一元醇優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇、叔戊醇、3-甲基-2-丁醇、新戊醇、1-己醇、2-甲基-1-戊醇、4-甲基-2-戊醇、2-乙基-1-丁醇、1-庚醇、2-庚醇、3-庚醇、1-辛醇、2-辛醇、2-乙基-1-己醇、1-壬醇、1-癸醇、1-十一烷醇、1-十二烷醇、芐醇、環己醇、1-甲基環己醇、2-甲基環己醇、3-甲基環己醇、4-甲基環己醇、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、2-(甲氧基甲氧基)乙醇等，特別優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇、叔戊醇、3-甲基-2-丁醇、新戊醇、1-己醇、2-甲基-1-戊醇、4-甲基-2-戊醇、2-乙基-1-丁醇、環己醇等，這其中又優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇、叔戊醇、3-甲基-2-丁醇、新戊醇等，最優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇等，這其中又優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇，特別優選乙醇。
二元醇優選1，2-乙二醇、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、2-丁烯-1，4-二醇、2-甲基-2，4-戊二醇、2-乙基-1，3-己二醇、二乙二醇、三乙二醇、四乙二醇、聚乙二醇、二丙二醇、聚丙二醇等，最優選1，2-丙二醇、聚乙二醇。
使用枸櫞酸類時，也可以使用三元醇，三元醇優選甘油。
脂肪酸類可以列舉甲酸、乙酸、丙酸、油酸、亞油酸、亞麻酸等，優選甲酸、乙酸，最優選乙酸。
對酮類沒有特殊限制，通常適合使用碳原子數為3～6的酮類。具體例子可以列舉丙酮、甲基乙基酮、甲基丁基酮、甲基異丁基酮等，特別優選丙酮、甲基乙基酮，最優選丙酮。
氮化合物可以列舉硝基甲烷、三乙胺、吡啶、甲酰胺、N-甲基甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮等。
硫化合物可以列舉二甲亞砜、環丁砜等。
上述溶劑中，烴類、脂肪酸酯類、醚類或腈類，優選水溶性的醚類或腈類(例如四氫呋喃、二噁烷、乙腈等)，是氧化防護效果高的溶劑，因此，它們可以促進枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的還原型輔酶Q10穩定化效果，抑制副產物氧化型輔酶Q10的產生。
另外，上述溶劑中，一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑(優選水溶性有機溶劑)發揮抗壞血酸類和/或枸櫞酸類的顯著的氧化防護效果，最好地發揮本發明的效果。使用抗壞血酸類時，與一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑(優選水溶性有機溶劑)共存效果好，其中與一價醇的共存效果特別好。
一元或二元醇可以具體列舉甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇、叔戊醇、3-甲基-2-丁醇、新戊醇、1-己醇、2-甲基-1-戊醇、4-甲基-2-戊醇、2-乙基-1-丁醇、1-庚醇、2-庚醇、3-庚醇、1-辛醇、2-辛醇、2-乙基-1-己醇、1-壬醇、3，5，5-三甲基-1-己醇、1-癸醇、1-十一烷醇、1-十二烷醇、烯丙醇、炔丙醇、芐醇、環己醇、1-甲基環己醇、2-甲基環己醇、3-甲基環己醇、4-甲基環己醇、芐醇、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、2-(甲氧基甲氧基)乙醇、2-異丙氧基乙醇、2-丁氧基乙醇、2-(異戊氧基)乙醇、2-(己氧基)乙醇、糠醇、二乙二醇單甲基醚、二乙二醇單乙基醚、二乙二醇單丁基醚、三乙二醇單甲基醚、1-甲氧基-2-丙醇、1-乙氧基-2-丙醇、二丙二醇單甲基醚、二乙二醇單乙基醚、三乙二醇單甲基醚、1，2-乙二醇、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、1，2-丁二醇、1，3-丁二醇、1，4-丁二醇、2，3-丁二醇、1，5-戊二醇、2-丁烯-1，4-二醇、2-甲基-2，4-戊二醇、2-乙基-1，3-己二醇、二乙二醇、三乙二醇、四乙二醇、聚乙二醇、二丙二醇、聚丙二醇等。一元醇優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇、叔戊醇、3-甲基-2-丁醇、新戊醇、1-己醇、2-甲基-1-戊醇、4-甲基-2-戊醇、2-乙基-1-丁醇、1-庚醇、2-庚醇、3-庚醇、1-辛醇、2-辛醇、2-乙基-1-己醇、1-壬醇、1-癸醇、1-十一烷醇、1-十二烷醇、芐醇、環己醇、1-甲基環己醇、2-甲基環己醇、3-甲基環己醇、4-甲基環己醇、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、2-(甲氧基甲氧基)乙醇等，特別優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇、叔戊醇、3-甲基-2-丁醇、新戊醇、1-己醇、2-甲基-1-戊醇、4-甲基-2-戊醇、2-乙基-1-丁醇、環己醇等，這其中又優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇、叔戊醇、3-甲基-2-丁醇、新戊醇等，最優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、2-甲基-1-丁醇、異戊醇等，這其中又優選甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇，特別優選乙醇。二元醇優選1，2-乙二醇、1，2-丙二醇、1，3-丙二醇、2-丁烯-1，4-二醇、2-甲基-2，4-戊二醇、2-乙基-1，3-己二醇、二乙二醇、三乙二醇、四乙二醇、聚乙二醇、二丙二醇、聚丙二醇等，最優選1，2-丙二醇、聚乙二醇。
醇以外的水溶性溶劑可以列舉四氫呋喃、二噁烷等醚類，丙酮、甲基乙基酮等酮類，乙腈、二甲亞砜等氮化合物和水等，優選四氫呋喃、丙酮，更優選丙酮。
其中，用于食用和醫藥用時，乙醇、1，2-丙二醇、聚乙二醇(優選分子量為300～1000的聚乙二醇)等特別合適，當然，也適合使用它們的混合物。
對上述溶劑的用量沒有特殊限制，只要是能夠產生預期的合適效果和能力的量(即有效量)即可。一般地，在全部混合物中，例如通常為5重量％或以上，優選10重量％或以上，更優選20重量％或以上，特別優選30重量％或以上，尤其優選40重量％或以上，特別是50重量％或以上，最優選超過50重量％。
特別是在抗壞血酸類的情況下，優選上述溶劑的用量為60重量％或以上，更優選70重量％或以上，進一步優選80重量％或以上。
另外，從最大限度地發揮枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的效果的角度出發，優選簡單的組成，優選基本上不含植物油和/或表面活性劑。
首先說明還原型輔酶Q10的穩定方法和保存方法。
本發明所用的枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的用量，例如只要是能夠產生預期的合適效果和能力的量(即有效量)即可。具體地，只要是可以防止還原型輔酶Q10氧化成氧化型輔酶Q10的有效量即可。因此，盡管根據枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的種類有所不同，對其用量沒有特別限制，通常相對100重量份的還原型輔酶Q10，其用量為0.1重量份或以上，優選1重量份或以上，更優選10重量份或以上。有溶劑混合存在時，根據枸櫞酸類或抗壞血酸類的種類其用量有所不同，相對100重量份的溶劑，其用量通常為0.01重量份或以上，優選0.1重量份或以上，更優選1重量份或以上。
溶劑中還原型輔酶Q10的氧化防護效果有在還原型輔酶Q10的高濃度溶液中更高的傾向，因此沒有特別限制，對100重量分的溶劑，還原型輔酶Q10通常為1重量份以上，優選2重量份以上的濃度。另外，保存時可能更有效。
實施本發明的穩定方法時，對溫度沒有特殊限制，但是，為了最大限度地發揮穩定效果，通常為50℃或以下，優選40℃或以下，更優選30℃或以下。
因此，將通過上述穩定方法穩定的還原型輔酶Q10在50℃或以下，優選40℃或以下，更優選30℃或以下保存的方案也包括在本發明的范圍內。
如上所述，根據本發明，通過使用上述枸櫞酸類和/或抗壞血酸類，可以防止還原型輔酶Q10被分子氧氧化，從而穩定化。因此，可以在萃取、水洗、濃縮、柱色譜等操作時適當地實施，并且可以穩定地保存還原型輔酶Q10。
其次，說明本發明的結晶方法。本發明中，使還原型輔酶Q10在包含枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的溶劑中結晶。
結晶所用的還原型輔酶Q10可以通過例如合成、發酵、從天然物中萃取等以外公知的方法獲得。優選通過還原還原型輔酶Q10中所含的氧化型輔酶Q10或氧化型輔酶Q10而獲得，更優選利用后述本發明的還原反應獲得的還原型輔酶Q10。
本發明的結晶方法也可以適用于含有較多氧化型輔酶Q10的還原型輔酶Q10，但對通過后述還原方法等制備的高純度還原型輔酶Q10特別有效。本發明中，一并除去含有還原型輔酶Q10的反應液或萃取液中所含的雜質的精制晶析特別有效，所述還原型輔酶Q10通過現有公知的方法獲得，或者通過后述的還原方法制備。由此可以從母液中除去通常不一定容易除去的結構類似的化合物(具體為還原型輔酶Q9、還原型輔酶Q8和還原型輔酶Q7等)。當然，上述精制晶析作為再精制還原型輔酶Q10的重結晶法也非常有效。
還原型輔酶Q10的結晶中，可以將冷卻、濃縮、溶劑置換、弱溶劑的使用等一般結晶操作單獨或適當組合實施。特別優選使用或并用冷卻操作(冷卻晶析)。
本發明所用的枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的用量，例如只要是能夠產生預期的合適效果和能力的量(即有效量)即可。具體地，只要是可以防止還原型輔酶Q10氧化成氧化型輔酶Q10的有效量即可。一般地，盡管根據枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的種類其用量有所變化，對其用量沒有特別限制，通常相對100重量份的還原型輔酶Q10，其用量為0.1重量份或以上，優選1重量份或以上，更優選10重量份或以上。相對100重量份的溶劑，其用量通常為0.01重量份或以上，優選0.1重量份或以上，更優選1重量份或以上。其上限沒有特別限制，但從經濟方面考慮，通常為10重量份或以下，優選5重量份或以下，更優選1重量份或以下即可。
還原型輔酶Q10的結晶優選在強制流動下實施。為了抑制過飽和的形成，順利成核、使晶體成長，或者，從提供質量的方面考慮，單位容積攪拌所需的動力通常為約0.01kW/m3或以上，優選約0.1kW/m3或以上，更優選約0.3kW/m3或以上的流動。通常通過攪拌葉的旋轉來提供上述強制流動，但不一定必須用攪拌葉來獲得上述流動，也可以利用例如液體循環的方法等。
結晶時，為了抑制過飽和的形成，順利成核、使晶體成長，優選添加晶種。
還原型輔酶Q10的結晶溫度(結晶時的冷卻溫度)因結晶溶劑的種類和結晶方法而異，因此不能統一規定，例如，優選25℃或以下，更優選20℃或以下，特別是15℃或以下，尤其是10℃或以下。下限為體系的固化溫度。通常可以在0～25℃左右實施。
為了使得到的還原型輔酶Q10中混入的各種雜質最少，或者為了獲得性狀良好的漿液，結晶時可以控制單位時間內的析出的結晶量。單位時間內的晶體析出量優選為例如單位時間析出總晶體析出量的約50％量的速度以下(即最大為50％總量/小時)，優選單位時間析出總晶體析出量的約25％量的速度以下(即最大為25％總量/小時)。另外，冷卻晶析過程中的冷卻速度通常為約40℃/小時以下，優選約20℃/小時以下。
溶劑中還原型輔酶Q10的氧化防護效果有在還原型輔酶Q10的高濃度溶液中更高的傾向，因此沒有特別限制，對100重量份的溶劑，還原型輔酶Q10通常為1重量份以上，優選2重量份以上的濃度結晶可能更有效。另外，結晶濃度的上限因結晶溶劑的種類和結晶方法而異，因此不能統一規定，例如，對結晶完畢時的結晶溶劑100重量份，還原型輔酶Q10優選約15重量份或以下，更優選約13重量份或以下，特別是約10重量份或以下。通常可以用約5～10重量份實施。
按照上述方法獲得的還原型輔酶Q10優選通過例如離心分離、加壓過濾、減壓過濾等進行固液分離，進一步地，可以根據需要洗滌濾餅，得到濕體物。另外，將濕體物裝入內部用惰性氣體置換的減壓干燥器(真空干燥器)中，在減壓下干燥，可以得到干燥物，優選獲得干燥物的形式。
上述結晶方法中可以使用的溶劑可以列舉上述的烴類、脂肪酸酯類、醚類、醇類、脂肪酸類、酮類、氮化合物類(包括腈類和酰胺類)、硫化合物類和水等，但最適合使用的溶劑是如上所述的一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑。特別優選的溶劑為甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、丙酮、甲乙酮或水或它們的混合物，特別優選是乙醇、丙酮或它們的混合物。
使用一元或二元醇或酮，優選一元或二元醇或水溶性的酮(具體地，甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、丙酮、甲乙酮等，優選乙醇、丙酮等)時，可以獲得漿狀物形狀或結晶性狀的好還原型輔酶Q10結晶。
進一步地，從適當降低還原型輔酶Q10的溶解性從而獲得高收率、改善漿狀物性狀、特別值得注意的是大幅改善固液分離性(過濾性)這些方面考慮，特別優選在一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑中存在少量的水。一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑與水的比例因溶劑的種類而異，因此不能統一規定。只要是實質上以一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑為主成分的溶劑，則沒有特殊限制，但對于100重量份的總溶劑，上述一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑的比例下限通常為約90重量份，優選約91重量份，更優選約92重量份，特別優選約93重量份，上限為約99.5重量份，優選約99重量份，更優選約98重量份，特別優選約97重量份。通常在約93～97重量份最適合實施。
溶劑中的還原型輔酶Q10的氧化防護效果有在還原型輔酶Q10的高濃度溶液中則更高的傾向，因此沒有特別限制，但對于100重量份的溶劑，作為還原型輔酶Q10，通常使之在1重量份或1重量份以上，優選2重量份或2重量份以上的濃度結晶則更有效。
根據本發明，通過使還原型輔酶Q10在抗壞血酸類和/或枸櫞酸類的存在下結晶，可以在使不希望發生的氧副反應最小化的狀態下結晶，以高收率獲得高質量的還原型輔酶Q10。
通過本發明的結晶方法獲得的還原型輔酶Q10結晶質量極高，可以期望還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比達到98/2或更高，優選99/1或更高。
下面說明還原型輔酶Q10的制備方法。本發明中，用抗壞血酸類將氧化型輔酶Q10還原成還原型輔酶Q10后，使生成的還原型輔酶Q10在枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的存在下繼續結晶(直接分離法(ワンポツト)。所述“繼續結晶”是指對還原反應所得的反應液不進行萃取、洗滌等附加操作便進行結晶。由此使操作簡便并且最短，從而可以使分子氧導致的氧化最小化。
首先對還原反應進行說明。本發明中，使用上述的抗壞血酸類作為還原劑。
上述抗壞血酸類的用量沒有特殊限制，例如，只要是可以產生預期的合適效果或能力的量(即有效量)即可，具體地，只要是可以將氧化型輔酶Q10變成還原型輔酶Q10的有效量即可。一般來說，對于氧化型輔酶Q10，通常為1倍摩爾量或以上，優選1.2倍摩爾量或以上。對上限沒有特殊限制，從經濟性方面考慮，通常為10倍摩爾量，優選5倍摩爾量，更優選3倍摩爾量。
另外，盡管枸櫞酸類不起還原劑的作用，但從持續結晶時的穩定效果方面考慮，可以從還原反應時添加枸櫞酸類。
采用上述抗壞血酸類的還原可以使制備還原型輔酶Q10時作為反應促進劑(例如降低反應溫度，縮短反應時間等)的堿性物質或亞硫酸氫鹽等具有反應促進效果的添加劑共存而實施。
對上述減小物質沒有特殊限制，例如，不管是無機化合物或有機化合物都可以使用。對所述無機化合物沒有特殊限制，例如金屬氫氧化鈉(優選堿金屬氫氧化物和堿土金屬氫氧化物)，碳酸鹽和碳酸氫鹽。可以列舉例如氫氧化鈉等堿金屬氫氧化物、碳酸鈉等堿金屬碳酸鹽、碳酸氫鈉等堿金屬碳酸氫鹽和碳酸鎂等堿土類金屬碳酸鹽等。對上述有機化合物沒有特殊限制，可以列舉三乙胺等胺類等。上述堿性物質中，特別優選使用金屬(優選堿金屬、堿土類金屬等)的碳酸鹽、碳酸氫鹽、銨等無機化合物，三乙胺等胺等有機化合物等弱堿性物質。最優選上述無機化合物，更優選上述弱堿性無機化合物。
另外，亞硫酸氫鹽可以列舉例如亞硫酸氫鈉等堿金屬亞硫酸氫鹽等合適的物質。
上述添加劑的量只要是可以發揮預期程度的反應促進效果的量(有效量)即可，沒有特殊限制。一般地，從經濟方面考慮，相對抗壞血酸類，通常為20倍摩爾量或以下，優選10倍摩爾量或以下，更優選5倍摩爾量或以下，特別是2倍摩爾量或以下。對下限沒有特別限制，通常為0.01倍摩爾量或以上，優選0.05倍摩爾量或以上，更優選0.1倍摩爾量或以上，特別是0.2倍摩爾量或以上。
本發明記載的還原反應優選在強制流動下實施。作為單位體積攪拌所需的動力，優選通常為約0.01kW/m3或以上，優選約0.1kW/m3或以上，更優選約0.3kW/m3或以上的流動。上述的強制流動通常通過攪拌翼的旋轉而給與，但為了獲得上述流動不一定必須用攪拌翼，也可以利用例如通過液體循環的方法等。
還原溫度通常為30℃或以上，優選40℃或以上，更優選50℃或以上。上限為體系的沸點。通常可以在30～150℃左右，優選40～120℃左右，更優選50～100℃左右實施。
對反應濃度沒有特殊限制，一般地，對于100重量份的溶劑，氧化型輔酶Q10的重量通常為約1重量份或以上，優選3重量份或以上，更優選10重量份或以上，特別是15重量份或以上。對上限沒有特別限制，通常為約60重量份，優選約50重量份，更優選約40重量份，特別是30重量份。一般地，可以在約2～30重量份，優選約5～30重量份，更優選約10～30重量份實施。
還原反應時間隨還原劑種類和/或數量而不同，因此不能絕對限定。但是通常，反應在48小時內完成，優選24小時內，更優選10小時內，還更優選5小時內。
在上述方法中，進行還原反應后，繼續由上述反應液進行上述結晶。此時，在結晶過程中，體系中可以存在上述結晶方法中記載的有效量的枸櫞酸類和/或抗壞血酸類，這些可以是還原反應時添加的抗壞血酸類(和枸櫞酸類)。優選還原反應時添加的抗壞血酸類殘留并在結晶時共存。上述還原型輔酶Q10制備方法中，結晶方法的優選方案也是上述結晶方法中記載的方案。
可以用于上述制備方法的溶劑包括上述烴類、脂肪酸酯類、醚類、醇類、脂肪酸類、酮類、氮化合物類(包括腈、酰胺類)、硫化合物類和水等，最適合使用的溶劑是如上所述的一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑。特別優選的溶劑為甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、丙酮、甲乙酮、水或它們的混合物，特別是乙醇、丙酮、水或它們的混合物。
一元或二元醇或酮中，優選使用一元或二元醇或水溶性酮(具體為甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、丙酮、甲乙酮等，優選乙醇、丙酮等)時，可以得到漿液性狀或結晶好的還原型輔酶Q10結晶。
進一步地，從適當降低還原型輔酶Q10的溶解性從而獲得高收率、改善漿狀物性狀、特別值得注意的是大幅改善固液分離性(過濾性)這些方面考慮，優選在一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑中存在少量的水。一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑與水的比例因溶劑的種類而異，因此不能統一規定。只要是實質上以一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑為主成分的溶劑，則沒有特殊限制，但對于100重量份的總溶劑，上述一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑的比例下限通常為約90重量份，優選約91重量份，更優選約92重量份，特別優選約93重量份，上限為約99.5重量份，優選約99重量份，更優選約98重量份，特別優選約97重量份。通常在約93～97重量份最適合實施。
溶劑中的還原型輔酶Q10的氧化防護效果有在還原型輔酶Q10的高濃度溶液中則更高的傾向，因此沒有特別限制，但對于100重量份的溶劑，作為還原型輔酶Q10，通常使之在1重量份或1重量份以上，優選2重量份或2重量份以上的濃度結晶則更有效。
通過本發明的制備方法可以簡便并且穩定地獲得高質量，即還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比為98/2或以上，優選99/1或以上的還原型輔酶Q10結晶。
上述制備方法作為由含有氧化型輔酶Q10的還原型輔酶Q10進一步提高還原型輔酶Q10的重量比的精制方法極為有效。
下面說明本發明的組合物。本發明組合物之一是含有還原型輔酶Q10和枸櫞酸類的含還原型輔酶Q10的組合物。本發明的組合物中，可以使用上述的烴類、脂肪酸酯類、醚類、醇類、脂肪酸類、酮類、氮化合物類(包括腈、酰胺類)、硫化合物類和水等作為溶劑，但特別優選上述一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑(優選水溶性有機溶劑)。
本發明的另一組合物是下述含還原型輔酶Q10的組合物，其含有還原型輔酶Q10、抗壞血酸類和一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑，并且一元或二元醇和/或醇以外的水溶性有機溶劑為全部組合物的5重量％或以上上述本發明的組合物中，可以并用抗壞血酸類和枸櫞酸類。
本發明所用的枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的用量，例如只要是能夠產生預期的合適效果和能力的量(即有效量)即可。具體地，只要是可以防止還原型輔酶Q10氧化成氧化型輔酶Q10的有效量即可。一般地，盡管根據枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的種類有所不同，對其用量沒有特別限制，通常相對100重量份的還原型輔酶Q10，其用量為0.1重量份或以上，優選1重量份或以上，更優選10重量份或以上。相對100重量份的溶劑，其用量通常為0.01重量份或以上，優選0.1重量份或以上。其上限沒有特別限制，但從經濟方面考慮，通常為10重量份或以下，優選5重量份或以下，更優選1重量份或以下即可。
本發明組合物中可以使用的溶劑包括上述的烴類、脂肪酸酯類、醚類、醇類、脂肪酸類、酮類、氮化合物類(包括腈、酰胺類)、硫化合物類和水等，但如上所述，最適合使用的溶劑是一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑。
本發明的組合物可以根據其目的或用途選擇、使用適當的溶劑。例如，從分離還原型輔酶Q10或用于將所得反應混合物進一步誘導化(次反應)的觀點考慮，特別優選使用沸點為150℃或以下、優選100℃或以下的溶劑。用于食用、醫藥用途時，優選乙醇、1，2-丙二醇、聚乙二醇(優選分子量為300～1000的聚乙二醇)等。
上述一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑(優選水溶性有機溶劑)的用量一般為全部組合物的例如5重量％或以上，優選10重量％或以上，更優選20重量％或以上、特別優選30重量％或以上、特別是40重量％或以上，尤其是50重量％或以上，特別優選超過50重量％。特別是在抗壞血酸類的情況下，優選上述溶劑的用量為60重量％或以上，更優選70重量％以上，進一步優選80重量％或以上。本發明的組合物用于食用、醫藥用途時，優選用于食用、醫藥用途的口服時，在全部組合物中，上述溶劑的用量下限通常為5重量％，優選10重量％，更優選20重量％，特別優選30重量％，特別是40重量％，尤其是50重量％，上限通常為99重量％，優選95重量％，更優選90重量％，特別優選85重量％，特別是80重量％，尤其是70重量％。
還原型輔酶Q10可以以通過本發明方法所得的上述反應混合物的形式供給，另外，也可以外部添加。外部添加時，可以使用例如從上述反應混合物分離的物質或通過其它途徑合成分離的物質。
使用反應混合物時，有簡便的優點，但不一定適應于身體，還原反應時產生的副產物有可能同時存在于組合物中，從這一觀點考慮，與使用上述反應混合物相比，作為還原型輔酶Q10，更優選使用外部添加的物質。
當然，在本發明的組合物中，不妨使還原型輔酶Q10以外的其它活性物質共存。其它的活性物質包括例如氨基酸、維生素、礦物質、多元酚、有機酸、糖類、肽和蛋白質等。
本發明的組合物可以直接使用，也可以將其進一步加工成膠囊劑(硬膠囊、軟膠囊)、片劑、糖漿、飲料等口服給藥形式后使用。還可以加工成軟膏、栓劑和牙膏等形式后使用，特別優選膠囊劑，尤其是軟膠囊。對膠囊基質沒有特殊限制，可以是以來源于牛骨、牛皮、豬皮、魚皮等的明膠為首的基質，也可以使用其它基質(例如可以用作食品添加物的包括增粘穩定劑(例如角叉菜膠、藻酸鈉等來自海藻的物質或刺槐豆膠或愈瘡膠等來自植物種子的物質等)或纖維素類的制造用劑)。
通過在脫氧氣氛中實施本發明還原型輔酶Q10的穩定方法、保存方法、結晶方法及制備方法，由此可以提高氧化防止效果。另外，本發明的組合物優選在在脫氧氣氛中制備或保管。脫氧氣氛可以通過用惰性氣體置換、減壓、沸騰或將這些方法組合而實現。至少優選使用用惰性氣體置換，即惰性氣體氣氛。所述惰性氣體包括例如氮氣、氦氣、氬氣、氫氣和二氧化碳等，優選氮氣。
在上述穩定方法或上述組合物中，在規定期間的保存后，還原型輔酶Q10/(還原型輔酶Q10+氧化型輔酶Q10)的重量比有望保持在90重量％或以上，優選保持在95重量％或以上。所述保存期間為例如1天以上，優選一周以上，更優選一個月以上，特別是半年以上，尤其是一年以上，特別是2年以上。
本發明的方法中使用安全并且易于處理的試劑，或者，可以根據其目的或用途適當選擇所用的溶劑，適應于還原型輔酶Q10的分離或進一步衍生，以食用或藥用等的組合物或口服給藥形式利用，可以廣泛利用，其有許多有利點。
發明的最佳實施方案下面通過實施例進一步詳細說明本發明，但本發明不限于這些實施例。
實施例中還原型輔酶Q10的純度、還原型輔酶Q10與氧化型輔酶Q10的重量比通過下述HPLC求出，但所得的還原型輔酶Q10的純度值并非規定本發明的純度界限值，同樣，還原型輔酶Q10與氧化型輔酶Q10的重量比中還原型輔酶Q10的比例也是對其上限值的限制。
(HPLC分析條件)柱SYMMETRY C18(Waters)，長250mm，內徑4.6mm，流動相C2H5OH∶CH3OH＝4∶3(v∶v)，檢測波長210nm，流速1ml/min，還原型輔酶Q10的保留時間9.1min，氧化型輔酶Q10的保留時間13.3min。
實施例1往1000g乙醇中加入100g氧化型輔酶Q10(含氧化型輔酶Q90.40％，純度99.4％)、60g L-抗壞血酸，在78℃攪拌進行還原反應。30小時后，冷卻至50℃，保持該溫度，同時加入400g乙醇。攪拌該乙醇溶液(含有100g還原型輔酶Q10(含還原型輔酶Q90.40％)(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時以10℃/小時的冷卻速度冷卻至2℃，得到白色漿狀物。將該漿狀物減壓過濾，所得的濕結晶依次用冷乙醇、冷水、冷乙醇洗滌(洗滌所用的冷溶劑溫度為2℃)，然后將濕結晶減壓干燥(20～40℃，1～30mmHg)，得到白色干燥結晶95g(含還原型輔酶Q90.21％，除去率48％)(有效收率95摩爾％)。除去減壓干燥外，所有的操作均在氮氣氛圍下進行。所得的結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為99.5/0.5，還原型輔酶Q10的純度為99.2％。
實施例2將100g氧化型輔酶Q10在25℃溶于1000g庚烷中，攪拌該氧化型輔酶Q10的庚烷溶液(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時往上述庚烷溶液中緩慢加入100g連二亞硫酸鈉(純度75％以上)溶于水(1000ml)的溶液作為還原劑，在25℃、pH＝4～6下進行還原反應。2小時后，從反應液中除去水相，將庚烷相用脫氣的飽和食鹽水1000g洗滌6次。上述所有操作均在氮氣氛圍下進行。該庚烷溶液在減壓下進行溶劑置換，配制相對乙醇100重量份，還原型輔酶Q10為1重量份的乙醇溶液。
將上述乙醇溶液分注，分別加入表1所示的抗壞血酸類或枸櫞酸類，相對乙醇100重量份，其添加量為0.1重量份(相對還原型輔酶Q10100重量份為10重量份)，25℃下在空氣中攪拌。24小時后，該溶液中的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比如表1所示。另外，為了進行比較，把不添加時的結果也一并表示出來。
表1

R還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比參考例與實施例同法制備乙醇溶液，相對乙醇100重量份，加入表2所示的抗氧劑0.1重量份(相對還原型輔酶Q10100重量份為10重量份)，25℃下在空氣中攪拌。24小時后，該溶液中的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比如表1所示。
表2


R還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比實施例3用實施例1中所得的還原型輔酶Q10配制乙醇溶液，相對100重量份乙醇，還原型輔酶Q10為5重量份。往該乙醇溶液中加入L-抗壞血酸，相對溶劑100重量份，其添加量為1重量份(相對還原型輔酶Q10100重量份為10重量份)，50℃下在空氣中攪拌。50小時后，該溶液中的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比以及L-抗壞血酸的殘留比例如表3所示。另外，為了進行比較，把還原型輔酶Q10和L-抗壞血酸各自單獨的結果也表示出來。這些結果表明，L-抗壞血酸的存在導致的還原型輔酶Q10的穩定效果不是空氣氧化生成的氧化型輔酶Q10基于L-抗壞血酸導致的還原作用而穩定化。
表3

R還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比X抗壞血酸的殘留率實施例4相對100重量份乙醇，加入實施例1中所得的還原型輔酶Q10結晶1重量份和表4所示的抗壞血酸類1重量份，45℃下在空氣中攪拌。24小時后，該溶液中的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比如表4所示。另外，為了進行比較，把不添加時的結果也一并表示出來。
表4

R還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比比較例1相對100重量份甘油，加入實施例1中所得的還原型輔酶Q10結晶1重量份和表5所示的抗壞血酸類1重量份，45℃下在空氣中攪拌。24小時后，該溶液中的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比如表5所示。另外，為了進行比較，把不添加時的結果也一并表示出來。
表5

R還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比實施例5往1000g乙醇中加入100g氧化型輔酶Q10(含氧化型輔酶Q90.40％，純度99.4％)、60g L-抗壞血酸，在78℃攪拌進行還原反應。30小時后，冷卻至50℃，保持該溫度，同時加入330g乙醇和水70g。攪拌該乙醇溶液(含有100g還原型輔酶Q10(含還原型輔酶Q90.40％)(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時以10℃/小時的冷卻速度冷卻至2℃，得到白色漿狀物。與實施例1相比，該漿狀物顯示出良好的流動性，可以容易地從結晶容器中去除。將該漿狀物減壓過濾，所得的濕結晶依次用冷乙醇、冷水、冷乙醇洗滌(洗滌所用的冷溶劑溫度為2℃)，然后將濕結晶減壓干燥(20～40℃，1～30mmHg)，得到白色干燥結晶97g(含還原型輔酶Q90.24％，除去率41％)(有效收率97摩爾％)。除去減壓干燥外，所有的操作均在氮氣氛圍下進行。所得結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為99.5/0.5，還原型輔酶Q10的純度為99.2％。
實施例6往1000g乙醇中加入100g氧化型輔酶Q10(純度99.4％)、60g L-抗壞血酸和30g碳酸氫鈉，在78℃攪拌進行還原反應。30小時后，冷卻至50℃，保持該溫度，同時加入330g乙醇和水70g。攪拌該乙醇溶液(含有100g還原型輔酶Q10(含還原型輔酶Q90.40％)(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時以10℃/小時的冷卻速度冷卻至2℃，得到白色漿狀物。與實施例1相比，該漿狀物顯示出良好的流動性，可以容易地從結晶容器中去除。將該漿狀物減壓過濾，所得的濕結晶依次用冷乙醇、冷水、冷乙醇洗滌(洗滌所用的冷溶劑溫度為2℃)，然后將濕結晶減壓干燥(20～40℃，1～30mmHg)，得到白色干燥結晶97g(有效收率97摩爾％)。除去減壓干燥外，所有的操作均在氮氣氛圍下進行。所得結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為99.5/0.5，還原型輔酶Q10的純度為99.2％。
實施例7往1000g丙酮中加入100g氧化型輔酶Q10(含氧化型輔酶Q90.40％，純度99.4％)、60g L-抗壞血酸和30g碳酸氫鈉，在50℃攪拌進行還原反應。45小時后，保持該溫度，同時加入400g丙酮。攪拌該丙酮溶液(含有100g還原型輔酶Q10(含還原型輔酶Q90.40％)(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時以10℃/小時的冷卻速度冷卻至2℃，得到白色漿狀物。將該漿狀物減壓過濾，所得的濕結晶依次用冷乙醇、冷水、冷乙醇洗滌(洗滌所用的冷溶劑溫度為2℃)，然后將濕結晶減壓干燥(20～40℃，1～30mmHg)，得到白色干燥結晶93g(含還原型輔酶Q90.23％，除去率42％)(有效收率93摩爾％)。除去減壓干燥外，所有的操作均在氮氣氛圍下進行。所得結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為99.6/0.4，還原型輔酶Q10的純度為99.3％。
實施例8除所用的氧化型輔酶Q10純度為98.4％(含氧化型輔酶Q91.0％，氧化型輔酶Q80.30％和氧化型輔酶Q70.04％)以外，其它條件與實施例5完全相同進行還原反應，添加乙醇、水，制備50℃的還原型輔酶Q10的含水乙醇溶液(含氧化型輔酶Q91.0％，氧化型輔酶Q80.30％和氧化型輔酶Q70.04％)。攪拌該含水乙醇溶液(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時以3℃/小時的冷卻速度冷卻至2℃，析出結晶。與實施例1相比，該漿狀物顯示出良好的流動性，可以容易地從結晶容器中去除。以上所有的操作均在氮氣氛圍下進行。將該漿狀物減壓過濾，所得的濕結晶依次用冷乙醇、冷水、冷乙醇洗滌(洗滌所用的冷溶劑溫度為2℃)，然后將濕結晶減壓干燥(20～40℃，1～30mmHg)，得到白色干燥結晶95g(含還原型輔酶Q90.52％，除去率48％，未檢出還原型輔酶Q8和還原型輔酶Q7)(收率97摩爾％)。所得結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為99.5/0.5，還原型輔酶Q10的純度為98.9％。
實施例9將100g氧化型輔酶Q10(純度99.4％)在25℃溶于1000g庚烷中，攪拌該氧化型輔酶Q10的庚烷溶液(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時往上述庚烷溶液中緩慢加入100g連二亞硫酸鈉(純度75％以上)的水(1000ml)溶液作為還原劑，在25℃、pH＝4～6下進行還原反應。2小時后，從反應液中除去水相，將庚烷相用脫氣的飽和食鹽水1000g洗滌6次。上述所有操作均在氮氣氛圍下進行。該庚烷溶液在減壓下進行溶劑置換，得到相對乙醇100重量份，還原型輔酶Q10為7重量份的50℃的乙醇溶液。往該乙醇溶液中加入枸櫞酸異丙酯10g(相對乙醇100重量份為0.7重量份，對還原型輔酶Q10為10重量份)，在空氣中攪拌(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時冷卻至2℃，得到白色漿狀物。將該漿狀物減壓過濾，所得的濕結晶依次用冷乙醇、冷水、冷乙醇洗滌(洗滌所用的冷溶劑溫度為2℃)，然后將濕結晶減壓干燥(20～40℃，1～30mmHg)，得到白色干燥結晶95g(收率95摩爾％)。所得結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為99.4/0.6，還原型輔酶Q10的純度為99.1％。
實施例10與實施例9同法獲得還原型輔酶Q10(純度99.4％)的庚烷溶液。將該庚烷溶液在減壓下進行溶劑置換，得到相對乙醇100重量份還原型輔酶Q10為7重量份的50℃的乙醇溶液。往該乙醇溶液中添加硬脂酸L-抗壞血酸酯(L-ascorbyl stearate)10g(相對乙醇100重量份為0.7重量份，對還原型輔酶Q10為10重量份)，在空氣中攪拌(攪拌所需動力為0.3kW/m3)，同時冷卻至2℃，得到白色漿狀物。將該漿狀物減壓過濾，所得的濕結晶依次用冷乙醇、冷水、冷乙醇洗滌(洗滌所用的冷溶劑溫度為2℃)，然后將濕結晶減壓干燥(20～40℃，1～30mmHg)，得到白色干燥結晶95g(收率95摩爾％)。所得結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為99.4/0.6，還原型輔酶Q10的純度為99.1％。
實施例11除在結晶時添加硬脂酸L-抗壞血酸酯1g(相對乙醇100重量份為0.07重量份，對還原型輔酶Q10為1重量份)外，其它與實施例10同法操作，得到白色干燥結晶95g(收率95摩爾％)。所得結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為98.5/1.5，還原型輔酶Q10的純度為98.2％。
比較例2除在結晶時不添加硬脂酸L-抗壞血酸酯外，其它與實施例10同法操作，得到白色干燥結晶95g(收率95摩爾％)。所得結晶的還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10重量比為96.4/3.6，還原型輔酶Q10的純度為96.1％。
實施例12將實施例9中所得的還原型輔酶Q10結晶2g與表6所示的抗壞血酸類或枸櫞酸類0.2g一起用乳缽研磨、混合。25℃下在空氣中放置4天后，還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比如表2所示。另外，為了進行比較，把不添加時的結果也一并表示出來。
表6

R還原型輔酶Q10/氧化型輔酶Q10的重量比實施例13將聚乙二醇加熱至50℃，將實施例1中所得的還原型輔酶Q10的結晶和L-抗壞血酸在相同溫度下添加到聚乙二醇中，通過常規方法用下述成分制得明膠軟膠囊制劑還原型輔酶Q1060重量份L-抗壞血酸 100重量份聚乙二醇1000重量份實施例14將聚乙二醇加熱至50℃，將實施例1中所得的還原型輔酶Q10的結晶和L-抗壞血酸以及乙醇在相同溫度下添加到聚乙二醇中，通過常規方法用下述成分制得角叉菜膠的軟膠囊制劑還原型輔酶Q1030重量份L-抗壞血酸 1重量份聚乙二醇 950重量份乙醇 50重量份實施例15將聚乙二醇加熱至50℃，將實施例1中所得的還原型輔酶Q10的結晶和枸櫞酸在相同溫度下添加到聚乙二醇中，通過常規方法用下述成分制得明膠軟膠囊制劑還原型輔酶Q1060重量份枸櫞酸 10重量份聚乙二醇 1000重量份產業適用性本發明的組成如上所述，能夠提供還原型輔酶Q10的簡便并且合適的穩定方法、利用該穩定方法的保存方法、分離(結晶)方法以及組合物。進一步地，本發明還提供利用上述穩定方法、具有廣泛應用性的還原型輔酶Q10的制備方法。可以使還原型輔酶Q10穩定化，進而可以穩定保存。另外，該方法適于工業規模的生產，能簡便并且高效地得到高質量的還原型輔酶Q10。
權利要求
1.還原型輔酶Q10的穩定方法，其特征在于使還原型輔酶Q10與枸櫞酸類共存。
2.權利要求1所述的穩定方法，其中枸櫞酸類選自枸櫞酸、其酯和其鹽中的至少一種。
3.權利要求1或2所述的穩定方法，其特征在于，相對100重量份還原型輔酶Q10，存在0.1重量份或0.1重量份以上的枸櫞酸類。
4.權利要求1～3中任意一項所述的穩定方法，其中枸櫞酸類以固相形式存在于包含還原型輔酶Q10的液相中。
5.權利要求1～3中任意一項所述的穩定方法，其中還原型輔酶Q10以固相形式存在于包含枸櫞酸類的液相中。
6.權利要求1～3中任意一項所述的穩定方法，其中還原型輔酶Q10與枸櫞酸類同時為液相，或共同存在于液相中。
7.權利要求4～6中任意一項所述的穩定方法，其中液相為均一相。
8.權利要求4～7中任意一項所述的穩定方法，其特征在于液相中的溶劑是選自烴類、脂肪酸酯類、醚類、醇類、脂肪酸類、酮類、氮化合物類、硫化合物類和水中的至少一種。
9.權利要求4～7中任意一項所述的穩定方法，其特征在于液相中的溶劑是一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性溶劑。
10.權利要求4～7中任意一項所述的穩定方法，其特征在于液相中的溶劑是乙醇、1，2-丙二醇、聚乙二醇。
11.權利要求1～10中任意一項所述的穩定方法，除枸櫞酸類外，還存在抗壞血酸類。
12.還原型輔酶Q10的保存方法，將通過權利要求1～11中任意一項所述的方法穩定化的還原型輔酶Q10在50℃或50℃以下保存。
13.權利要求12所述的方法，其中還原型輔酶Q10的保存在脫氧的氣氛中進行。
14.還原型輔酶Q10的穩定方法，其特征在于，該方法是通過使還原型輔酶Q10和抗壞血酸類共存而使還原型輔酶Q10穩定化的方法，所述共存在一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑的存在下進行，一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑的占全部混合物的5重量％或5重量％以上。
15.權利要求14所述的方法，其中抗壞血酸類是選自抗壞血酸、鼠李糖型抗壞血酸、阿拉伯糖型抗壞血酸、葡糖型抗壞血酸、巖藻糖型抗壞血酸、葡庚糖型抗壞血酸、木糖型抗壞血酸、半乳糖型抗壞血酸、古洛糖型抗壞血酸、阿洛糖型抗壞血酸、赤糖型抗壞血酸、6-脫氧抗壞血酸以及它們的酯和鹽中的至少一種。
16.權利要求14或15所述的穩定方法，其特征在于，相對100重量份還原型輔酶Q10，存在0.1重量份或0.1重量份以上的抗壞血酸類。
17.權利要求14～16中任意一項所述的穩定方法，其中抗壞血酸類以固相形式存在于包含還原型輔酶Q10的液相中。
18.權利要求14～16中任意一項所述的穩定方法，其中還原型輔酶Q10以固相形式存在于包含抗壞血酸類的液相中。
19.權利要求14～16中任意一項所述的穩定方法，其中還原型輔酶Q10與抗壞血酸類同時為液相，或共同存在于液相中。
20.權利要求17～19中任意一項所述的穩定方法，其中液相為均一相。
21.權利要求17～20中任意一項所述的穩定方法，其特征在于液相中的溶劑是選自乙醇、1，2-丙二醇和聚乙二醇中的至少一種。
22.權利要求14～21中任意一項所述的穩定方法，除抗壞血酸類外，還存在枸櫞酸類。
23.還原型輔酶Q10的保存方法，將通過權利要求14～22中任意一項所述的方法穩定化的還原型輔酶Q10在50℃或50℃以下保存。
24.權利要求23所述的保存方法，其中還原型輔酶Q10的保存在脫氧的氣氛中進行。
25.還原型輔酶Q10的結晶方法，其特征在于，使還原型輔酶Q10在含有枸櫞酸類和/或抗壞血酸的溶劑中結晶。
26.權利要求25所述的結晶方法，其中枸櫞酸類是選自枸櫞酸、其酯或其鹽中的至少一種。
27.權利要求25或26所述的結晶方法，其特征在于，相對100重量份的溶劑，存在0.01重量份或0.01重量份以上的枸櫞酸類。
28.權利要求25所述的結晶方法，其中抗壞血酸類是選自抗壞血酸、鼠李糖型抗壞血酸、阿拉伯糖型抗壞血酸、葡糖型抗壞血酸、巖藻糖型抗壞血酸、葡庚糖型抗壞血酸、木糖型抗壞血酸、半乳糖型抗壞血酸、古洛糖型抗壞血酸、阿洛糖型抗壞血酸、赤糖型抗壞血酸、6-脫氧抗壞血酸以及它們的酯和鹽中的至少一種。
29.權利要求25或28所述的結晶方法，其特征在于，相對100重量份溶劑，存在0.01重量份或0.01重量份以上的抗壞血酸類。
30.權利要求25～29中任意一項所述的結晶方法，其中溶劑是選自烴類、脂肪酸酯類、醚類、醇類、脂肪酸類、酮類、氮化合物類、硫化合物類和水中的至少一種。
31.權利要求30所述的結晶方法，其中溶劑是一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性溶劑。
32.權利要求31所述的結晶方法，其特征在于，一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性溶劑以一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性有機溶劑和水的混合溶劑的形式使用，一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性有機溶劑的比例為90～99.5％。
33.權利要求31或32所述的方法，其中一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性有機溶劑為乙醇、丙酮或它們的混合物。
34.權利要求30所述的結晶方法，其中溶劑是選自烴類、脂肪酸酯類、醚類和腈中的至少一種。
35.權利要求25～34中任意一項所述的結晶方法，結晶中單獨或組合實施冷卻、濃縮、溶劑置換或弱溶劑的使用。
36.權利要求35所述的結晶方法，其中結晶溫度為25℃或25℃以下。
37.權利要求35或36所述的結晶方法，其中結晶單獨使用或并用冷卻晶析。
38.權利要求38所述的結晶方法，其中冷卻速度為40℃/小時或以下。
39.權利要求25～38中任意一項所述的結晶方法，在相對100重量份的溶劑含有1重量份或1重量份以上的還原型輔酶Q10的濃度下使還原型輔酶Q10結晶。
40.權利要求39所述的結晶方法，在相對100重量份的溶劑含有5～10重量份的還原型輔酶Q10的濃度下使還原型輔酶Q10結晶。
41.權利要求25～40中任意一項所述的結晶方法，結晶在單位體積的攪拌所需動力為0.01kW/m3或以上的強制流動下進行。
42.權利要求25～41中任意一項所述的結晶方法，結晶時添加晶種。
43.權利要求25～42中任意一項所述的結晶方法，結晶在脫氧的氣氛中進行。
44.權利要求25～43中任意一項所述的結晶方法，其中從母液中除去雜質。
45.權利要求44所述的結晶方法，其中除去的雜質是選自還原型輔酶Q9、還原型輔酶Q8和還原型輔酶Q7中的至少一種。
46.還原型輔酶Q10結晶的制備方法，其特征在于，用抗壞血酸類將氧化型輔酶Q10還原成還原型輔酶Q10后，生成的還原型輔酶Q10在枸櫞酸類和/或抗壞血酸類的存在下繼續結晶。
47.權利要求46所述的制備方法，其中抗壞血酸類是選自抗壞血酸、鼠李糖型抗壞血酸、阿拉伯糖型抗壞血酸、葡糖型抗壞血酸、巖藻糖型抗壞血酸、葡庚糖型抗壞血酸、木糖型抗壞血酸、半乳糖型抗壞血酸、古洛糖型抗壞血酸、阿洛糖型抗壞血酸、赤糖型抗壞血酸、6-脫氧抗壞血酸以及它們的酯和鹽中的至少一種。
48.權利要求46或47所述的制備方法，還原反應中所用的抗壞血酸類的用量為可以將氧化型輔酶Q10變成還原型輔酶Q10的有效量。
49.權利要求48所述的制備方法，其中有效量是相對氧化型輔酶Q10為1倍摩爾量或以上。
50.權利要求46～49中任意一項所述的制備方法，其中在堿性物質或亞硫酸氫鹽的存在下進行還原。
51.權利要求46～50中任意一項所述的制備方法，其特征在于，結晶時，相對100重量份溶劑，存在0.01重量份或0.01重量份以上的枸櫞酸類和/或抗壞血酸類。
52.權利要求46～51中任意一項所述的制備方法，其中所用溶劑是選自烴類、脂肪酸酯類、醚類、醇類、脂肪酸類、酮類、氮化合物類、硫化合物類和水中的至少一種。
53.權利要求52所述的制備方法，其中所用溶劑是一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性溶劑。
54.權利要求53所述的制備方法，其特征在于，結晶在一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性有機溶劑與水的混合溶劑中進行，一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性有機溶劑的含量為90～99.5％。
55.權利要求53或54所述的制備方法，其中一元或二元醇類和/或醇類以外的水溶性有機溶劑為乙醇、丙酮、水或它們的混合物。
56.權利要求5 5所述的制備方法，結晶溫度為25℃或25℃以下。
57.權利要求46～56中任意一項所述的制備方法，其中在30℃或30℃以上進行還原反應后，在25℃或25℃以下進行結晶。
58.權利要求46～57中任意一項所述的制備方法，其中結晶時單獨使用或者并用冷卻晶析。
59.權利要求58所述的制備方法，冷卻晶析過程中的冷卻速度為40℃/小時或以下。
60.權利要求46～59中任意一項所述的制備方法，其在脫氧的氣氛中進行。
61.權利要求46～60中任意一項所述的制備方法，其中從母液中除去雜質。
62.權利要求61所述的結晶方法，其中除去的雜質是選自還原型輔酶Q9、還原型輔酶Q8和還原型輔酶Q7中的至少一種。
63.含有還原型輔酶Q10的組合物，其特征在于，含有還原型輔酶Q10和枸櫞酸類。
64.權利要求63所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其中枸櫞酸類是選自枸櫞酸、其酯或其鹽中的至少一種。
65.權利要求63或64所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其中相對還原型輔酶Q10100重量份，含有枸櫞酸類0.1重量份或0.1重量份以上。
66.權利要求63～65中任意一項所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其進一步含有選自乙醇、1，2-丙二醇和聚乙二醇的中至少一種作為溶劑。
67.權利要求63～66中任意一項所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，除了枸櫞酸類以外，其還含有抗壞血酸類。
68.權利要求63～67中任意一項所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其中還原型輔酶Q10為外部添加物。
69.權利要求63～68中任意一項所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其中除了還原型輔酶Q10外，還含有其它活性物質。
70.權利要求63～69中任意一項所述的組合物，其被加工成口服給藥的形式。
71.權利要求70所述的組合物，其中所述形式為膠囊劑。
72.權利要求71所述的組合物，其中膠囊劑為軟膠囊。
73.權利要求63～72中任意一項所述的組合物，在脫氧的氛圍下制備或保存。
74.含有還原型輔酶Q10的組合物，其特征在于，含有還原型輔酶Q10、抗壞血酸類和一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑，并且一元或二元醇和/或醇以外的水溶性溶劑為全部組合物的5重量％或以上。
75.權利要求74所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其中抗壞血酸類是選自抗壞血酸、鼠李糖型抗壞血酸、阿拉伯糖型抗壞血酸、葡糖型抗壞血酸、巖藻糖型抗壞血酸、葡庚糖型抗壞血酸、木糖型抗壞血酸、半乳糖型抗壞血酸、古洛糖型抗壞血酸、阿洛糖型抗壞血酸、赤糖型抗壞血酸、6-脫氧抗壞血酸以及它們的酯和鹽中的至少一種。
76.權利要求74或75所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其特征在于相對還原型輔酶Q10100重量份，含有抗壞血酸類0.1重量份或0.1重量份以上。
77.權利要求74～76中任意一項所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其進一步含有選自乙醇、1，2-丙二醇和聚乙二醇的中至少一種作為溶劑。
78.權利要求74～77中任意一項所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，除了抗壞血酸類以外，其還含有枸櫞酸類。
79.權利要求74～78中任意一項所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其中還原型輔酶Q10為外部添加物。
80.權利要求74～79中任意一項所述的含有還原型輔酶Q10的組合物，其中除了還原型輔酶Q10外，還含有其它活性物質。
81.權利要求74～80中任意一項所述的組合物，其被加工成口服給藥的形式。
82.權利要求81所述的組合物，其中所述形式為膠囊劑。
83.權利要求82所述的組合物，其中膠囊劑為軟膠囊。
84.權利要求74～83中任意一項所述的組合物，在脫氧的氛圍下制備或保存。
全文摘要
本發明提供可以用作營養功能食品、特定保健用食品等的還原型輔酶Q
文檔編號A61K31/122GK1599603SQ02824009
公開日2005年3月23日 申請日期2002年10月10日 優先權日2001年10月10日
發明者植田尚宏, 大野直生, 茂呂充俊, 北村志郎, 上田恭義 申請人:鐘淵化學工業株式會社