專利名稱：21(r)阿加曲班的應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于醫藥技術領域，特別是涉及一種直接凝血酶抑制劑21 (R)阿加曲班的應用。
背景技術：
1978年日本Mitsubishi化學公司S. Okamoto等首次報導了阿加曲班 (Argatroban) —水合物抗凝血酶活性US 4 101 653。隨后20多年期間，眾多研究者對阿加曲班的生物活性及作為醫藥的價值進行了深入研究。1981年，S. Okamoto在動物體內將該藥與肝素進行了比較Okamoto，S. et al.，Biochem. Biophys. Res. Commun. 101， 440(1981)；T. Kumoto等對其立體選擇活性進行了報導Kumada，Τ. et al.，Thromb. Res. 24,285(1981)；1984 年，R. Kumato 進行了臨床血液透析評價Kikumoto，R. et al.， Biochemistry 23,85(1984)；1986年該作者報導了阿加曲班抑制哺乳動物凝血酶活性， 可作為治療和預防血栓藥劑和血小板凝聚抑制劑。阿加曲班一水合物可作為選擇性抗血栓劑、治療慢性動脈堵塞和腦血栓等JP 61-48829]0 1992年和1993年，Taparelli 和J. A. Jakubowski先后報導了阿加曲班抗凝血酶的可逆性Taparel 1 i，C.，Trends Pharmacol. Sci.，1993，14，366，Jakubowski, J. A. et al, Rep. Med. Chem.，1992，27，99；90 年代L. R. Buch等多位研究者報導了相關研究Buch，L. R.，Cadiosvasc. Drug Rev.，1991， 9,247, Strupcnewski, J.D. et al. , Academic :San Diego,1991；Vol. 26, p299, Brundish, D. et al. ， J.Med. Chem. 1999 ；42,4584, Shebuski, R.J. ， Academic :San Diego,1999 ； Vol. 26，p98。1992年日本批準作為非腸道使用凝血酶抑制劑Hijikata-Okunomiya，Α.， et al, Thromb. Hemostasis,1992,18,135。阿加曲班是L-精氨酸的衍生物，其只與凝血酶活性位點相互作用，是凝血酶的競爭性抑制劑。它直接滅活凝血酶(因子IIa)的活性；對凝血酶的產生沒有直接作用，其作用不依賴于體內的抗凝血酶；不僅滅活血液中游離狀態的凝血酶，還能夠滅活與纖維蛋白血栓結合了的凝血酶；阻斷凝血瀑布的正反饋；極低濃度時即可抑制由凝血酶誘導的血小板凝聚反應，間接抑制凝血酶的產生。阿加曲班分子量小，它能進入到血栓內部，直接滅活已經與纖維蛋白血栓結合的凝血酶，對那些陳舊的血栓仍能發揮抗栓作用。此外，阿加曲班能大大降低血漿中TAT (凝血酶-抗凝血酶復合物)的水平，有效改善患者的高凝狀態，在慢性血栓栓塞性疾病中有非常好的臨床效果。但是，目前臨床上多使用21 (R)阿加曲班和21⑶阿加曲班的混合物，一般來說， 藥物混合物要比單一成分的藥物生物活性低，治療效果差、用量高，而且近年來，世界各國對藥物的成分要求越來越嚴格，除了嚴格限定雜質含量和單一雜質含量之外，對各種異構體分離鑒定及其含量也進行了嚴格規定，因此單獨研究21 (R)阿加曲班的生物活性具有重要的意義
發明內容
本發明的目的在于提供一種21(R)阿加曲班在治療和預防血栓以及血小板凝聚抑制藥物，即凝血酶抑制劑中的應用。所述的藥物為一種新的凝血酶抑制劑，含有單一成分的非對映異構體21 (R)阿加曲班和藥學上可接受的輔料。21 (R)阿加曲班的化學式為2R，4R)-l-K2S)-5-[(氨基亞氨基甲基)氨基]-1-氧代-2-{[(3ΙΟ-(1，2，3，4-四氫-3-甲基-8-喹啉基)磺酰]氨基} 戊基}-4_甲基-2-哌啶甲酸。所述的藥物可按照通常的方法制成液體制劑。所述的藥物中有效活性成分的濃度為醫學上可接受的21 (R)阿加曲班的量。本發明提供的單一成分的21 (R)阿加曲班對延長正常犬全血凝固時間(CT)作用顯著，其作用效果是空白對照組的7倍；21 (R)阿加曲班對延長正常犬復鈣時間(RT)作用顯著，其作用效果是空白對照組的2倍；21 (R)阿加曲班對延長正常犬凝血酶原時間(PT) 作用顯著，其作用效果是空白對照組的15倍；21 (R)阿加曲班對延長正常犬白陶土部分凝血活酶時間(APTT)，延長正常犬凝血酶時間(TT)有一定作用，其作用效果比空白對照組略強；21 (R)阿加曲班對正常犬血小板粘附率和血小板聚集率有降低作用。
具體實施例方式為了驗證本發明提供的21(R)阿加曲班藥物的藥效，本申請人先按照下述方法將其配制成21 (R)阿加曲班靜脈注射液(以下簡稱R體)，以供其后的藥效分析實驗用。21 (R)阿加曲班靜脈注射液
21 (R)阿加曲班
鹽酸，USP
NaCl, USP滲透調節劑鹽酸或NaOH 注射用水，USP制備方法將混合、過濾和填充用的設備及玻璃器皿徹底洗滌并除熱原，將過濾器組件、填充管組件和其他部件及設備滅菌。將上述所示用量的21 (R)阿加曲班加入到20ml的安瓿瓶中，加注射用水至最終體積的80%，加入所示重量的鹽酸作為增溶劑，再加入所示重量的滲透調節劑，混合，接著，如果有必要，用IN的氫氧化鈉或者鹽酸調節溶液pH值至5. 5，加注射用水至20ml，混合均勻。 然后將產品裝入高壓滅菌器，在121°C的溫度下滅菌20min即可制成所述的21 (R)阿加曲班靜脈注射液。一、21 (R)阿加曲班靜脈注射液的動物實驗試驗材料1、供試品上述21 (R)阿加曲班靜脈注射液。
IOmg 0. 32mg 0. 5g
按需調節PH 加至20ml
無色澄明液體，規格20ml: 10mg，貯存遮光、室溫密閉保存。2、試劑0.9%氯化鈉注射液，規格500ml，批號D510150401，由濟南三九益民制藥有限公司生產；枸櫞酸鈉，分析純，規格500g，批號20021105，由山東博山化學試劑廠生產，用時用生理鹽水配成3. 2%的溶液；凝血酶原時間、凝血酶時間、活化部分凝血活酶時間試劑盒均由上海太陽生物技術有限公司提供；ADP 由北京東方普利生科貿有限公司提供。3、實驗動物普通家犬(Canis familiar is Linne)，12只，雌雄各半，10_15kg，由市場購入。4、主要儀器設備HEMAVET_950型全自動血球計數儀，由Drew Scientific公司生產；C2000型血凝儀，由北京東方普利生科貿有限公司生產；LBY-NJ2型血小板聚集儀，由北京東方普利生科貿有限公司生產；血小板粘附儀，由北京東方普利生科貿有限公司生產；二、試驗方法1.動物分組取健康普通家犬(Canis familiar is Lirme) 12只，隨機分為2組，分別為空白對照組和R體試驗組，每組6只動物。2.給藥劑量選擇及依據供試品臨床用法通常成人在開始的2日內是將1日6支(阿加曲班60mg)以適當量的輸液稀釋，經M小時持續靜脈滴注。在其后的5日中，將1日2支(阿加曲班20mg) 以適當量的輸液稀釋，每日早晚各1次，每次1支(阿加曲班IOmg)，1次靜脈滴注3小時。參考阿加曲班注射液臨床用量，以成人每天15mg計，按成人70kg和12kg犬等效劑量折算系數法可得犬用藥劑量為人用量XO. 32/12，初步定為0. %ig/kg。3.藥物配制0. 4mg/kg劑量溶液取相應的供試品溶液0. 8ml+0. 9%氯化鈉注射液9. 2mL·4.試驗過程每只動物在給藥前取血測定全血凝固時間(CT)、復鈣時間(RT)、白陶土部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)、凝血酶時間(TT)、血小板粘附率、血小板聚集率等指標作為藥前值，測定完畢，每組動物按10ml/kg體積給予相應的藥物溶液，每天一次，連續3 天，第三天給藥后15分鐘取血測以上凝血相關指標。全血凝固時間的測定方法取試管3個，標號為1、2、3號。用一次性無菌注射器順利地抽取犬靜脈血:3ml，自血流入針頭開始計時，去針頭后沿管壁每管緩慢注入血液1ml， 置37°C水浴中。每隔一定時間將第一管傾斜1次，直至將試管倒置血液不流動為止；再依次觀察第二管，第二管凝固后，再觀察第三管。以第三管凝固時間為凝血時間。復鈣時間測定方法取枸櫞酸鈉抗凝血1ml，離心取血漿0. anl，加0. 025mol/L的氯化鈣溶液0. anl，混勻后置于37°C水浴，從加鈣起計時，直至凝固的時間為復鈣時間。其它測試采用儀器測定。
5.數據統計及結果判定每組動物藥前和藥后各個指標以均數士標準差(表示。將各藥物組藥后變化值與空白對照組藥后變化值進行t檢驗，以判斷藥物的效果。試驗結果見表1-7。表1 :R體對正常犬全血凝固時間(CT)的影響G ±SD，η = 6)
權利要求
1.21 (R)阿加曲班在治療和預防血栓以及血小板凝聚抑制藥物中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于所述的藥物包括單一成分的21(R)阿加曲班以及藥用輔料。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于所述藥物為液體制劑。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于所述的藥物中有效活性成分的濃度為醫學上可接受的21 (R)阿加曲班的量。
全文摘要
一種21(R)阿加曲班在治療和預防血栓以及血小板凝聚抑制藥物中的應用。藥物中包括單一成分的21(R)阿加曲班以及藥用輔料。本發明提供的單一成分的21(R)阿加曲班對延長正常犬全血凝固時間(CT)作用顯著，其作用效果是空白對照組的7倍；21(R)阿加曲班對延長正常犬復鈣時間(RT)作用顯著，其作用效果是空白對照組的2倍；21(R)阿加曲班對延長正常犬凝血酶原時間(PT)作用顯著，其作用效果是空白對照組的15倍；21(R)阿加曲班對延長正常犬白陶土部分凝血活酶時間(APTT)，延長正常犬凝血酶時間(TT)有一定作用，其作用效果比空白對照組略強；21(R)阿加曲班對正常犬血小板粘附率和血小板聚集率有降低作用。
文檔編號A61K38/05GK102258764SQ201110195540
公開日2011年11月30日 申請日期2011年7月13日 優先權日2011年7月13日
發明者孫致遠, 宋洪海, 張冉, 高巨 申請人:天津市煒杰科技有限公司