專利名稱：延長體外血淋巴細胞保存壽命的血液抗凝劑及使用方法
背景技術：
常規的人類白細胞抗原AB分型(HLA-AB)時，抽取人的靜脈血，用肝素或復方檸檬酸鈉保存液(ACD)作為抗凝劑加入靜脈血中。這樣的抗凝血液必須在4-6小時內使用，才能保證淋巴細胞的活力，如果抽血抗凝后超過10個小時，那么淋巴細胞就會部分或全部死亡，而無法得到正確的人類白細胞抗原的分型結果。
隨著人類文明程度的不斷提高，越來越多的人正在參加到自愿捐獻骨髓的隊伍中，中華(上海)骨髓庫正在加速發展。對報名參加骨髓庫的志愿者，首先安排志愿者抽靜脈血作常規的人類白細胞抗原(HLA)血型化驗，志愿者的抽血往往人數較多，一般來說，每一次可達100人以上，而抽血的時間一般安排在當天的中午或下午。由于血樣過夜會引起淋巴細胞死亡，所以若采用常規的人類白細胞抗原分型的抗凝劑，則只能當天完成人類白細胞抗原血清分型，顯然這在實際的操作中是不易實現的，否則只有加班或調整工作時間，這造成工作安排上的困難，也制約了骨髓庫的發展，隨著捐獻骨髓志愿者的增加，這樣的問題將越來越突出；另一方面，當需要將血樣運送到異地進行分型核實，如國外某地或我國的臺灣，以及作為質控品的運輸，則也迫切需要解決抗凝血延長使用的問題。

發明內容
針對常規的人類白細胞抗原AB分型用的抗凝劑不能使血樣在比較長的時間內保持淋巴細胞的活力的問題，本發明提供一種延長體外血淋巴細胞保存壽命的血液抗凝劑及使用方法。
為了解決上述問題，本發明采用如下技術方案該延長體外血淋巴細胞保存壽命的血液抗凝劑包括檸檬酸三納、檸檬酸、葡萄糖、水，其中，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.31-3.32克、含檸檬酸0.01-0.05克、含葡萄糖2.45-3.37克，其余為水。
該延長體外血淋巴細胞保存壽命的血液抗凝劑使用方法為在將血液抗凝劑與所采集的血液進行混合，在混合時，血液抗凝劑與血液的比例為每100毫升血中加入10毫升抗凝劑。
本發明的血液抗凝劑包括檸檬酸三納、檸檬酸、葡萄糖、水，其中，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.31-3.32克、含檸檬酸0.01-0.05克、含葡萄糖2.45-3.37克，其余為水，與傳統的血液抗凝劑相比，該抗凝劑增加了檸檬酸三納的含量，降低了檸檬酸的含量；在血樣采集后，與本發明的抗凝劑混合后，經試驗和實際使用證明，能使人體外血抗凝后淋巴細胞的保存壽命由原先的4-6小時延長到48-72小時，可使人類白細胞抗原血清學分型血樣隔天進行，使血樣適合于異地之間的長途運輸，而保持淋巴細胞的活力。而在使用本發明的血液抗凝劑與血液混合比例的縮小，使用起來更加方便。
具體實施例方式
傳統的復方檸檬酸鈉保存液(ACD)作為抗凝劑，該抗凝劑有兩種配方，ACD-A配方和ACD-B配方，其含量、pH值、使用時混合比例請見下表1表1

而本發明的延長體外血淋巴細胞保存壽命的血液抗凝劑，該血液抗凝劑包括檸檬酸三納、檸檬酸、葡萄糖、水，請同時結合表1，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.31-3.32克、含檸檬酸0.01-0.05克、含葡萄糖2.45-3.37克，其余為水。
血液抗凝劑的pH值在6.8-7.3之間。
對于不同pH值的淋巴細胞毒性試驗結果可請參閱下表2表2

實施例1所述的血液抗凝劑中，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.315克、含檸檬酸0.03克、含葡萄糖2.91克，其余為水。
實施例2所述的血液抗凝劑中，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.31克、含檸檬酸0.05克、含葡萄糖3.37克，其余為水。
實施例3所述的血液抗凝劑中，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.32克、含檸檬酸0.01克、含葡萄糖2.45克，其余為水。
本發明血液抗凝劑使用方法是，在血樣采集后，將血液抗凝劑與所采集的血液進行混合，在混合時，血液抗凝劑與血液的比例為1∶10，即，每100毫升血液中加入10毫升抗凝劑。
經試驗和實際使用證明，本發明的血液抗凝劑能使人體外血抗凝后淋巴細胞的保存壽命由原先的4-6小時延長到48-72小時，可使人類白細胞抗原血清學分型血樣隔天進行，使血樣適合于異地之間的長途運輸，而保持淋巴細胞的活力。而在使用本發明的血液抗凝劑與血液混合比例的縮小，使用起來更加方便。
權利要求
1.一種延長體外血淋巴細胞保存壽命的血液抗凝劑，該血液抗凝劑包括檸檬酸三納、檸檬酸、葡萄糖、水，其特征在于每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.31-3.32克、含檸檬酸0.01-0.05克、含葡萄糖2.45-3.37克，其余為水。
2.如權利要求1所述的血液抗凝劑，其特征在于所述的血液抗凝劑中，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.315克、含檸檬酸0.03克、含葡萄糖2.91克，其余為水。
3.如權利要求1所述的血液抗凝劑，其特征在于所述的血液抗凝劑中，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.31克、含檸檬酸0.05克、含葡萄糖3.37克，其余為水。
4.如權利要求1所述的血液抗凝劑，其特征在于所述的血液抗凝劑中，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.32克、含檸檬酸0.01克、含葡萄糖2.45克，其余為水。
5.如權利要求1-4任一項所述的血液抗凝劑，其特征在于所述的血液抗凝劑的pH值在6.8-7.3之間。
6.一種延長體外血淋巴細胞保存壽命的血液抗凝劑使用方法，其特征在于在將血液抗凝劑與所采集的血液進行混合，在混合時，血液抗凝劑與血液的比例為每100毫升血中加入10毫升抗凝劑。
全文摘要
本發明公開了延長體外血淋巴細胞保存壽命的血液抗凝劑及使用方法，每100毫升抗凝劑中含檸檬酸三納3.31－3.32克、含檸檬酸0.01－0.05克、含葡萄糖2.45－3.37克，其余為水，與傳統的血液抗凝劑相比，該抗凝劑增加了檸檬酸三納的含量，降低了檸檬酸的含量；經試驗和實際使用證明，能使人體外的血抗凝后，淋巴細胞的保存壽命由原先的4－6小時延長到48－72小時，可使人類白細胞抗原血清學分型血樣隔天進行和異地之間的長途運輸，保持淋巴細胞的活力。而在使用本發明的血液抗凝劑與血液混合比例的縮小，使用起來更加方便。
文檔編號A61K35/14GK1411818SQ01131938
公開日2003年4月23日 申請日期2001年10月17日 優先權日2001年10月17日
發明者張工梁, 馬俊, 楊穎 申請人:上海市血液中心