專利名稱：：用作抗癌劑的萜類衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及現(xiàn)有技術(shù)(HelveticaChimicaActaVol.70，1987，2019-2027和HelveticaChimicaActaVol.71，1988，964-976)中稱作Sarcodictyins的萜類衍生物，它能用作治療劑。以前沒有報(bào)道過本發(fā)明所提到的Sarcodictyins的治療用途。根據(jù)本發(fā)明，特別是就Sarcodictyins的細(xì)胞毒素活性來說，它能夠在人或動(dòng)物的癌癥治療中用作抗腫瘤治療劑。所以，本發(fā)明涉及一種選自于下組中的用作治療劑的化合物(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-7-羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsA)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-6-(乙氧基羰基)-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-7-羥基-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsB)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-3，7-二羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsC)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-3-乙酰氧基-7，10-環(huán)氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-7-羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsD)；(Z)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(+)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-3，7-二羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsE)；和(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(+)-(1R，4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，2Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-1，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-1，7-二羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsF)。參照下列通式，在表1中報(bào)道了上述列化合物的結(jié)構(gòu)式在上述通式中，符號(hào)*表示手性中心。表1\SarcodictyinC(A1)MeOH(E)uSarcodictyinD(A1)MeOAC(E)uSarcodictyinE(A1)MeOH(Z)uSarcodictyinF(A2)MeOH(E)u</table></tables>在上述表1中符號(hào)Me是指甲基；符號(hào)Et是指乙基；符號(hào)OAc是指OCOCH3。符號(hào)(E)u和(Z)u分別是指下列通式的(E)和(Z)咪唑丙烯酰基基團(tuán)(E)咪唑丙烯酰基(Z)咪唑丙烯酰基特別是上述所提到的SarcodictyinA到F可因其細(xì)胞毒性即抗腫瘤活性而在人或動(dòng)物的癌癥治療中作為治療劑。所說的癌癥可選自于肉瘤、癌、淋巴瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、黑素瘤、骨髓瘤、維爾姆斯瘤、白血病和腺癌中。按照HelveticaChimicaActaVol.70，1987，第2025頁(yè)中所述的方法，本發(fā)明的Sarcodictyin可從地中海Stoloniferan的珊瑚“SarcodictyonRoseum”(Rolandiarosea)(Forbes1847)中分離得到。通過(a)“體外”試驗(yàn)評(píng)價(jià)它們?cè)诖龠M(jìn)微管蛋白合成中的活性和(b)“體外”試驗(yàn)評(píng)價(jià)它們對(duì)L1210細(xì)胞和耐阿霉素的L1210細(xì)胞(L1210/Dx)的細(xì)胞毒性來證實(shí)本發(fā)明的Sarcodictyin的生物活性。例如，按照試驗(yàn)(a)和(b)中所述的方法評(píng)價(jià)SarcodictyinA(內(nèi)部編碼FCE29123)和SarcodictyinC(內(nèi)部編碼FCE29119)的活性。(a)微管蛋白的合成試驗(yàn)用合成-分散兩步循環(huán)法制備小牛的腦微管蛋白(ShelanskiM.L.，GaskinF.和CantorC.R.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.70，765-768，1973)并在液氮下存放在MAB(0.1MMES，2.5mMEGTA，0.5mMMgSO4，0.1mMEDTA，0.1mMDTT，pH6.4)中。全部試驗(yàn)都是在存放少于4周的蛋白質(zhì)上進(jìn)行的。在每次試驗(yàn)前，把微管蛋白在4℃下保存30分鐘。用Gaskin等的方法(GaskinF.，CantorC.R.和ShelanskiM.L.，J.Molec.Biol.89，737-758，1974)監(jiān)控合成。把含有微管蛋白(1mg/ml)和1mMGTP的比色杯移至37℃下并在裝有一部自動(dòng)記錄儀和恒溫調(diào)節(jié)的樣品室的Perkin-elmer557的雙波長(zhǎng)雙束分光光度計(jì)連續(xù)進(jìn)行混濁度的測(cè)定。30分鐘后，加入4mMCaCl2并測(cè)定10分鐘的解聚作用作為降低的混濁度。在15分鐘的固定間隔，加入等分劑量的試驗(yàn)化合物并監(jiān)控混濁度的變化。數(shù)據(jù)表示了試驗(yàn)化合物誘發(fā)的再聚合百分比。表2顯示了所得到的試驗(yàn)結(jié)果。表2上述表中的數(shù)據(jù)清除地表明即使有通常抑制微管蛋白合成的CaCl2的存在試驗(yàn)的Sarcodictyin也能夠促進(jìn)微管蛋白的再聚合。正如現(xiàn)有技術(shù)所熟知的，微管是在抗癌化療中最重要的亞細(xì)胞靶(Rowinsky等，Review，Vol.82，No.15，1990年8月1號(hào))。不象能夠誘發(fā)解聚微管的傳統(tǒng)抗微管劑如秋水仙堿和長(zhǎng)春花屬的生物堿，Sarcodictyin似乎具有類似于一種從天然產(chǎn)物中篩選出的最有益的抗癌劑紫杉醇的作用機(jī)理即誘發(fā)細(xì)管聚合并形成非常穩(wěn)定和無功能性的微管。所以，就Sarcodictyin能夠促進(jìn)微管快速形成和穩(wěn)定從而引起腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞分裂的暫停的能力而言，它能夠在人或動(dòng)物的癌癥治療中用作抗腫瘤治療劑。(b)細(xì)胞培養(yǎng)和藥物敏感性的試驗(yàn)在RPMI1640培養(yǎng)基(GIBCO，Grandisland，NY)中L1210和L1210/DX(抗阿霉素)鼠白血病細(xì)胞系體外生長(zhǎng)從而作為穩(wěn)定的懸浮培養(yǎng)物，其中的RPMI1640培養(yǎng)基含有10％胎小牛血清(Flow，Irwine，UK)，2mML-谷氨酰胺(GibcoEurope，Glasgow，UK)，10uM巰基乙醇，100個(gè)單位/ml青霉素和100ug/ml鏈霉素。在12孔/平皿(Costar，Cambridge，MA)上接種指數(shù)增長(zhǎng)的細(xì)胞(1×105個(gè)細(xì)胞/毫升)并在接種后馬上加入各種濃度的試驗(yàn)化合物。在37℃潮濕的5％CO2大氣中把該平皿溫育48小時(shí)。在一臺(tái)ZBICoulter計(jì)數(shù)器(Hialeah，F(xiàn)L)計(jì)數(shù)存活細(xì)胞數(shù)來評(píng)價(jià)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制。在導(dǎo)出的濃度-反應(yīng)曲線上計(jì)算50％的抑制濃度(IC50)。對(duì)每種試驗(yàn)化合物濃度來說，使用雙份培養(yǎng)物。表3報(bào)道了所得到的結(jié)果。表3*治療48小時(shí)R.I.＝耐藥指數(shù)＝ID50L1210/DXID50L1210正如上述表中的數(shù)據(jù)所證實(shí)的，Sarcodictyin對(duì)L1210和抗阿霉素的L1210細(xì)胞(L1210/DX)二者都具有良好的體外細(xì)胞毒活性。就Sarcodictyin對(duì)L1210/DX細(xì)胞的功效而言，它能夠用于耐化學(xué)治療劑如蒽環(huán)(anthracycline)糖甙特別是阿霉素的腫瘤治療中。用這樣一種方法能夠治療人或動(dòng)物，即該方法包括將藥物有效量的選自于SarcodictyinA，SarcodictyinB，SarcodictyinC，SarcodictyinD，SarcodictyinE和SarcodictyinF中的一種化合物給藥于患者。因此，改善了該人或動(dòng)物的癥狀。本發(fā)明的Sarcodictyin能夠以各種劑型給藥，如以片劑、膠囊、糖或膜包衣的片劑、液體溶液或懸浮液的形式口服給藥；以栓劑的形式直腸給藥；腸胃外給藥如肌肉內(nèi)給藥或靜脈注射或輸液給藥。劑量取決于患者的年齡、體重和身體條件和給藥途徑；例如，給成人口服如本發(fā)明的代表化合物FCE29213(SarcodictyinA)所采用的劑量可以在每天大約0.01g到大約1g的范圍內(nèi)。本發(fā)明還包括藥物組合物，它含有本發(fā)明的Sarcodictyin作活性成分以及藥物可接受的賦型劑(可是載體或稀釋劑)。含有本發(fā)明化合物的該藥物組合物一般是按照常規(guī)的方法制備的并可以藥物的適當(dāng)形式給藥。例如，固體口服形式可含有活性化合物及稀釋劑如乳糖、左旋糖、蔗糖、纖維素、玉米淀粉或馬鈴薯淀粉；潤(rùn)滑劑如二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂或鈣，和/或聚乙二醇；粘合劑如淀粉、阿拉伯膠、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解劑如淀粉、藻酸、藻酸鹽或羥乙酸淀粉鈉；發(fā)泡混合物；染料；矯味劑；濕潤(rùn)劑如卵磷脂、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯、月桂醇硫酸酯；和藥物制劑中所用的一般的無毒和藥效非活性物質(zhì)。該藥物制劑可以用熟知的方法生產(chǎn)，例如，混合、制粒、壓片、包衣或膜包衣的工藝方法。口服的液體分散液可以是如糖漿、乳液和懸浮液。糖漿可以包括例如蔗糖或含有甘油的蔗糖和/或甘露醇和/或山梨醇作載體。懸浮液和乳液可以包括例如天然膠、瓊脂、藻酸鈉、果膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素或聚乙烯醇。用于肌肉內(nèi)注射的懸浮液或溶液可含有活性成分及藥用載體例如，無菌水、橄欖油、油酸乙酯、乙二醇類如聚乙二醇和如果需要，定量的鹽酸利多卡因。用于靜脈注射或輸液的溶液可以包括例如，無菌水或優(yōu)選無菌、含水和等滲的鹽水溶液形式作載體。栓劑可含活性化合物及藥用載體例如，可可脂、聚乙二醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯表面活性劑或卵磷脂。權(quán)利要求1.一種選自于下組的用作治療劑的化合物(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-7-羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsA)；(E)-3-(1-基甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-6-(乙氧基羰基)-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-7-羥基-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsB)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-3，7-二羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsC)；(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(-)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-3-乙酰氧基-7，10-環(huán)氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-7-羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsD)；(Z)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(+)-(3R，4S，4aR，7S，10R，11R，12aS，1Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-3，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-3，7-二羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsE)；和(E)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4基)丙烯酸(+)-(1R，4R，4aR，7R，10S，11S，12aS，2Z，5E，8Z)-7，10-環(huán)氧-1，4，4a，7，10，11，12，12a-八氫-1，7-二羥基-6-(甲氧基羰基)-1，10-二甲基-4-(1-甲基乙基)苯并環(huán)十-11-基酯(SarcodictyinsF)。2.權(quán)利要求1所述的化合物，其用作微管蛋白合成的促進(jìn)劑，它能夠引起腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞分裂暫停。3.權(quán)利要求1所述的化合物，其用作抗腫瘤劑。4.權(quán)利要求1所述的化合物，其用于治療抗化學(xué)治療劑的腫瘤。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物，其中的化學(xué)治療劑是蒽環(huán)糖甙。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物，其中的蒽環(huán)糖甙是阿霉素。7.權(quán)利要求1所述的化合物在制備用作人或動(dòng)物的癌癥治療中抗腫瘤治療劑的藥劑的用途。8.一種藥物組合物，它含有權(quán)利要求1所述的化合物作為活性成分和藥用載體和/或稀釋劑。9.權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其用作微管蛋白合成的促進(jìn)劑，它能夠引起腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞分裂暫停。10.權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其用作人或動(dòng)物的癌癥治療中的抗腫瘤治療劑。11.權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其用于治療抗化學(xué)治療劑的腫瘤。12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的藥物組合物，其中的化學(xué)治療劑是一種蒽環(huán)糖甙。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的藥物組合物，其中的蒽環(huán)糖甙是阿霉素。全文摘要本發(fā)明涉及現(xiàn)有技術(shù)中稱作Sarcodictyins的萜類衍生物用作治療劑，和含有它的藥物組合物。尤其是Sarcodictyins能夠在人或動(dòng)物的癌癥治療中用作抗腫瘤治療劑。文檔編號(hào)A61K31/415GK1155839SQ96190508公開日1997年7月30日申請(qǐng)日期1996年4月23日優(yōu)先權(quán)日1996年4月23日發(fā)明者C·巴蒂斯蒂尼,M·西奧梅,F·皮特拉,M·丹布羅西奧,A·格爾里洛申請(qǐng)人:法瑪西雅厄普約翰公司