專利名稱：一種磷脂-維生素e琥珀酸聚乙二醇酯膠束的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種磷脂-維生素E琥珀酸聚乙二醇酯膠束在制備促進功效成分透皮吸收促滲劑中的應用，尤其涉及一種磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯混合的水溶性膠束凍干水溶粉。屬于制藥或化妝品領域。
背景技術：
膠束(micelles)是一個熱力學穩定體系，廣泛用于難溶性藥物的增溶，提高生物利用度。膠束在藥學中長期應用于難溶藥物的增溶，經增溶后藥物可達到臨床治療所需濃度。表面活性劑被放置到溶液中后，會迅速降低溶液的界面張力，但是隨著量的增加，表面活性劑分子在水溶液表面的濃度呈上升趨勢，飽和后，如果繼續加人表面活性劑，此時溶液的界面張力不再發生變化。表面活性劑分子這時就會迅速轉人溶液內部，從而形成親水基向外疏水基向內的表面活性劑分子締合體，稱之為膠束[陸彬.膠束給藥系統及其進展
(i)[J].中國藥師雜志，2006，9 (5):428-431.]。混合膠束為兩種或多種表面活性劑按一定比例混合而得的膠束體系，其臨界膠束濃度(critical micelles concentration, CMC)比單一組分膠束低，穩定性通常高于單組分膠束，在臨床應用中有明顯的優勢，如提高增溶量，提高淋巴或腫瘤靶向性，降低毒性。聚合物膠束制備主要有三種方法:直接溶解法、透析法和自組裝溶劑蒸發法。自組裝溶劑蒸發法是先把聚合物溶解到有機溶劑中，然后在攪拌條件下加入到水中，親水段逐漸進入水相，疏水段則 聚集成核，形成聚合物膠束，然后加熱，蒸出有機溶劑。磷脂是生物膜的組成成分，生物體內存在其相關分解酶，很容易代謝，因而磷脂具有生物降解性和生物兼容性，磷脂分子中的兩條長脂肪酸鏈使之具有疏水性。然而，磷脂分子量較小，形成的囊泡和膠束穩定性不夠，作為長循環和緩釋材料的應用方面受到很大的限制。目前的解決辦法是在其中加入含有長循環的組分:聚乙二醇、多聚糖、環糊精等成為長循環磷脂，以提高磷脂膠束或膠囊的穩定性。已有文章報道了不同鏈長的PEG形成的聚乙二醇一二硬脂酞磷脂酞乙醇胺(PEG-DsPE)膠束的特性。維生素E琥珀酸聚乙二醇酯(TPGS)是維生素E的水溶性衍生物，由親水的極性聚乙二醇頭和親酯的非極性維生素E琥珀酸酯尾組成，臨界膠束濃度為0.026%, HLB值13。TPGS最早由Eastman公司于1950年開發上市，并且被美國藥典收載為藥用輔料。在國外現已廣泛應用于制劑研究中作為增溶劑、吸收促進劑、乳化劑、增塑劑以及水難溶性和脂溶性藥物傳遞系統的載體，如固體分散體、眼部給藥的載體、鼻腔內給藥的載體等。近年來研究發現TPGS還可以抑制P-糖蛋白對藥物的外排作用。TPGS與聚合物單體共聚形成新的聚合物，可以克服一些聚合物的機械強度過高，降解速度過慢的缺點，還可以提高原有聚合物的釋放速率。將TPGS與乳酸共聚得到聚乳酸-聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯共聚物(PLA-TPGS)，用來制備加載紫杉醇的納米球。Ma等合成了聚己內酯-乳酸-聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯共聚物(PCL-PLA-TPGS)，加載多西他賽后，在第5天和第30天的體外釋放速率分別為21.38%和45.29%，明顯快于PCL納米球的釋放(11.12%,22.01% )0同時TPGS能夠抑制皮膚細胞內的P-糖蛋白將藥物制劑或化妝品功效成分(P-gp底物類的，例如輔酶QlO)外排到血液中，增加在皮膚內部的滯留，從而增強療效。TPGS作為藥用輔料的安全性也有一定的保證，Eastman公司的研究人員發現,成年大鼠口服TPGS維生素E琥珀酸酯和聚乙二醇1000的LD5tl值均超過7g/kg，Zhan等用TPGS-FOL(葉酸)結合物制備多柔比星納米粒靶向化療葉酸受體豐富的腫瘤細胞，證明了加入50% TPGS-FOL納米制劑的LD5tl值比不加50% TPGS-FOL制劑的LD5tl值顯著降低。且TPGS在體內可生物降解，這都證明TPGS作為維生素E營養補充劑或作為藥用輔料應用時是很安全。TPGS經常與其它脂質和共聚物形成混合膠束，TPGS的加入能夠顯著增加藥物包封率和膠束的穩定性。文獻中已有一些報導:TPGS/聚乙二醇-乙醇酸磷酯(TPGS/PEG-PE)、F127/TPGS (F127/TPGS) ,TPGS/ 聚乳酸乙醇酸-乙二(TPGS/PLGA-PEG)、PEG_DSPE/TPGS 等。因此，TPGS可作為混合膠束的材料，且可以改善其自身CMC過高的缺點，避免人體體液稀釋時的不穩定。

發明內容
本發明提供了一種磷脂-維生素E聚乙二醇琥珀酸酯膠束在制備促進功效成分透皮吸收中間體中的應用，所述膠束主要由磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯所制成，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 10-1: 50。優選地，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 10。或者，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 50。或者，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 30。
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優選地，所述的磷脂為天然磷脂、合成磷脂中的一種或幾種的混合物。優選地，所述的維生素E聚乙二醇琥珀酸酯為TPGS200、238、400、600、1000、2000、3400、3500、4000、6000中的一種或幾種的混合物。優選地，所述膠束是由如下方法所制成:將磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，攪拌；緩緩注入水中，加熱旋蒸回收乙醇，水溶液冷凍干燥，即制得磷脂維生素E琥珀酸聚乙二醇酯膠束水溶粉。本發明中磷脂-TPGS混合膠束的制備方法為自組裝溶劑蒸發法，其中溶劑采用乙醇，成本較低，易于工業化生產。即先將磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，攪拌；緩緩注入水中，加熱回收乙醇，制得磷脂-TPGS水溶性混合膠束。然后再采用溶劑-冷凍干燥法，具體過程為:將反應后的溶液置于-20 °C的冰箱預凍12h,迅速轉移入冷凍干燥機內，真空條件下冷凍干燥48h。即得磷脂-TPGS水溶粉，制得的水溶粉溶于水后可以自組裝成平均粒徑約為25nm的納米膠束。亦可采用溶劑-減壓干燥法和溶劑_噴霧干燥法來進行水溶液干燥。溶劑-減壓干燥法為:將反應結束的混合液置于旋轉蒸發儀上，40°C下減壓蒸發去除反應溶劑，殘留物在室溫下繼續減壓干燥過夜。溶劑-噴霧干燥法利用高壓泵，以70 200大氣壓的壓力，將混合液通過霧化器(噴槍)，聚化成10 200 μ m的霧狀微粒與熱空氣直接接觸，進行熱交換，簡便快捷。本發明的制成的磷脂-TPGS水溶粉復溶后進行了粒徑和外觀測定。平均粒徑為25nm,粒度大小均勻，分布較窄。且膠束成形良好，圓整度適中，大小較均勻。
本發明提供的磷脂-TPGS膠束水溶粉具有以下優點:1)磷脂和TPGS混合形成膠束可以降低膠束的CMC，增加膠束穩定性和安全性。2)磷脂和TPGS混合形成膠束可以減小膠束粒徑，使其能夠進入皮膚角質層細胞內部，與角蛋白相互作用，使角蛋白堆積疏松，降低角質層細胞的致密程度。3)膠束攜帶的磷脂可以在皮膚表面構成脂質通道，達到對化妝品功效成分的雙重促滲作用。4)凍干后制成水溶粉更利于與其他成分的混合，增加穩定性，便于保存。5)該磷脂-TPGS水溶粉的整個制備過程簡單可操作，便于工業化大生產。經文獻調研，目前未有將磷脂-TPGS制成空白混合膠束后冷凍干燥制成水溶粉來增加化妝品功效成分透皮促滲劑的報道。
具體實施方案:實施例1處方:磷脂40mg，TPGS2000mg·
制備工藝:將磷脂40mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯2000mg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質量比為1: 50的磷脂-維生素E琥珀酸聚乙二醇酯混合膠束溶液。將反應后的溶液置于_20°C的冰箱預凍12h，迅速轉移入冷凍干燥機內，真空條件下冷凍干燥48h，即得質量比為1: 50的磷脂-TPGS膠束水溶粉。實施例2處方:磷脂50mg，TPGS2000mg制備工藝:將磷脂50mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯2000mg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質量比為1: 40的磷脂-TPGS混合膠束。將反應后的溶液置于_20°C的冰箱預凍12h，迅速轉移入冷凍干燥機內，真空條件下冷凍干燥48h，即得質量比為1: 40的磷脂-TPGS膠束水溶粉。處方:磷脂60mg，TPGS1800mg制備工藝:將磷脂60mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質量比為1: 30的磷脂-TPGS混合膠束。再將反應結束的混合液置于旋轉蒸發儀上，40°C下減壓蒸發去除反應溶劑，殘留物在室溫下繼續減壓干燥過夜得質量比1: 30的磷脂-TPGS水溶粉。實施例4處方:磷脂90mg，TPGS1800mg制備工藝:將磷脂90mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質量比為1: 20的磷脂-TPGS混合膠束。再將反應結束的混合液置于旋轉蒸發儀上，40°C下減壓蒸發去除反應溶劑，殘留物在室溫下繼續減壓干燥過夜得質量比1: 20的磷脂-TPGS水溶粉。實施例5處方:磷脂180mg，TPGS1800mg制備工藝:將磷脂ISOmg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質量比為1: 10的磷脂-TPGS混合膠束。再利用高壓泵，以70 200大氣壓的壓力，將混合液通過霧化器(噴槍)，聚化成10 200 μ m的霧狀微粒與熱空氣直接接觸，進行熱交換得質量比為1: 10的磷脂-TPGS水溶粉。實施例6處方:磷脂300mg，TPGS1600mg制備工藝:將磷脂300mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯1600mg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質量比為1: 10的磷脂-TPGS混合膠束。再利用高壓泵，以70 200大氣壓的壓力，將混合液通過霧化器(噴槍)，聚化成10 200 μ m的霧狀微粒與熱空氣直接接觸，進行熱交換得質量比為1: 5的磷脂-TPGS水溶粉。實驗例1.透射電鏡實驗觀察膠束外觀取各種質量水溶粉適量，復溶于一定量的蒸餾水中，滴于電鏡制樣銅網上，吸附一段時間，1.5%的磷鎢酸負染，濾紙吸干剩余液體，燈照干燥5min，放入透射電鏡中，觀察形態。由電鏡圖可知:膠束成形良好，圓整度適中，大小較均勻。2.粒徑儀測量混合膠束粒徑和電位取各種質量比水溶粉適量，復溶于一定量的蒸餾水中，采用動態激光散射法來測定混合膠束的粒徑，粒徑分布和電位。結果顯示:粒度大小均勻，分布較窄，膠束的平均粒徑25nm。3.熒光探針法測定混合膠束的臨界膠束濃度(CMC)熒光探針技術主要是通過檢測探針分子的熒光強度的變化來確定體系性質的變化，向無熒光基團的高分子溶液中加入熒光探針的分子，它對溶液體系中的極性改變有著十分靈敏的檢測能力。熒光測定條件:發射光譜波長λ = 350nm-500nm，激發光譜波長λ=334nm ;激發和發射設定參數分別為5和2.5 ;石英樣品池IcmX Icm0采用1.0X KT4Mol/L的芘探針溶液。取各種質量比的水溶粉適量復溶于一定量的蒸餾水中，再稀釋成一系列濃度，再分別加入到含芘的試管中，稀釋到一定濃度，平衡一段時間測熒光光譜，記錄數據，計算得到磷脂-TPGS混合膠束的CMC為0.142mg/ml。比TPGS的CMC(0.120mg/ml)要小。4.水溶粉穩定性實驗TPGS的熔點僅為39°C，且磷脂容易發生氧化降解。根據《中國藥典》2010年版中穩定性指導原則，設定溫度25 ± 2°C，相對濕度60 ± 10 %，光照45001x± 5001x。取水溶粉分別在第1、2、3、6個月末取部分固體分散體，觀察樣品性 狀。實驗結果如表所示:由表中性狀可知，水溶粉穩定性良好。
權利要求
1.一種磷脂-維生素E聚乙二醇琥珀酸酯膠束的應用，所述膠束主要由磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯所制成，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為I: 10-1: 50，其特征在于，該膠束在制備促進藥物或化妝品功效成分透皮吸收促進劑中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 10。
3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 50。
4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 30。
5.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的磷脂為天然磷脂、合成磷脂中的一種或幾種的混合物。
6.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的維生素E聚乙二醇琥珀酸酯為TPGS200、238、400、600、1000、2000、3400、3500、4000、6000 中的一種或幾種的混合物。
7.根據權利要求1-6任一項所述的應用，其特征在于所述膠束是由如下方法所制成:將磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，攪拌；緩緩注入水中，回收乙醇，水溶液干燥，即制得磷脂維 生素E琥珀酸聚乙二醇酯膠束水溶粉。
全文摘要
本發明公開了一種磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯(TPGS)膠束作為藥物或化妝品功效成分的透皮促滲劑的應用。皮膚表皮的角質層為多層致密的膜結構，由角質細胞與其間的脂質成分組成，二者共同構成一道致密的屏障而阻止藥物等外界因素對其的影響。因此化妝品成分的透皮吸收必須克服角質層的屏障作用。本發明的磷脂-TPGS水溶粉采用乙醇注入法將一定比例的磷脂和TPGS制備成水溶性膠束，冷凍干燥后制得磷脂-TPGS水溶粉，其溶于水后自組裝成平均粒徑約為25nm的納米膠束，能夠進入皮膚角質層細胞內部，與角蛋白相互作用，角質層細胞的致密程度降低，同時攜帶的磷脂能構成脂質通道。這種膠束的穩定性非常好，對各類化妝品功效成分都有較好的促透效果。
文檔編號A61K47/24GK103142479SQ20131010537
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月29日 優先權日2013年3月29日
發明者呂慧俠, 張振海, 程鳳儀, 周建平 申請人:中國藥科大學