專利名稱：可釋放一氧化氮的新型非類固醇類抗炎藥、它們的制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一組可釋放一氧化氮(NO)的新型非類固醇類抗炎藥物，它們的制備方法和用途。非類固醇類抗炎藥(NSAID)有顯著的抗炎、解熱止痛和抗血栓作用，是最廣泛使用的藥物類型。由于這類藥物通過抑制環氧化酶，阻止前列腺素生成，普遍具有消化道毒性作用，包括胃粘膜損害和胃出血等。降低消化道毒副作用是近年來開發這類新藥的基本立足點。主要手段包括開發不經胃吸收的腸溶片，原形藥(形成肝臟代謝后的活性化物)、聯合用藥(如與抑制胃酸分泌藥或外源性前列腺素)，然而這些措施并沒有明顯地改善NSAID的嚴重副作用，如胃穿孔和出血(Soll A.H等.Ann.Intern.Med.114307-319，1991)。將NSAID與一種能釋放一氧化氮的分子片斷聯接組成的新化合物，被認為可以顯著降低甚至完全消除NSAID的胃腸道毒副作用。這種化合物，通過釋放NO維持胃粘膜血流量、阻止白細胞附著于胃微循環，對抗由于NSAID抑制前列腺素合成所產生的胃粘膜損害(Wallac J.L.Can.J.Physiol.Pharmacol.7198--102，1993)。根據最新文獻報道，三種NSAID(氟吡洛芬、酮洛芬和雙氯滅痛)的4-硝氧基丁基脂已經合成。這些化合物具有與母體NSAID相同的抗炎活性。但是，對胃損害的毒副作用明顯低于母體NSAID(Wallace，J.L等，Gastroenterology 8094-98，1994；Wallace，J.L等，Eur.JPharmacol.257249-255，1994；Cuzzolin L等，Pharmacol.Res.2989-97，1994；Reuter B.k等Life sci55p11-p18，1994)。大劑量多次重復給藥，NSAID導致顯著的小腸損害，穿孔和死亡，而同樣劑量的NSAID硝酸酯不引起小腸損害(Reuter B.K等Life sci.55p11-p18，1994)。除了解熱鎮痛和消炎以外，NSAID通過抑制血小板前列腺素(主要是血栓素)的生成，具有抗血栓形成作用。廣泛使用的有阿司匹林。然而，在阿斯匹林作為抗血栓藥，預防心腦血管疾病方面，長期用藥導致胃的毒副作用(如出血和穿孔)成為阿斯匹林使用上的一大障礙。一種阿斯匹林的硝酸酯衍生物可能大降低阿斯匹林的消化道毒性(尤其是長期用藥的病人)。此外，這種硝酸酯衍生物釋放NO，通過抑制血小板附著和聚集，增加阿斯匹林抗血小板活性。NO還直接擴張冠脈和腦血管。因此，這種阿斯匹林硝酸酯衍生物對心腦血管疾病的防治方面有廣泛的使用前景。根據NO對胃腸道的保護作用，將NSAID分子上連接一個含NO分子片斷。這種新型NSAID硝酸酯進入體內后釋放NO，可對抗由NSAID本身引起的胃腸道毒副作用。英國Metgrove公司對雙氯滅痛的飽和硝酸酯曾申請世界專利(PCT，專利號WO94/04484)。Wallace等對氟吡洛芬和酮洛芬飽合硝酸酯也有過藥理學研究(Wallace.J.L等，Currentawareness，Tips-Novenber 1994 Vol15 405-406)。其他NSAID的硝酸酯化合物至今未見文獻報導。本發明提供了阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、酚吡咯芬和吡咯芬的各種硝酸酯化合物。本發明還包括雙氯滅痛、氟吡洛芬和酮洛芬的不飽和硝酸酯化合物。本發明還包括阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、酚吡咯芬和吡咯芬的各種硝酸酯以及雙氯滅痛、氟吡洛芬和酮洛芬的不飽和硝酸酯的制備方法和它們的用途。本發明的目的在于提供能釋放一氧化氮(NO)的分子片斷與NSAID結構連接形成的一組新的NSAID硝酸酯化合物。NO可在體內釋放并對抗相應的NSAID藥物產生的消化道毒性。這組新型NSAID硝酸酯化合物有望取代原體藥物NSAID，用于抗炎、解熱、鎮痛和防治心腦血管和外周血管疾病。本發明的新型NSAID硝酸酯化合物的制備方法包括將含有羧基的NSAID與一個帶有鹵素(Br，cl或I)的單元醇反應生成含鹵素的羧酸酯，然后將鹵素轉化為硝基酯；或將含有羧基的NSAID與一個含硝基的單元醇反應生成NSAID的硝酸酯化合物。合成路線如下合成方法一 合成方法二 以下為制備本發明化合物的實施例，這些實施例并不意味著對本發明的限制。方法一實施例1、2-乙酰氧基苯甲酸-3-硝氧基丙基酯(硝酸酯)的合成(化合物1)1、在阿斯匹林(2.0g；11.10mmol)的苯溶液(40ml)中，加入3-溴丙醇(1.85g，13.31mmol)和濃硫酸(43.5mg，0.44mmol)。此反應液回流，除去水份，1小時后加入10％K2CO3(20ml)，用乙酸乙酯提取(50ml×3)，乙酸乙酯提取液合并后用10％K2CO3洗(10ml×1)，水洗(10ml×1)和飽和NaCL水溶液洗(10ml×1)。洗后的乙酸乙酯提取液用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮至干，殘留物用硅膠柱層析，9∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得2-乙酰氧基苯甲酸-3-溴丙基酯(101)(0.98g)1HNMR(300MH2)(CDCL3)2.30(m，2H)；2.36(s，3H)；3.52(t，2H)；4.43(t，2H)；7.10(d，1H)；7.32(t，1h)；7.58(t，1h)；8.01(d，1h)IR(cm-1)2963；1769；1723；1607；1452；1254；1194；1082.2、在一園底燒瓶中放入上述所得2-乙酰氧基苯甲酸-3-溴丙基酯(101)(140mg；0.46mmol)乙睛溶液(1ml)。然后滴加AgNO3溶液(85mg，0.50mmol溶解于1.5ml乙晴中)。上述反應液85℃加熱攪拌反應2小時，反應中有黃綠色沉淀產生，過濾除去沉淀，濾液濃縮至干。殘留物以硅膠柱層析分離，用4∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得2-乙酰氧基苯甲酸丙基酯(阿斯匹林硝酸酯)(化合物1；128mg)。1HNMR(300MH2)(CDCL3)2.20(m，2H)；2.35(S，3H)；4.40(t，2H)；4.61(t，2H)；7.12(d，1H)；7.33(t，1H)；7.60(t，1H)；8.01(d，1H).IR(cm-1)2969；2901；1767；1723；1628；1194；1080；860.實施例2、α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-硝氧基丙基酯(布洛芬硝酸酯)的合成(化合物2)1、在α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸鈉(布洛芬鈉鹽)(2.0g，8.76mmol)的苯懸浮液中(40ml)加入濃硫酸(894mg，9.11mmol)，此懸浮液攪拌數分鐘后轉為純清溶液，在此溶液中加入3-溴丙醇(1.46g10.50mmol)。此反應混合物回流，除去水份，1小時后加入10％K2CO3(20ml)，用乙酸乙酯提取(50ml×3)，乙酸乙酯提取液合并后用10％K2CO3洗(10ml×1)；水洗(10ml×1)和飽和NaCL水溶液洗(10ml×1)。洗后的乙酸乙酯層用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮至干，殘留物用硅膠柱層析，95∶5正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-溴丙基酯(102)(2.01g)1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.90(d，6H)；1.50(d，3H)；1.84(m，1H)；2.10(m，2H)；2.45(d，2H)；3.28(t，2H)；3.70(g，1H)；4.20(m，2H)；7.10(d，2H)；7.20(d，2H).IR(cm-1)2957；2868；1738；1512；1464；1215；1163；1094；1022；848.2、在α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-溴丙基酯(102)(2.01g，6.13mmol)的乙晴溶液(7ml)中滴加AgNO3溶液(1.2g，7.06mmol溶解于11ml乙腈中)，上述反應液于85℃加熱攪拌反應2小時，過濾除去生成的黃綠色沉淀，濾液濃縮至干，殘留物以硅膠柱層析分離，用9∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-硝氧基丙基酯〖布洛芬硝酸酯(化合物2，1.81g)〗1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.90(d，6H)；1.50(d，3H)；1.85(m，1H)；2.00(m，2H)；2.45(d，2H)；3.70(g，1H)；4.17(m，2H)；4.35(t，2H)；7.10(d，1H)；7.02(d，1H)；7.20(d，1H).IR(cm-1)2957；2870；1738；1632；1281；1165；858.方法二實施例3α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯(布洛芬不飽和硝酸酯)的合成(化合物3)1)、1，4-丁炔-2二醇(4g，46.45mmol)溶解于二氧甲烷中(100ml)，在此溶液中加入叔丁基二甲基氯化硅(7.68g，51.13mmol)和咪唑(3.48g，51.13mmol)，此反應混合物在室溫攪拌反應四小時后過濾除去沉淀，濾液減壓濃縮至干，其殘留物用硅膠柱層析分離，從4∶1正已烷-乙酸乙酯混合液洗脫得1-叔丁基二甲基硅氧基丁炔(2)-4-醇(103)(4.2g)1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.10(S，6H)；0.90(S，9H)；4.30(S，2H)；4.35(S，2H).2)、在一園底燒瓶中置乙酸酐(9.13ml，89.50mmol)并用冰水浴冷卻，在此冷的乙酸酐中滴加無色濃硝酸(2.37ml，51.35mmol)，滴加完后在冰水浴中反應15分鐘，然后將此混合液在冰水浴冷卻下加到1-叔丁基二甲基硅氧基丁炔(2)-4醇(4.2g，22.34mmol)中，此反應混合物在冰水浴中反應一小時后加入少量冰，然后用二氯甲烷提取三次(30ml×3)，提取液用10％NaHCO3水溶液洗二次(5ml×2)，水冼一次(5ml)，飽和NaCL水溶液一次(5ml)，二氯甲烷提取液用無水硫酸鎂干燥，過濾除去硫酸鎂，濾液濃縮至干，殘留物用硅膠柱層析分離，4∶1正己烷-乙酸乙酯洗脫得1-叔丁基二甲基硅氧基-4-硝氧基丁炔-2(104)(3.1g)1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.12(S，6H)；0.92(S，9H)；4.38(S，2H)；5.04(S，2H).3)、在冰水浴冷卻下的1-叔丁基二甲基硅氧基-4-硝氧基丁炔-2(104)(3.1g，12.65mmol)四氫呋喃(30ml)溶液中加入氟化四正丁基銨(9.8g，37.72mmol)，反應混合物然后在室溫下反應二小時，反應液減壓濃縮至干，其殘留物用硅膠柱層析分離，以2∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得1-硝氧基丁炔(2)-4-醇(105)(1.1g).1HNMR(300MH2)(CDCL3)4.32(S，2H)；5.05(S，2H).4).在α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸鈉(100mg，0.44mmol)的苯懸浮液中(20ml)加入濃硫酸(43.1mg，0.44mmol)，此懸浮液攪拌數分鐘后轉為純清溶液，在此溶液中加入1-硝氧基丁炔(2)-4-醇(105)(86.1g，0.66mmol)，此反應物回流，除去水份，1小時后加入10％K2CO3(10ml)，然后用乙酸乙酯提取(20ml×3)，乙酸乙酯混合并再用10％K2CO3洗(5ml×1)水洗(5ml×1)和飽和NaCl水溶液洗(5ml×1)。乙酸乙酯層用無水硫酸鎂干燥，過濾除去硫酸鎂，濾液減壓濃縮至干，殘留物用硅膠柱層析分離，用9∶1正已烷-乙酸乙酯洗脫得α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸2-硝氧基-丁炔(2)酯(化合物3)(88mg).1HNMR(300MH2)(CDCL3)0.90(d，6H)；1.50(d，3H)；1.86(M，1H)；2.46(d，2H)；3.74(g，1H)；4.70(g，2H)；5.00(S，2H)；7.10(d，2H)；7.20(d，2H).實施例41-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸-4-硝氧基丁炔(2)酯(消炎痛不飽和硝酸酯)的合成(化合物4)1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸(消炎痛)(300mg，0.84mmol，1-硝氧基丁炔(2)-4-醇(105)(91.6mg，0.70mmol)，和4-二甲胺基吡啶(DMAP)(28.1mg，0.23mmol)溶解在5ml CH2CL2.1，3-二環己基碳二亞胺(DCC)(172.7mg，0.84mmol)加入到上述反應液中，此反應液在室溫反應六小時，反應混合物過濾除去沉淀物，濾液濃縮至干，殘留物硅膠柱層析分離，以2∶1正己烷-乙酸乙酯混合液洗脫得1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯(消炎痛不飽和硝酸酯)(化合物4)(210mg)1HNMR(300MH2)(CDCL3)2.40(S，3H)；3.72(S，2H)；3.85(S，3H)；4.76(S，2H)；5.02(S，2H)；6.07(M，1H)；6.88(D，1H)；6.97(d，1H)；7.50(d，2H)；7.70(d，2H).實施例5(S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯(萘普生不飽和硝酸酯)的合成(化合物5)。(S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸(萘普生)(200mg，0.87mmol)，1-硝氧基-丁炔(2)-4-醇(105)(94.9mg，0.72mmol)，和4-二甲胺基吡啶(DMAP)(29.1mg.0.23mmol)溶解在5mlCH2CL2.1，3-二環己基碳二亞胺(DCC)(178.9mg，0.87mmol)加入到上述反應液中，此反應液在室溫反應六小時，反應混合物冷卻到室溫后過濾除去沉淀物，濾液濃縮至干，殘留物硅膠柱層析分離，以3∶1正已烷-乙酸乙酯混合液洗脫得(S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯(萘普生不飽和硝酸酯)(化合物5)(178mg)1HNMR(300MH2)(CDCL3)1.60(d，3H)；3.89(M，1H)；3.90(S，3H)；4.70(M，2H)；5.00(S，2H)；7.15(d，2H)；7.40(d，1H)；7.70(t，3H).上述二方法中母體NSAID藥物除包含上述阿斯匹林、布洛芬、消炎痛、萘普生外，還包括酚吡咯芬和吡丙芬的飽和及不飽和直鏈和支鏈及雙氯滅痛，氟吡洛芬和酮洛芬的不飽和的直鏈和支鏈硝酸酯。單元醇和雙元醇包括以下結構的醇HORX，HOROH其中R＝1-10個碳的飽和及不飽和，直鏈及支鏈的烷基；X＝CL，Br，I本發明的新型NSAID硝酸酯口服后體內活性測定65只雌性CD-1小鼠(體重21-26克)隨機分為13組(每組5只)。分別為溶劑對照組；消炎痛和消炎痛-4-硝基丁炔酯給藥組(1.0mg/kg和0.1mg/kg)；萘普生和萘普生-4-硝基丁炔酯給藥組(10mg/kg和1mg/kg)；布洛芬和布洛芬-4-硝基丁炔酯給藥組(10mg/kg和1mg/kg)。布洛芬、消炎痛、萘普生三種原形藥從sigma公司購進。實驗前動物禁食15小時。10％PEG200用作溶劑，各種藥物先溶解于PEG200之中，然后按10％PEG200比例在超聲狀態下加入蒸溜水，制成口服液。各個動物分別灌胃給予對照溶劑或實驗藥物(1ml/kg體重)。給藥后1小時，斷頭取血。以每ml血加入100單位肝素抗凝。取0.3ml全血加入2mM Ca+2離子導入劑A23187 3μl，在37℃溫度下培養30分鐘后，離心制備血漿。然后采用美國Cayman公司血栓素B2(T×B2)EIA測定藥盒檢測血漿樣品中T×B2含量。血液T×B2水平反映全血細胞中環氧化酶活性。用Cayman T×B2EIA藥含測定全血T×B2含量，在沒有A23187刺激條件下為7.2ng/ml。當加入A23187后T×B2血濃度增加到502.8±83ng(x±SE)/ml。各種藥物對A23187刺激全血T×B2生成的抑制活性見表1
結果表明，以上三種NSAID的硝基丁炔酯在口服吸收后都具有顯著抑制環氧化酶產生前列腺素代謝產物作用。并且與原型化合物相比其抑制作用均有不同程度的提高。
權利要求
1.一組可釋放一氧化氮分子的含羧基的非類固醇抗炎藥(NSAID)的硝酸酯，具有如下的分子結構Y-COO-R-ONO2其中Y-COO-為羧基NSAID，R為1-10個碳的飽和或不飽和直鏈或支鏈烷基，Y-COO-為阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、酚吡咯芬和吡丙芬時，R為1～10個碳的飽和或不飽和直鏈或支鏈的烷基，Y-COO-為雙氯滅痛、氟吡洛芬和酮洛芬時，R為1～10個碳的不飽和直鏈或支鏈的烷基。
2，權利要求1的NSAID硝酸酯用于解熱、鎮痛、消炎和防治缺血性心腦血管疾病。
3，制備權利要求1的新型NSAID硝酸酯的方法，其特征為NSAID中的羧基與含鹵素或含硝氧基的醇反應。
4.根據權利要求3的制備方法，其特征是所述鹵素為Br，CL，I；其轉化成硝氧基的反應是在乙腈溶劑中與硝酸銀反應。
5.根據權力要求3或4的方法其中醇的羥基轉化為硝酸酯(硝氧基)的方法中，所用試劑是乙酸酐與濃硝酸的混合物。
6.權力要求1中的NSAID藥物是指阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、酚吡咯芬、吡丙芬、雙氯滅痛、氟吡洛芬和酮洛芬。
7.根據權力要求3的方法其中的醇為以下結構HORX，HCROH.其中R＝1-10個碳的飽和或不飽和，直鏈或支鏈的烷基；X＝CL，Br，I
8.用說明書中方法一制備阿司匹林硝酸酯(2-乙酰氧基苯甲酸-3-硝氧基丙基酯)和布洛芬硝酸酯(α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸-3-硝氧基丙基酯)。
9.用說明書中方法二制備布洛芬不飽和硝酸酯(α-甲基-4(2-甲基丙基)苯乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯)，消炎痛不飽和硝酸酯(1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯和萘普生不飽和硝酸酯((S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸-4-硝氧基-丁炔(2)酯。
10.用說明書中方法一或方法二制備阿司匹林硝酸酯(2-乙酰氧基苯甲酸硝氧基烷(烯、炔)基酯)，萘普生硝酸酯((S)-6-甲氧基-α-甲基-2-萘乙酸-硝氧基烷(烯、炔)基酯)，布洛芬硝酸酯(α-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸硝氧基烷(烯、炔)基酯)，消炎痛硝酸酯(1-(4-氯苯甲酰)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-乙酸-4-硝氧基烷(烯、炔)基酯；酚吡咯芬硝酸酯(α-甲基-3-酚基-苯乙酸硝氧基烷(烯、炔)基酯；吡丙芬硝酸酯(3-氯-4-(3-吡咯啉-1-基)氫化阿托酸硝氧基烷(烯、炔)基酯)；雙氯滅痛硝氧基(烯、炔)基酯；氟比洛芬硝酸酯(α-甲基-3氟-4-苯基-苯乙酸硝氧基烯(炔)基酯)；和酮洛芬硝酸酯(α-甲基-3-苯甲酮基-苯乙酸硝氧基烯(炔)基酯)。
全文摘要
本發明的內容為一組非類固醇類抗炎藥物(NSAID)分子上含有能釋放一氧化氮(NO)的新化合物，即這類藥物的硝酸酯。這類NSAID包括阿斯匹林、消炎痛、萘普生、布洛芬、吡丙芬、酚吡丙芬、氟比洛芬、酮洛芬和雙氯滅痛。NSAID廣泛用于解熱、鎮痛和消炎以及心腦血管疾病的預防和治療。新的NSAID硝酸酯類化合物，在體內釋放一氧化氮，對抗NSAID本身引起的消化道副作用，具有更好的安全性和更廣泛的用途。
文檔編號A61K31/215GK1144092SQ9510979
公開日1997年3月5日 申請日期1995年8月25日 優先權日1995年8月25日
發明者蔡雄, 錢長庚 申請人:蔡雄, 錢長庚