專利名稱：西多福韋脂質體及其制備方法
技術領域：
本發明涉及西多福韋脂質體及其制備方法，屬于醫藥技術領域。
背景技術：
西多福韋(cidofovir，HPMPC，GS-504)是開環核苷酸類似物，能抑制病毒DNA聚合酶，對人CMV有很強的抑制作用，對其它皰疹病毒如單皰病毒(HSV)I型和II型、水痘一帶狀皰疹病毒(VZV)、E～B病毒、皰疹6型病毒(HHV-6)及腺病毒、人乳頭瘤狀病毒(HPV)也有很強的活性。西多福韋注射液由Gilead公司開發，于1996年5月15日經美國FDA批準上市，商品名為Vistide，用于治療艾滋病患者巨細胞病毒引起的視網膜炎。該藥在療效、耐受性及治療指數方面明顯優于已上市的藥物更昔洛韋及膦甲酸鈉，然而由于西多福韋存在嚴重的毒副作用，特別是腎毒性，嚴重的限制了其在臨床的應用。

發明內容本發明針對現有技術的不足，提供了一種輔料易得、制備簡單、包裹率高、毒副作用小、療效好的新型西多福韋脂質體。
本發明為西多福韋脂質體，其特征在于，包含以下組分，均為重量百分比1～10％西多福韋，40～68％卵磷脂，10～17％膽固醇，0.5～3％去氧膽酸鈉和2％～48.2％蔗糖組成。卵磷脂選自蛋黃中提取的天然卵磷脂或從大豆中提取的大豆卵磷脂。
本發明公開的西多福韋脂質體制備方法包括下列步驟1、稱取處方量的卵磷脂、膽固醇，用無水乙醇溶解后混合后使其成為脂質溶液。
2、將上述脂質溶液用旋轉蒸發器蒸發，減壓除乙醇，制備脂質膜。
3、稱取處方量的西多福韋溶解于pH6～8的磷酸緩沖液中，制備西多福韋磷酸鹽緩沖溶液。
4、在上述西多福韋磷酸鹽緩沖溶液中加入處方量的去氧膽酸鈉和蔗糖充分混合溶解后，加到制備的脂質膜中混合，高壓勻漿器粉碎制備脂質體，檢查脂質體粒徑合格，凝膠柱分離出脂質體溶液，0.45μm微孔濾膜澄清過濾，0.22μm微孔濾膜過濾除菌，罐裝，冷凍，干燥即得。包封率≥80％，粒徑≤1um。
用本發明脂質體進行有關毒理和藥效試驗，結果如下毒性試驗用本發明得西多福韋脂質體凍干制劑分別給予家兔及獼猴靜脈注射給藥，觀察動物的毒性試驗，并同時測定未包封脂質體的西多福韋靜脈給藥于家兔及獼猴做比較，試驗結果如下西多福韋脂質體單劑量不出現致死的最大劑量為家兔＞189mg/kg；獼猴＞72mg/kg；未包封脂質體的西多福韋單劑量不出現致死的最大劑量為家兔＞100mg/kg；獼猴＞40mg/kg。腎毒性為西多福韋用藥后最主要毒副作用，西多福韋脂質體出現腎毒性的劑量為家兔為94mg/kg；獼猴為208mg/kg；未包封脂質體的西多福韋出現腎毒性的劑量為家兔為60mg/kg；獼猴為150mg/kg。可以看出西多福韋脂質體比未包封脂質體的西多福韋的單劑量毒性小約2倍，對腎毒性也小得多。
藥效試驗在MRC-5D的細胞培養內，西多福韋抑制CMV AD-169實驗病毒株50％空斑形成的濃度(IC50)為0.007μg/ml，抑制17株臨床分離病毒株的平均IC50為0.069μg/ml，而西多福韋脂質體IC50為0.0023μg/ml，西多福韋脂質體的的選擇指數(50％細胞毒性濃度與IC50的比值)比西多福韋高30倍。在CMV AD-169感染48小時后加入西多福韋脂質體仍有很強的抑制作用。豚鼠胚胎細胞感染豚鼠CMV和人二倍體成纖維細胞感染人CMV后，西多福韋脂質體的IC50分別為0.0073和0.017μg/ml。對這兩種細胞的50％毒性濃度分別為毒性濃度分別為2.8和3.8mol/l，其選擇指數均在400以上。
上述試驗證明，本發明西多福韋脂質體顯著降低了原西多福韋的毒性，增強了其抗病毒的藥效。
具體實施方式
實施例1西多福韋脂質體，組分如下西多福韋 1g
卵磷脂40g膽固醇10g去氧膽酸鈉0.5g蔗糖 48.5g制備方法如下稱取卵磷脂40g，加入500ml無水乙醇，加入膽固醇10g，攪拌溶解，用旋轉蒸發器減壓蒸發成膜。稱取1g的西多福韋，加入300ml PH6.86的磷酸緩沖液溶解，加入0.5g去氧膽酸鈉和48.5g蔗糖后與卵磷脂混合，制備混懸液，高壓勻漿混勻制備脂質體，凝膠柱分離脂質體溶液，澄清過濾后用0.22um微孔膜過濾，罐裝，冷凍干燥即得西多福韋脂質體。
實施例2西多福韋脂質體，組分如下西多福韋 5g卵磷脂52g膽固醇12g去氧膽酸鈉1g蔗糖 30g制備方法同實施例1，實施例3西多福韋脂質體，組分如下西多福韋 10g卵磷脂68g膽固醇17g去氧膽酸鈉3g蔗糖 2g制備方法同實施例1。
實施例4射用西多福韋脂質體，組分如下西多福韋37.5g卵磷脂 200g膽固醇 40.5g去氧膽酸鈉 10g蔗糖5g制備方法如下稱取卵磷脂200g加入1000ml無水乙醇，40.5g膽固醇，攪拌溶解，用旋轉蒸發器減壓蒸發成膜。稱取37.5g西多福韋，加入350mlPH7.04磷酸緩沖液中溶解，加入10g去氧膽酸鈉和5g蔗糖混合溶解后加到制備的脂質膜中混合，高壓勻漿器粉碎制備脂質體，檢查脂質體粒徑合格后，凝膠柱分離出脂質體溶液，0.45um微孔濾膜過濾澄清，0.22um微孔濾膜除菌，罐裝100瓶，冷凍干燥即得注射用西多福韋脂質體。
實施例5西多福韋脂質體片，組分如下西多福韋脂質體 100g淀粉10g微晶纖維素 15g微粉硅膠3g硬脂酸鎂1g5％PVP水溶液適量制備方法如下稱取西多福韋脂質體干粉100g過100目篩，稱取淀粉、微晶纖維素過100目篩，充分混合后，加入5％PVP水溶液適量做軟材，過20目篩，50℃真空干燥1小時，20目篩整粒，加入3g微粉硅膠和1g硬脂酸鎂混勻后壓片，羥丙基纖維素包薄膜衣即得。
實施例6西多福韋脂質體膠囊，組分如下
西多福韋脂質體150g微晶纖維素20g微粉硅膠 3g5％PVP醇溶液 適量稱取西多福韋脂質體150g過100目篩，稱取微晶纖維素20g，過100目篩，混勻，加入5％PVP乙醇溶液適量做軟材，過20目篩，50℃真空干燥1小時，20目篩整粒，加入3g微粉硅膠，裝入膠囊即可。
實施例7西多福韋脂質體顆粒，組分如下西多福韋脂質體200g糊精 100g甜蜜素0.5g稱取西多福韋脂質體200g，加入糊精100g，甜蜜素0.5g，用乙醇制軟材，16目篩制顆粒，40℃真空干燥，12目篩整粒，分裝成袋即可。
權利要求
1.本發明為西多福韋脂質體，包含以下組分，均為重量百分比1～10％西多福韋，40～68％卵磷脂，10～17％膽固醇，0.5～3％去氧膽酸鈉，2％～48.2％蔗糖。
2.權利要求1所述的西多福韋脂質體的制備方法，其特征在于，該脂質體的制備包括下列步驟1)稱取處方量的卵磷脂、膽固醇，用無水乙醇溶解后混合后使其成為脂質溶液。2)將口述脂質溶液用旋轉蒸發器蒸發，減壓除乙醇，制備脂質膜。3)稱取處方量的西多福韋溶解于pH6～8的磷酸緩沖液中，制備西多福韋磷酸鹽緩沖溶液。4)在上述西多福韋磷酸鹽緩沖溶液中加入處方量的去氧膽酸鈉和蔗糖充分混合溶解后，加到制備的脂質膜中混合，高壓勻漿器粉碎制備脂質體，檢查脂質體粒徑合格，凝膠柱分離出脂質體溶液，0.45μm微孔濾膜澄清過濾，0.22μm微孔濾膜過濾除菌，罐裝，冷凍，干燥即得。
全文摘要
本發明涉及一種西多福韋脂質體及制備方法，屬于醫藥技術領域。一種西多福韋脂質體，包含以下組分，均為重量百分比1～10％西多福韋，40～68％卵磷脂，10～17％膽固醇，0.5～3％去氧膽酸鈉和2％～48.2％蔗糖。稱取處方量的卵磷脂、膽固醇，用無水乙醇溶解后混合用旋轉蒸發器蒸發得脂質膜；再將西多福韋溶于磷酸緩沖液，加入處方量的去氧膽酸鈉和蔗糖后，加到制備的脂質膜中混合，高壓勻漿器粉碎制備脂質體，然后經微孔濾膜過濾、除菌，罐裝，冷凍干燥即得。該藥可用于治療艾滋病患者巨細胞病毒感染引起的視網膜炎。該藥降低了藥物的毒副作用，增強了藥物的療效。
文檔編號A61K31/7052GK1698643SQ20051004358
公開日2005年11月23日 申請日期2005年5月27日 優先權日2005年5月27日
發明者肖廣常, 張穎, 孫錦光, 王淑娟 申請人:山東恒瑞醫藥科技發展有限公司