專利名稱：含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿的制作方法
技術領域：
本發明涉及化工及生物醫藥領域，特別是涉及一種含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿，以及制備方法。適合作為各種外傷敷料。
背景技術：
殼聚糖是天然多糖甲殼素的脫乙酰化產物，是一種含有游離氨基的堿性多糖，具有多種生物功能。近年來，國內外學者的研究表明，殼聚糖在醫藥方面的應用已經越來越顯示出其獨特的優勢。殼聚糖及其衍生物具有良好的生物相容性、可降解性、對人體無毒副作用及一定的抑菌作用等特性，是一種安全可靠的醫用高分子材料。殼聚糖的葡萄糖單元中含有氨基、羥基等活性基團，具有很強的配位、螯合作用，可與大部分金屬離子形成配合物 [李巖，謝云濤，何玉鳳，王榮民，丁蘭.低聚殼聚糖金屬卟啉絡合物的制備及抗腫瘤細胞活性研究[J].西北師范大學學報，2007，43 (2): 50.]。
研究表明稀土元素及其化合物具有消炎、殺菌、抑制微生物生長的抗菌作用，一些稀土化合物及稀土有機配合體配合物可用于治療燒傷、皮膚病、濕疹、關節炎等病癥。近年來，隨著抗生素的廣泛應用，細菌的抗藥性也越來越強，科學家在探索一種新型的療效好、 毒副作用小的新藥。研究表明，適宜濃度的稀土元素對微生物的增長有輕微刺激作用，提高稀土元素的濃度對微生物的生長產生抑制作用，而且稀土元素在一定的劑量下屬于低毒物質。吳士筠[吳士筠.La(III)的抑菌作用研究[J].中南民族大學學報，2005，24(3):23-26.]等進行La(III)抑菌實驗的研究，證明La離子對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌有不同程度的抑制作用。含殼聚糖和/或殼聚糖衍生物稀土復合物的粉劑和敷料，可以充分發揮稀土良好的抑菌效果，人們開始關注以殼聚糖及其衍生物作為載體、 分散劑和保護劑的含殼聚糖和/或殼聚糖衍生物稀土復合物的粉劑和敷料制備方法及應用。張愛迪[張愛迪，丁德潤，陳燕青.La(III)，Sm(III)與低分子量殼聚糖配合物的合成及性質[J].中國稀土學報，2009，27(5):592-596.]等以低分子殼聚糖與稀土離子 LadII) ,SmdII)制備低分子量殼聚糖稀土金屬離子配合物，并對其表征和抑菌研究，得出稀土離子和殼聚糖之間以氨基和羥基進行配位，殼聚糖及其配合物對革蘭氏陽性球菌和革蘭氏陰性桿菌的最低抑菌濃度分別為4和5g ·廠1。
殼聚糖作為一種高分子海洋活性多糖，具有優良的吸附性、溶脹性和成膜性，可以將殼聚糖及其衍生物制成各種各樣的醫用敷料，如殼聚糖膜、殼聚糖海綿、殼聚糖凝膠等。 羅勇華，趙麗等[羅勇華，趙麗，孫竹華.納米銀/羧甲基殼聚糖生物敷料的研制表征及抑菌試驗研究[J].交通醫學，2009，23 O) :141-144.]用羧甲基殼聚糖與納米銀制備得到納米銀/羧甲基殼聚糖敷料，對樣品進行了結構表征，并利用制備的納米銀/羧甲基殼聚糖敷料對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等致病菌的抑菌效果進行檢測，實驗結果表明，合成的可降解殼聚糖敷料結合了兩種成分的優點，顯出較強的抑菌效果。利用殼聚糖作為稀土元素的載體，制備一種完全新型的醫用材料，使其同時具有殼聚糖及稀土制劑的優勢，并且可以促進藥物的滲透吸收，適當的表面修飾還可使之對特定病灶具有靶向作用。如何制備用于皮膚潰瘍、燒傷等具有抗菌譜廣、高效、無毒、抗菌持久、止血止痛、促進創面修復、潰瘍愈合的新型醫用敷料，是目前需要解決的問題。發明內容
在已有研究的基礎上，針對現有技術的不足，本發明人以固相合成的殼聚糖和/ 或其衍生物稀土復合物為原料，加入適量魚膠、甘油，采用冷凍干燥的方法制得稀土離子分布均勻，具有良好的吸濕、保濕、吸水、透氣性，并具有良好抑菌作用、止血鎮痛促進創面愈合的生物海綿敷料。殼聚糖稀土元素一鑭、鈰、釤海綿樣品對以大腸桿菌(federichia coli, E. coli)為代表的革蘭氏陰性菌，對以金黃色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)為代表的革蘭氏染色陽性菌，對以白色念珠菌(Monilia albican或canidia Albicans)為代表的真菌，均具有較好的接觸抑菌作用。
本發明的目的之一是提供上述含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿， 以及制備方法。本發明的目的之二是提供上述生物海綿在治療創傷、皮膚潰瘍、褥瘡、燒傷等中的應用。
本發明的技術方案是含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿，組分中含有殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物、甘油、膠原類物質和冰醋酸，吸濕性100 221%，保濕性80 96%，吸水性433 785%，吸透性33% 47%。
所述的膠原類物質為明膠或魚膠。所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、羥丙基甲殼素、羧甲基殼聚糖、羧甲基甲殼素、琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數種。
本發明還提供了所述的生物海綿的制備方法，步驟如下(1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物研磨為細粉；(2)按照殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與稀土化合物的重量比例1000. 5 10 (優選 100 :2 8，更優選100 :5)，將步驟(1)所得細粉與稀土化合物細粉混勻，充分快速研磨1 3小時(優選1. 5 2. 5小時，更優選2小時)，即得殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物；(3)將步驟(2)所得細粉用0.5-1. 2%的冰醋酸溶液配制成質量濃度為1-4%的殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物溶液；(4)將步驟(3)所得溶液、魚膠溶液與甘油按一定的體積比混勻，抽真空脫氣；(5 )將(4 )所得混合液置模具內，-20 V -80 V (優選-25 °C -60 V，更優選-50 V ) 冷凍15 M小時(優選18 22小時，更優選20小時)后，置冷凍干燥機中-50°C _80°C (優選_55°C _70°C，更優選_60°C )冷凍真空干燥M 48小時(優選30 40小時，更優選35小時)，即得含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿。
所述的制備方法，優選的方案在于，所述稀土化合物為氯化鑭、硫酸鈰銨、氧化釤中的一種或幾種。
所述的制備方法，優選的方案在于，冰醋酸溶液的質量濃度為0.8-1.0%，優選 1. 0%。
所述的制備方法，優選的方案在于，步驟(3)所得殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物溶液的質量濃度為2-3. 5%，優選為3. 0%。
本發明還提供了所述的生物海綿在醫用敷料中的應用。尤其在治療褥瘡、皮膚潰瘍、燒傷、燙傷、創傷、陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛上的應用。
本發明以固相法合成殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物，并以此為主要原料之一，制備的含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿敷料，具有促進創面愈合、抑菌、止血、止痛作用；可直接作用于創面，并具有良好的吸濕、保濕、吸水和透氣性；抗菌譜廣、作用持久；可提高愈合質量，降低毒副作用，減少抗生素的使用，防止細菌對抗生素繼發耐藥的產生。并且制備工藝簡單，具有開發應用前景。
除此之外，本發明的優良效果還表現在1.同時具有稀土元素一鑭、鈰、釤制劑及殼聚糖或其衍生物的功能及優勢，殼聚糖或其衍生物與鑭、鈰、釤離子具有協同抑菌作用。
2.在制備過程中以殼聚糖或其衍生物作為稀土元素一鑭、鈰、釤的載體，生成配合物或鹽，使其分散均勻。
3.殼聚糖稀土元素一鑭、鈰、釤海綿樣品對以大腸桿菌(fecAericAia coli, E. coli)為代表的革蘭氏陰性短桿菌，對以金黃色葡萄球菌(Sia/^j^occocm aureus 辦從/？如^力)為代表的革蘭氏染色陽性菌，對以白色念珠菌(Mwi/ia albican或canidia Albicans)為代表的真菌，均具有較好的接觸抑菌作用。
4.所得生物海綿輔料具有良好抑菌、預防創面感染以及吸濕、保濕、吸水及吸透功能，集多功能于一體。


圖1是樣品1生物海綿敷料照片。
圖2是樣品6生物海綿敷料照片。
具體實施方式
下面結合實施例詳細說明本發明的技術方案，但保護范圍不限于此。
實施例1-20所得含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿，組分中含有殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物、甘油、膠原類物質和冰醋酸，吸濕性100 221%，保濕性 80 96%，吸水性433 785%，吸透性33% 47%。
實施例1 一種殼聚糖鈰復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.05g硫酸鈰銨細粉；(3)將殼聚糖細粉與硫酸鈰銨細粉混勻，充分快速研磨2小時，即得殼聚糖鈰復合物粉末；(原料1)(4)將(3)所得混合物細粉加入0.5%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7. ^il,加入魚膠 70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，-20°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鈰復合物的海綿生物敷料。該海綿敷料質地柔軟，疏松多孔，孔徑均勻，呈淡黃色。(樣品1)實施例2 —種殼聚糖鈰復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.Ig硫酸鈰銨細粉；(3)將殼聚糖細粉與硫酸鈰銨細粉混勻，充分快速研磨1.5小時，即得殼聚糖鈰復合物粉末；(原料2)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_50°C凍M小時，置冷凍干燥機中_60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鈰復合物的海綿生物敷料。(樣品2)實施例3 —種殼聚糖鈰復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.2g硫酸鈰銨細粉；(3)將殼聚糖細粉與硫酸鈰銨細粉混勻，充分快速研磨2.5小時，即得殼聚糖鈰復合物粉末；(原料3)(4)將(3)所得混合物細粉加入1.洲醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il,加入魚膠 70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中_60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鈰復合物的海綿生物敷料。(樣品3)實施例4 一種殼聚糖鈰復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.5g硫酸鈰銨細粉；(3)將殼聚糖細粉與硫酸鈰銨細粉混勻，充分快速研磨2小時，即得殼聚糖鈰復合物粉末；(原料4)(4)將(3)所得混合物細粉加入0.5%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7. ^il,加入魚膠 70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，-50°C凍22小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鈰復合物的海綿生物敷料。(樣品4)實施例5 —種殼聚糖鑭復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.05g氯化鑭細粉;(3)將殼聚糖細粉與氯化鑭細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖鑭復合物粉末；(原料5)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_60°C凍20小時，置冷凍干燥機中_60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鑭復合物的海綿生物敷料。(樣品5)實施例6 —種殼聚糖鑭復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.Ig氯化鑭細粉；(3)將殼聚糖細粉與氯化鑭細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖鑭復合物；(原料6)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il,加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍24小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鑭復合物的海綿生物敷料。(樣品6)實施例7 —種殼聚糖鑭復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.8g氯化鑭細粉；(3)將殼聚糖細粉與氯化鑭細粉混勻，充分研磨3小時，即得殼聚糖鑭復合物粉末；(原料7)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鑭復合物的海綿生物敷料。(樣品7)實施例8 —種殼聚糖鑭復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；稱取0. 5g氯化鑭細粉；(3)將殼聚糖細粉與氯化鑭細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖鑭復合物粉末；(原料8)(3)將步驟(2)所得細粉用0.8%的冰醋酸溶液配制成質量濃度為3%的殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物溶液；(4)將步驟(3)所得溶液、魚膠溶液與甘油按一定的體積比混勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鑭復合物的海綿生物敷料。(樣品8)實施例9 一種殼聚糖釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.05g氧化釤細粉;(3)將殼聚糖細粉與氧化釤細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖釤復合物粉末；(原料9)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il,加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_25°C凍18小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖釤復合物的海綿生物敷料。(樣品9)實施例10 —種殼聚糖釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.Ig氧化釤細粉；(3)將殼聚糖細粉與氧化釤細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖釤復合物粉末；(原料10)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥30 小時，既得殼聚糖釤復合物的海綿生物敷料。(樣品10)實施例11 一種殼聚糖釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.25g氧化釤細粉;(3)將殼聚糖細粉與氧化釤細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖釤復合物粉末；(原料11)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖釤復合物的海綿生物敷料。(樣品11)實施例12 —種殼聚糖釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.8g氧化釤細粉；(3)將殼聚糖細粉與氧化釤細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖釤復合物粉末；(原料12)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖釤復合物的海綿生物敷料。(樣品12)實施例13 —種殼聚糖海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(原料13)(2)將(1)所得細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(3)將(2)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖海綿生物敷料。(樣品13)實施例14 一種殼聚糖鈰鑭釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.15g硫酸鈰銨、0. 15g氯化鑭、0. 2g氧化釤細粉；(3)將殼聚糖細粉與以上稀土細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖鈰鑭釤復合物粉末；(原料14)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il,加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鈰鑭釤復合物的海綿生物敷料。(樣品14)實施例15 —種殼聚糖鈰鑭釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.25g硫酸鈰銨、0. 25g氯化鑭、0. 25g氧化釤細粉；(3)將殼聚糖細粉與以上稀土細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖鈰鑭釤復合物粉末；(原料15)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍24小時，置冷凍干燥機中-80°C冷凍干燥M 小時，既得殼聚糖鈰鑭釤復合物的海綿生物敷料。(樣品15)實施例16 —種殼聚糖鈰鑭釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.25g硫酸鈰銨、0. 25g氯化鑭、0. 5g氧化釤細粉；(3)將殼聚糖細粉與以上稀土細粉混勻，充分研磨2小時，即得殼聚糖鈰鑭釤復合物粉末；(原料16)(4)將(3)所得混合物細粉加入1%醋酸水溶液33:3ml，加入甘油7.^il，加入魚膠70ml， 攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得殼聚糖鈰鑭釤復合物的海綿生物敷料。(樣品16)實施例17 —種羧甲基殼聚糖釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg羧甲基殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取Ig氧化釤細粉；(3)將羧甲基殼聚糖細粉與氧化釤細粉混勻，充分研磨2小時，即得羧甲基殼聚糖釤復合物粉末；(4)將(3)所得混合物細粉加入蒸餾水33:3ml，加入甘油7.^iil，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得羧甲基殼聚糖釤復合物的海綿生物敷料。
實施例18 —種羧甲基殼聚糖鑭復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg羧甲基殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.5g氯化鑭細粉；(3)將羧甲基殼聚糖細粉與氯化鑭細粉混勻，充分研磨2小時，即得羧甲基殼聚糖鑭復合物粉末；(4)將(3)所得混合物細粉加入蒸餾水33:3ml，加入甘油7.^iil，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得羧甲基殼聚糖鑭復合物的海綿生物敷料。
實施例19 一種羧甲基殼聚糖鈰復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg羧甲基殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.5g硫酸鈰銨細粉；(3)將羧甲基殼聚糖細粉與硫酸鈰銨細粉混勻，充分研磨2小時，即得羧甲基殼聚糖鈰復合物粉末；(4)將(3)所得混合物細粉加入蒸餾水33:3ml，加入甘油7.^iil，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-60°C冷凍干燥20 小時，既得羧甲基殼聚糖鈰復合物的海綿生物敷料。
實施例20 —種羧甲基殼聚糖鈰鑭釤復合物海綿生物敷料，制備方法步驟如下(1)將IOg羧甲基殼聚糖研磨為細粉；(2)稱取0.25g硫酸鈰銨、0. 25g氯化鑭、0. 5g氧化釤細粉；(3)將羧甲基殼聚糖細粉與以上稀土細粉混勻，充分研磨2小時，即得羧甲基殼聚糖鈰鑭釤復合物粉末；(4)將(3)所得混合物細粉加入蒸餾水33:3ml，加入甘油7.^iil，加入魚膠70ml，攪拌均勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得溶液倒入模具中，_80°C凍M小時，置冷凍干燥機中-50°C冷凍干燥48 小時，既得羧甲基殼聚糖鈰鑭釤復合物的海綿生物敷料。
試驗例一 1.材料與方法1.1藥品與材料殼聚糖(Mr :10-20萬)、羧甲基殼聚糖(Mr :5000)(均購至浙江金殼生物化學有限公司); 魚膠、殼聚糖和羧甲基殼聚糖鈰、殼聚糖和羧甲基殼聚糖鑭、殼聚糖及羧甲基殼聚糖釤、殼聚糖和羧甲基殼聚糖鈰鑭釤均由實驗室自制；MH培養基；沙氏培養基；其余均為國產分析純。
菌種細菌革蘭氏染色陽性菌(G +菌)金黃色葡萄球菌(份aMhcocc^s aureaus) ATCC25 923 革蘭氏染色陰性菌(G_菌)大腸桿菌(fecAeiicAia co7i)ATCC25 922、 綠膿桿 OPseudomorms aeruginosa) klCC21 853、產酸克雷伯 iU(lebsiella oxytoca)、陰溝腸桿鬼(Mnterobacter cloacae)> 腸炎夕少門氏 lif {Salmonella enteritidis)，真菌白色念珠菌、Candida a^ica/ ·^)、光滑念珠菌(TbrWoAsis Wa力raia)、熱帶念珠菌 (Candida tropicalis)、近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)、克柔念珠菌(Candida krusei)。
1. 2 儀器MNL-030-A型真空冷凍干燥機(Stone ridge, New York USA) ;TH2_C型恒溫振蕩器(江蘇太倉市實驗設備廠)；303-1電熱培養箱(江蘇省東臺市電器廠)；DJ-CJ-IN醫用型潔凈工作臺(北東聯哈爾儀器制造有限公司)。
1. 3試驗方法原料粉末的接觸抑菌在無菌條件下，在90mm的培養皿中加等量的固體MH培養基，凝固后加100 μ L菌液，涂布均勻。取一定量的藥品粉末放置在固體培養基上成直徑0. 5cm的圓形，細菌37°C下培養20h，真菌37°C下培養40h，測量抑菌圈大小。
樣品海綿的接觸抑菌在無菌條件下，在90mm的培養皿中加等量的固體MH培養基，凝固后加IOOyL菌液，涂布均勻。將直徑為0.6cm的圓形海綿小餅，放置在培養基上， 細菌37°C下培養20h，真菌37°C下培養40h，測量抑菌圈的大小。
結果與分析2.1原料粉末的接觸抑菌原料粉末的接觸抑菌作用較小，但是樣品與培養基的接觸面均無菌生長。各原料粉末對六種細菌的接觸抑菌抑菌圈直徑見表1。各原料粉末對五種真菌的接觸抑菌抑菌圈直徑見表2。
表1 各原料粉末對六種細菌的接觸抑菌抑菌圈直徑(單位cm ；原料直徑0. 5cm)樣品大腸桿菌金黃色葡萄球菌綠膿桿菌產酸克雷伯菌陰溝腸桿菌腸炎沙門氏菌10. 5960. 6300. 5960. 6360. 6130. 59320. 6390. 6860. 6400. 6720. 6420. 64130. 6990. 7010. 6810. 7200. 6800. 68840. 7310. 7550. 7090. 7720. 7430. 73450. 5760. 5910. 5920. 6120. 5860. 58960. 6090. 6340. 6350. 6690. 6130. 61770. 6540. 6910. 6860. 7100. 6550. 66480. 6960. 7550. 7240. 7330. 7350. 69790. 6010. 6330. 6120. 6320. 5990. 595100. 6360. 6610. 6600. 6600. 6390. 648110. 6560. 6950. 6930. 7350. 6870. 689120. 7430. 7390. 7250. 8350. 7260. 753130. 5610. 5790. 5680. 6060. 5720. 567140. 7230. 7390. 7090. 7340. 7120. 723150. 7530. 7900. 7490. 7440. 7450. 753160. 7730. 8470. 7870. 8420. 8450. 808由上表可知，各原料粉末對六種細菌的接觸抑菌，抑菌圈直徑最大為0. 847cm (樣品16 對金黃色葡萄球菌的接觸抑菌圈)，最小為0. 561cm (樣品13對大腸桿菌的接觸抑菌圈);殼聚糖稀土復合物原料粉末的抑菌效果優于殼聚糖原料粉末；含有不同稀土元素，但殼聚糖與稀土元素比例相同的殼聚糖稀土復合物原料粉末，其抑菌效果差異不大；含有相同稀土元素的殼聚糖稀土復合物原料粉末，隨著其稀土元素所占比例的增大，抑菌效果呈現上升趨勢；鈰、鑭、釤三種稀土復合的殼聚糖稀土復合物原料粉末的抑菌效果優于單一稀土的殼聚糖稀土復合物原料粉末。
表2 各原料粉末對五種真菌的接觸抑菌抑菌圈直徑(單位cm ；原料直徑0. 5cm)樣品白色念珠菌光滑念珠菌熱帶念珠菌近平滑念珠菌克柔念珠菌10. 5980. 6130. 5330. 5740. 55620. 6320. 6120. 5470. 6390. 59430. 6690. 6340. 6200. 6410. 64540. 7970. 7340. 7350. 7420. 76350. 6180. 6070. 5360. 5570. 62560. 6730. 6870. 5540. 5620. 67270. 7910. 7730. 6180. 8280. 75580. 9410. 8790. 8030. 9380. 93890. 5750. 6030. 5520. 5660. 573100. 5660. 5880. 5390. 5670. 579110. 6070. 5960. 5470. 5750. 592120. 6170. 6410. 5580. 5650. 670130. 6040. 6060. 5380. 5670. 564140. 8710. 8910. 8850. 7560. 837151. 0671. 1531. 1230. 871. 027161. 0721. 1851. 2320. 9411. 096由上表可知，各原料粉末對五種真菌的接觸抑菌抑菌圈直徑最大為1.232cm (樣品16對熱帶念珠菌的接觸抑菌圈)，最小為0. 533cm (樣品1對熱帶念珠菌的接觸抑菌圈)；部分殼聚糖與稀土元素比例較高的殼聚糖稀土復合物原料粉末，即殼聚糖鈰粉末(樣品3、樣品 4)、殼聚糖鑭粉末(樣品7、樣品8)、殼聚糖鈰鑭釤粉末(樣品14、樣品15、樣品16)的抑菌效果優于殼聚糖粉末；含有不同稀土元素，殼聚糖與稀土元素比例為100:5時的殼聚糖稀土復合物原料粉末，其抑菌效果殼聚糖鑭>殼聚糖鈰>殼聚糖釤；含有相同稀土元素的殼聚糖稀土復合物原料粉末，其中殼聚糖鈰復合物原料粉末與殼聚糖鑭復合物原料粉末隨著其稀土元素所占比例的增大，抑菌效果呈現上升趨勢；鈰、鑭、釤三種稀土復合的殼聚糖稀土復合物原料粉末的抑菌效果顯著優于單一稀土的殼聚糖稀土復合物原料粉末。
樣品海綿的接觸抑菌所有樣品海綿均有較好的接觸抑菌作用，樣品與培養基的接觸面均無菌生長。各樣品海綿對六種細菌的接觸抑菌抑菌圈直徑見表3。各樣品海綿對五種真菌的接觸抑菌抑菌圈直徑見表4。
表3 各樣品海綿對六種細菌的接觸抑菌抑菌圈直徑(單位cm ；樣品直徑0. 6cm)
權利要求
1.含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿，其特征在于，組分中含有殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物、甘油、膠原類物質和冰醋酸，吸濕性100 221%，保濕性80 96%,吸水性433 785%,吸透性33% 47%。
2.根據權利要求1所述的生物海綿，其特征在于，所述的膠原類物質為明膠或魚膠。
3.根據權利要求1所述的生物海綿，其特征在于，所述殼聚糖衍生物為羥丙基殼聚糖、 羥丙基甲殼素、羧甲基殼聚糖、羧甲基甲殼素、琥珀酰殼聚糖、琥珀酰甲殼素中的一種或數種。
4.根據權利要求1-3任一所述的生物海綿的制備方法，其特征在于，步驟如下(1)將殼聚糖和/或殼聚糖衍生物研磨為細粉；(2)按照殼聚糖和/或殼聚糖衍生物與稀土化合物的重量比例1000. 5 10，將步驟 (1)所得細粉與稀土化合物細粉混勻，充分快速研磨1 3小時，即得殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物；(3)將步驟(2)所得細粉用0.5-1. 2%的冰醋酸溶液配制成質量濃度為1-4%的殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物溶液；(4)將步驟(3)所得溶液、魚膠溶液與甘油按一定的體積比混勻，抽真空脫氣；(5)將(4)所得混合液置模具內，-20°C _80°C冷凍15 M小時后，置冷凍干燥機中-50°C -80°C冷凍真空干燥M 48小時，即得含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿。
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述稀土化合物為氯化鑭、硫酸鈰銨、氧化釤中的一種或幾種。
6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，冰醋酸溶液的質量濃度為0.8-1. 0%， 優選1. 0%。
7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)所得殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物溶液的質量濃度為2-3. 5%，優選為3. 0%。
8.根據權利要求1-3任一所述的生物海綿在醫用敷料中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種含殼聚糖和/或其衍生物稀土復合物的生物海綿，其稀土元素分布均勻，具有良好的吸濕、保濕、吸水、透氣性，并具有較好的接觸抑菌作用，抗菌譜廣。具有預防創面感染、促進創面修復、潰瘍愈合等功能。
文檔編號A61L15/42GK102492183SQ20111040209
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月7日 優先權日2011年12月7日
發明者桑青, 肖慶振, 陳曉霞 申請人:聊城大學