專利名稱：：左旋氧氟沙星類似物的合成及其用途的制作方法
技術領域：
：本發明涉及左旋氧氟沙星及其類似物的化學合成以及它們的生物活性，更具體地說是左旋氧氟沙星的制備方法及左旋氧氟沙星類似物的制備和用途。氟喹諾酮化合物以其高效、廣譜、低毒的抗菌特性，在臨床抗感染治療方面取得了巨大成功，日本第一制藥公司開發的左旋氧氟沙星(I)就是一個例子。該藥物抗菌譜廣，毒性低。它的抗菌活性為氧氟沙星的兩倍，水溶性增大10倍，但其合成路線十分復雜EP309789(1989)左旋氧氟沙星的合成主要有以下幾種方法1.拆分法包括高壓液相析分EP206283(1986)和酶法析分(K.Sakano，AgniaBiol.Chem.1987，51，1265)。該法不宜大規模制備。2.以(S)-2-氨基丙醇為手性起始原料，由四氟苯甲酸開始經7步反應制得左旋氧氟沙星U.S.P.4777253，(1988)，該法比拆分法更適于工業生產，但起始原料四氟苯甲酸及(S)-2-氨基丙醇不易獲得。3.從三氟硝基苯和(R)-1，2-丙二醇及2-羥基保護的衍生物為原料，經多步反應制得EP368410(1990)，EP273399(1988)。該方法同樣存在手性原料不易獲得的問題。不具實際意義。4.生物轉化的方法，此方法較為復雜。(TetrahedronLetters，1996，9317.)可以看出，以上方法對于工業化大規模生產高光學純度左旋氧氟沙星均存在各種各樣的限制，給工業化生產帶來一定的困難。本發明的一個目的是尋找出能工業化生產左旋氧氟沙星的方法。本發明的另一個目的是對左旋氧氟沙星進行結構改造，以發現效果更佳的新藥物。本發明左旋氧氟沙星衍生物可用下列通式表示其中R7為R1＝H，C1-C5的烷基；m＝1，2R2＝H，C1-C5的烷基R3＝C1-C5的直鏈或支鏈烷基，CH2PhR4＝H，C1-C5的烷基，吡啶，嘧啶，CO(CH2)nXX＝鹵素，n＝1，2R5＝H，NH2R6＝烷基或取代苯基本發明左旋氧氟沙星及其衍生物可由D-甘露醇為原料主要通過下列步驟制得a.三氟硝基苯在相轉移催化條件下與(S)-4縮合得縮合物(S)-5；b.(S)-5脫去保護基得(R)-6，(R)-6用醋酸-氫溴酸進行溴乙酰化得(R)-7和(S)-7；c.(R)-7和(S)-7在甲醇鈉甲醇溶液中環化得環化物(R)-8；d.(R)-8用鈀/碳還原，還原物與EMME縮合得縮合物(R)-10，(R)-10經環化，酸水解得關鍵中間體(S)-13；e.(S)-13與HR7在適當的無水溶劑中縮合得7-位被取代的上述左旋氧氟沙星及其衍生物；f.(S)-13在5-位引入氨得23，23與HR7在適當的溶劑中縮合得5-胺基取代的上述左旋氧氟沙星衍生物。g.烷基氨基氯甲酸酯，烷基或取代苯基磺酰氯，α-鹵代乙酰氯和7-位有仲氮結構的左旋氧氟沙星衍生物縮合，得化合物29-60。本發明左旋氧氟沙星及其衍生物的制造方法具有手性起始原料豐富易得，反應條件溫和，總收率高，光學純度高，制造成本低廉等優點。總之本專利的方法較之文獻方法更適合于工業化生產。本發明更詳細地通過以下反應步驟實施a.KOH/K2CO3/甲苯b.HCl/CH3COCH3c.HBr/ACOHd.KOH/H2Oe.Pd/C/H2f.EMME/加熱g.Ph3P/DAD/THFh.PPE/加熱i.ACOH/HCl加熱在路易斯酸如無水氯化鋅，無水氯化鋁等催化下D-甘露醇經丙酮保護后，用高碘酸鈉在極性非質子溶劑如二氯甲烷，三氯甲烷或醇類溶劑如甲醇，乙醇等中氧化，再用負氫離子還原劑如鉀硼氫，鈉硼氫等還原得手性化合物(S)-4。三氟硝基苯在非質子溶劑中如甲苯，苯，鹵代烴等，相轉移催化條件下與(S)-縮合得(S)-5，酸催化脫掉保護基后，用醋酸-氫溴酸溴乙酰化，采用無機堿如氫氧化鈉，氫氧化鉀或有機堿如甲醇等環化得(R)-8，(R)-8用Pd/C或鉑/碳在醇類溶劑中催化還原，然后與乙氧甲叉丙二酸二乙酯縮合得(R)-10，(R)-10經環化酸水解得關鍵中間體(S)-13。(S)-13與甲基哌嗪及其衍生物反應得左旋氧氟沙星及其衍生物。7-位取代基對喹諾酮類化合物的抗菌活性有很大影響，它與藥物對細菌細胞膜的滲透能力及對DNA親合力有關，所以改變7-位取代基可能出現抗菌性能更理想的藥物，故以(S)-13與HR7在無水非質子極性溶劑如吡啶，二甲基甲酰胺，二甲基亞砜等中縮合得7-位被取代的左旋氧氟沙星類似物14-21。其中R7為R1＝H，C1-C5的烷基；R2＝H，C1-C5的烷基；R3＝C1-C5的直鏈或支鏈烷基，CH2Ph，CH2X，X為鹵素R4＝H，C1-C5的烷基或取代氨基，吡啶，嘧啶，CO(CH2)nXX＝鹵素，n＝1，2R6＝烷基或取代苯基m＝1，2通常喹諾酮5-位引入取代基可改變喹諾酮的生物活性。引入氨基的方法是在(S)-13的5-位用硝酸鹽-濃硫酸硝化，硝酸鹽可用鉀鹽及鈉鹽等。然后催化還原，催化劑可用阮內(Raney)鎳，鈀/碳，鉑/碳等。再與HR7在無水非質子極性溶劑如吡啶，二甲基甲酰胺，二甲基亞砜等縮合得5-氨基取代的左旋氧氟沙星的衍生物24-28。7-位烷氧羰基取代喹諾酮的合成comp.29-487-位磺酰基取代喹諾酮的合成comp.49-54喹諾酮-烷化劑衍生物的合成本發明涉及的化合物結構式見表1。表1化合物1，14-60結構式注1、15、16為參考化合物。生物活性測定1.抗菌活性測定抗菌活性的測定采用由世界衛生組織推薦的對一般細菌最適宜的Mueller-Hinto(M-H)肉湯培養基，加入1.6％瓊脂粉，作為藥物稀釋的基質。實驗菌在M-H肉湯培養基中過夜培養并稀釋使接種量控制為5×103-5×104CFU，藥物濃度采用連續倍數稀釋法，加入到50-60℃的培養基中混合均勻后制備雙碟培養皿，最高濃度12.5μg/ml，最低濃度0.025，因各種樣品溶解性能不同，為方便比較以DMF、乙醇作為助溶劑，用無菌生理鹽水稀釋，最終助溶劑濃度DMF≤5.0％，乙醇≤2.5％，經空白對照不影響各試驗菌生長。試驗菌懸液用多頭接種儀接種于上述含各種化合物及不同濃度的培養皿中。將培養皿在35-37℃培養16-18小時，肉眼觀察實驗結果，繼續培養至42-44小時，再觀察其結果。抑制試驗細菌生長的最低濃度為最低抑菌濃度(MIC)，左旋氧氟沙星衍生物的體外抗菌活性(MIC，μg/ml)見表2。表2目標化合物和參考化合物的抗菌活性(MICμg/ml)**ND表示沒有測定該化合物的MIC值2.抗腫瘤活性測定Microculturetetrozolium(MTT)代謝法微量培養四氮試驗將一定量的癌細胞接種到96孔培養板內，用含10％小牛血清的RPMI-1640培養液稀釋至90μl，每孔加入10μl藥液，最終濃度分別為10-4、10-5、10-6Mol/ml，每組3個復孔。37℃，5％CO2條件下培養72小時。加入20μl/孔MTT(5mg/ml)液，于37℃，5％CO2培養箱中培養4-5小時后，加入100μl/孔三聯液(SDS-異丁醇-鹽酸)。然后在CO2培養箱中過夜。用酶標儀中測定其OD值，與對照組相比，計算出抑制腫瘤生長率(％)。見表3。表3部分化合物抑瘤率％(110r、10r、1r3.抗支原體活性測定抗支原體活性測定采用常規方法。培養基組成如下1∶1牛心消化液，0.5％氯化鈉，0.15％磷酸二氫鉀，10％自制新鮮酵母浸出液，0.002酚紅，10％小牛血清。UU4添加0.1％尿素，pH＝6.0±0.5。Mh、Mo、Ms添加0.1％精氨酸，pH＝6.8～7.0。Mg、Mp添加1％的葡萄糖血清增到15％，pH＝7.6～7.8。螺原體添加10％蔗糖，pH＝7.2～7.4。最低抑制支原體藥物濃度MIC(μg/ml)采用連續倍數稀釋法測定。MIC測定值見表4。表4部分化合物抗支原體*活性MIC(μg/ml</tables>*UU4-解脲脲原體；Mh-人型支原體；Mo-口腔支原體；Ms-唾液支原體；Mp-肺炎支原體；Mg-生殖支原體；Sc-柑枯僵化病螺原體；CH-1-蜜蜂螺原體；CR-1-油菜花螺原體。下面進一步用實施例說明本發明，它不限制本發明。核磁共振譜在我所分析室BrukerAM-400及AC-100上測定，質譜在MAT-95型質譜儀上進行。元素分析由中科院上海有機化學研究所分析室完成。熔點儀型號為BUeHI510型，溫度計未經校正。柱層析用硅膠，未加說明均為200-300目，青島海洋化工廠生產。最佳實施例實驗11，2，5，6-二縮丙酮-D-甘露醇D-2將無水氯化鋅22.9g(0.167mol)在機械攪拌下加到132毫升干燥丙酮中，降溫到15℃以下，加入D-甘露醇11.5g。在20℃攪拌反應13hr，于0℃放置過夜，過濾，濾液攪拌5min.，將溶有23gK2CO3的23ml水溶液在劇烈攪拌下一次傾入反應混合物中，立刻有大量白色沉淀生成，繼續攪拌30min，過濾，濾渣用氯仿洗(3×25ml)。濾液中加入氨水堿化，蒸去丙酮及水，得白色固體，四氯化碳重結晶，得針狀晶體D-2(9.0g)。收率58.0％。mp120℃。實驗2(S)-1，2-縮丙酮甘油(S)-47.0gD-2溶于7mlpH＝6的磷酸緩沖液和40mlTHF的混合溶液中，攪拌下于20-25℃分批加入6.8gNaIO4。很快產生大量白色沉淀，1hr小時后用5N的NaOH調節到pH＝8。過濾，濾渣用氯仿洗二次。蒸掉THF，加入50ml甲醇，冷卻到10℃以下，過濾，濾液用1.6gKBH4還原，分批加入，使溫度不超過10℃。加完后，冰浴中反應30min.，室溫反應1hr后過濾，蒸去甲醇，加入20ml水，用氯仿萃取。氯仿干燥，脫去溶劑，減壓蒸餾得4.2g(S)-4。96-98℃/25mmHg。收率60.8％。實驗3(S)-3，4-二氟-2-(1，2-縮丙酮丙基氧)硝基苯(S)-50.44g(S)-4溶解在2ml甲苯中，慢慢滴加到冰浴冷卻的含有0.56gKOH，0.45gK2CO3，0.53g三氟硝基苯的10ml甲苯混合物中，加入四正丁基氯化銨20mg，冰冷下攪拌0.5hr，室溫攪拌1hr，TLC(RAC/石油醚＝1∶5)檢測反應終點。反應畢，加入10ml水，分出甲苯，水相以甲苯萃取(2×20ml)，合并甲苯相，干燥，蒸去甲苯，得(S)-50.86g，收率100％。[α]D20＝-7.36。MSm/e＝274(M+-15)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.42-1.46(6H，m)，3.20-4.40(5H，m)，7.00(1H，m)，7.62(1H，m)。實驗4(S)-3，4-二氟-2-(1，2-二羥基丙基氧)硝基苯(R)-62.60g(S)-5溶解在10ml丙酮中，加7ml1N鹽酸，在60℃水解反應1hr。蒸去丙酮，殘留物用氯仿萃取(5×20ml)，干燥、濃縮，得(R)-6(2.25g)，收率100％。[α]D20＝13.34。1H-NMR(CDCl3)δppm3.68-3.88(2H，2×m，J＝5)，4.12(1H，b)，4，28-4.47(2H，m，2×m，J＝6)，7.05(1H，m，J＝8)，7.05(1H，m，J＝2)。實驗5(S)-3，4-二氟-2-(1-溴-2-乙酰氧基丙基氧)硝基苯和(R)-3，4-二氟-2-(1-乙酰氧基-2-溴)硝基苯(S)-7和(R)-71.91g(97.67mmol)(R)-6和4.68g醋酸-氫溴酸在冰浴冷卻下攪拌5min.，在室溫繼續反應30-40min.，。加入5ml水，用5N的NaOH調節到pH＝7，乙醚萃取(3×20ml)，乙醚溶液干燥，蒸去乙醚，得(S)-7和(R)-7(2.70g)，收率100％。MSm/e＝274(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm2.12(3H，s)，3.55-3.75(2H，m，2×m，J＝6Hz)，4.50(2H，m)，5.30(1H，m)，7.05(1H，m，J＝8Hz)，7.70(1H，m，J＝2Hz)。實驗6(R)-3，4-二氟-2-(1，2-環氧丙基氧)硝基苯(R)-81.60g(S)-7和(R)-7用3N的KOH溶液10ml環化，在0-40℃攪拌10min，反應混合物用乙醚稀釋，醚層水洗，干燥，脫去溶劑，得(R)-8，收率100％。[α]D20＝11.93(0.0237，CDCl3)。MSm/e＝231(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm2.65-2.90(2H，m，2×m，J＝4Hz)，3.40(1H，b)，4.15-4.48(2H，m，2×m，J＝6Hz)，5.30(1H，m)，7.02(1H，m，J＝8Hz)，6.78(1H，m，J＝3Hz)。實驗7(R)-3，4-二氟-2-(2-羥基丙基氧)苯胺(R)-91.00(R)-8溶解于60ml無水乙醇中，加入10％的Pd/C0.48g，在常壓常溫下氫化3.5hr，過濾掉催化劑。蒸去乙醇得(R)-9，收率100％。不用純化直接用于下一步反應。實驗8(R)-3，4-二氟-2-(2-羥基丙基氧)-1-(2，2-二乙氧羰基乙烯基氨基)苯(R)-100.76g(R)-9和0.82gEMME在140-145℃反應1.5hr，然后減壓抽掉生成乙醇，繼續反應0.5hr，冷卻，用石油醚/乙酸乙酯＝1∶4重結晶得(R)-10，收率95％。MSm/e＝375(M+)。mp52-54℃。1H-NMR(CDCl3)δppm1.22-1.45(9H，m)，3.45(1H，d，J＝4.0Hz)，3.88-4.43(7H，m)，6.78-7.08(2H，m)，8.48(1H，d，J＝14Hz)。實驗9(S)-二乙基-(7，8-二氟-3-甲基-3，4-二氫-2H-[1，4]苯并噁嗪-4)亞甲基丙二酸酯(S)-110.67gDAD和0.78gPh3P溶于12ml無水THF中，于0℃攪拌20min.，0.79g(R)-10溶解在2ml無水THF中，慢慢滴加到上述混合物中，加完后室溫攪拌過夜。蒸掉溶劑，殘留物柱層析，洗脫劑RAC/石油醚＝1∶3，得(S)-11，收率90％。1H-NMR(CDCl3)δppm1.20-1.24(9H，m)，3.90-4.40(7H，m)，6.71-6.78(2H，m)，7.76(1H，s)。實驗10乙基(S)-(-)-9，10-二氟-2，3-二氫-3-甲基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酯酯(S)-121.33(S)-11和5gPPE在140-145℃反應1.5hr，減壓下繼續反應0.5hr冷卻到室溫，傾入冰水中，用氯仿萃取(3×30ml)，氯仿用5％碳酸鈉溶液洗(3×20ml)，水冼(1×20ml)，干燥，趕盡溶劑，固體物質用乙醇洗到灰白得(S)-12，收率85％。不須進一步純化，直接用于下步反實驗11(S)-(-)-9，10-二氟-2，3-二氫-3-甲基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸(S)-130.73g(S)-12與濃鹽酸2.27ml，冰醋酸8.7ml回流3hr，冷卻，有無色針狀晶體析出，過濾，沉淀依次用水，乙醇，乙醚洗，干燥，得(S)-13(0.56g)，收率98％。mp＞300℃。[α]D20＝-64.7(0.01，DMSO)。MSm/e＝281(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.85(3H，d，2×m，J＝7Hz)，4.60-4.48(2H，2×m)，5.25(1H，m)，7.87(1H，d)，9.40(1H，s)。實驗12(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-甲基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸(I)Levoflloxacin。84.3mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，加入0.13mlN-甲基哌嗪，反應混合物在120℃回流攪拌20hr，冷卻，趕盡吡啶，加入10ml氯仿和5ml乙醚溶解殘留物，混合液用水洗，干燥，除去氯仿，殘留物乙醇重結晶，得左旋氧氟沙星(80mg)，收率80％。mp238-240℃。[α]D20＝-77.9℃(c＝0.2，0.05NNaOH)。MSm/e361(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.45(3H，d，J＝7Hz)，2.30(3H，s)，2.50(4H，m)，3.30(4H，m)，4.35-4.58(2H，dd，J＝7Hz)，4.90(1H，d，J＝6Hz)，7.58(1H，m，J＝13Hz)，8.89(1H，s)。實驗13(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-氨基甲基哌啶基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸14112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入4-氨基甲基哌啶68.5mg。反應混合物在120-130℃回流過夜，蒸盡吡啶，殘留物加入乙醇溶解，減壓蒸盡乙醇，膊D留物加入丙酮，過濾掉不溶物，蒸掉部分丙酮，放置結晶，得120mg產物，收率80％。mp175-178℃。MSm/e＝375(M+)。1H-NMR(DMSO-D6)δppm1.05-1.55(5H，m)，1.45(3H，d，J＝7Hz)，2.45(2H，d)，2.95-3.30(4H，m)，4.32-4.55(2H，dd)，4.88(H，d)，7.60(1H，d，)，8.80(1H，s)。實驗14(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸15448mg(S)-13溶解在10ml吡啶中，在攪拌下加入208mg哌嗪。反應混合物在120-130℃回流過夜，蒸盡吡啶，殘留物加入乙醇溶解，減壓蒸盡乙醇，殘留物用乙醇重結晶，得360mg產物，收率65％。mp＞250℃。MSm/e＝347(M+)。1H-NMR(DMSO-D6)δppm1.48(3H，d，J＝7Hz)，2.50(4H，m)，3.32(4H，m)，4.38-4.60(2H，dd)，4.92(H，d，J＝7Hz)，7.58(1H，d，)，8.89(1H，s)。實驗15(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸16112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入60mg2-甲基哌嗪。反應操作同實驗14。殘留物丙酮-水重結晶，得產物57.2mg，收率40％。mp225-228℃。MSm/e＝361(M+)。1H-NMR(DMSO-D6)δppm1.00(3H，d，J＝6Hz)，1.48(3H，d，J＝6Hz)，2.50(3H，m)，3.30(4H，m)，4.53-4.60(2H，dd)，4.92(H，d，J＝7Hz)，7.60(1H，d，)，8.89(1H，s)。實驗16(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-(2-氨基乙基)哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸17112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入103mg1-(2-氨基乙基)哌嗪。反應操作同實驗14。殘留物加水析出白色固體，過濾，水重結晶，得產物80mg，收率51％。mp203-228℃。MSm/e＝390(M+)。1H-NMR(DMSO-D6)δppm1.48(3H，d，J＝6Hz)，2.32-2.27(8H，m)，3.35(4H，m)，4.35-4.55(2H，dd)，7.60(1H，d，J＝13Hz)，8.89(1H，s)。實驗17(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-(2-吡啶基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸18112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入260mg1-(2-吡啶基)哌嗪。反應操作同實驗14。乙醇重結晶得18，收率41.3％。mp245-247℃。MSm/e＝424(M+)。1H-NMR(CDCl3)δpmm1.68(3H，d，J＝6Hz)，3.45(4H，m)，3.90(4H，m)，4.30～4.52(3H，m)，6.80(2H，m)，7.31(1H，d)，8.76(1H，m)，8.30(1H，d)，8.65(1H，s)。實驗18(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-(2-嘧啶哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸19112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入264mg1-(2-嘧啶基)哌嗪。反應操作同實驗14。氯仿-丙酮重結晶，得產物85mg，收率50％。mp290-292℃。MSm/e＝425(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.48(3H，d，J＝6Hz)，3.25(4H)，3.90(4H，m)，4.40～4.62(2H，m，)，4.95(H，d)，6.71(1H，d)，7.61(1H，d，J＝11Hz)，8.40(2H，d)，9.00(1H，s)。實驗19(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3，5-二甲基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸2084.1mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入60mg3，5-二甲基哌嗪。反應操作同實驗14。殘留物乙醇-丙酮重結晶，得產物30mg，收率27％。mp240-243℃。MSm/e＝375(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm2.20(6H，d)，2.50(3H，d)，4.28(3H，m)，4.58(4H，m)，5.31～5.48(2H，dd)，5.78(H，d)，8.72(1H，d)，9.95(1H，s)。實驗20(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-高哌嗪基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸21112mg(S)-13溶解在5ml吡啶中，在攪拌下加入60mg高哌嗪。反應操作同實驗14。DMF-乙醇重結晶，得82mg產物，收率57％。mp＞280℃。MSm/e＝347(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.70(3H，d)，2.53(2H，m)，3.60-.4.00(8H，m)，4.50-4.72(2H，dd)，5.50(1H，d)，7.95(1H，d)，9.18(1H，s)。實驗21(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-硝基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸22200mg(S)-13溶解在4ml濃硫酸中，在內溫低于5℃時加入400mgKNO3，加畢反應30min，在室溫反應1hr。反應混合物倒入冰水中，析出物過濾，水洗，干燥，用氯仿-乙醇重結晶得0.21mg產物，收率91％。實驗22(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸230.22g22和180mg乙醇及20mgPd/C(10％)，在常壓下氫化3hr。反應畢，加熱使其溶解，趁熱過濾掉催化劑，稍冷析出沉淀。除去乙醇，得產物0.14g，收率78％。mp＞280℃。MSm/e＝296(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.48(3H，d，J＝7Hz)，4.25-4.51(2H，dd)，4.81(1H，d)，8.98(1H，s)。實驗23(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-甲基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸24100mg23和40mgN-甲基哌嗪溶解在5ml吡啶中。反應操作同實驗14。DMF-乙醇重結晶，得產物70mg，收率55％。mp＞260℃分解。MSm/e376(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.61(3H，d)，3.05(3H，s)，3.28-3.78(8H，m)，4.40-4.60(2H，dd)，4.78(1H，d)，8.98(1H，s)。實驗24(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-哌嗪基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸25100mg23和117mg無水哌嗪反應，反應操作同實驗14。得65mg產物，收率53％。mp215℃分解。MSm/e＝362(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.75(3H，d)，3.60-4.00(8H，m)，4.48-4.72(2H，dd)，4.90(1H，d)，8.45(1H，s)。實驗25(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸26100mg23和136mg2-甲基哌嗪反應，反應操作同實驗14。水重結晶得50mg產物，收率39％。mp215℃分解。MSm/e＝376(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.85(3H，d)，2.00(3H，d)，3.80～4.20(7H，m)，4.48～4.72(2H，dd)，4.90(1H，d)，8.45(1H，s)。實驗26(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-氨基-10-(4-(2-氨基乙基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸27100mg23和176mg1-(2-氨基乙基)哌嗪反應，反應操作同實驗14。用鹽酸酸化到pH＝1，放置，過濾，丙酮-水重結晶得40mg27，收率27％。mp236-237℃。MSm/e405(M+)。1H-NMR(D2O)δppm1.56(3H，d)，3.50-4.00(12H，m)，4.28-4.45(2H，dd)，4.65(1H，d)，8.50(1H，s)。實驗27(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-高哌嗪基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸28120mg23和85mg高哌嗪反應，操作實驗14。DMF-乙醇重結晶得100mg28，收率66％。mp＞230℃分解。MSm/e376(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.65(3H，d)，2.30(2H，m)，3.50-3.80(8H，m)，4.38-4.62(2H，dd)，4.80(1H，d)，7.00(1H，s)。實驗28(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-乙氧基羰基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸29和15等摩爾的苯甲酸溶解在20ml無水四氫呋喃中，冷卻到-15℃，加入三乙胺42μl，再加14μl氯甲酸乙酯，在-15℃反應1hr后，加入52mg15，繼續反應30min.，TLC檢測反應終點。反應畢，用1N鹽酸酸化到pH＝3-4，蒸掉THE，殘余物用氯仿萃取，干燥，除去溶劑，固體用乙酸乙酯重結晶得30mg29，收率48％。mp235-237℃。MSm/e419(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.3(3H，m，J＝7Hz)，1.58(3H，d)，3.35(4H，m)，3.65(4H，m)，4.18(2H，m)，4.35-4.51(3H，d)，7.75(1H，d，J＝13Hz)，8.62(1H，s)。實驗29(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基-4-乙氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3040mg16懸浮于15ml鈉干四氫呋喃中，加入0.032ml三乙胺，在冰冷下滴加0.011ml氯甲酸乙酯的5mlTHF溶液，加完后攪拌2-3hr，然后在室溫反應2-3hr，TLC檢測反應終點。反應完，用1N鹽酸調到酸性(pH＝3-4)，蒸掉THF，殘留物柱層(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝25∶1)。得30mg30，收率63％。mp252-253℃。MSm/e＝433(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.35(6H，m，)，1.65(3H，d)，3.15-3.55(7H，m)，4.0(1H，m)，4.18(2H，m)，4.40(2H，m)，7.70(1H，d，J＝12Hz)，8.62(1H，s)。實驗30(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-異丁氧羰基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3150mg15(0.144mmol)溶解在碳酸氫鈉飽和溶液中，冷卻到0℃滴加38μl氯甲酸異丁酯的2ml乙二醇二甲醚溶液，加完繼續反應1hr，在18-20℃反應2hr。酸化到pH＝3-4，過濾，沉淀干燥，甲醇重結晶得25mg31，收率39％。mp252-253℃。MSm/e＝447(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm0.95(6H，2×s，)，1.59(3H，d，J＝6Hz)，1.95(1H，m)，3.35(4H，m)，3.60(4H，m)，3.89(2H，d，J＝2Hz)，4.40-4.51(3H，m)，7.75(1H，d，J＝12Hz)，8.65(1H，s)。實驗31(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-甲基氧羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3260mg(0.173mmol)15懸浮于15ml鈉干四氫呋喃中，加入0.048ml三乙胺，在冰冷下滴加0.027ml(0.35mmol)氯甲酸甲酯的5mlTHF溶液。操作同實驗29。殘留物柱層析，洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1。得20mg32，收率29％。mp237-239℃。MSm/e405(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.65(3H，d，J＝6Hz)，3.30(4H，m)，3.60(4H，m)，3.70(3H，s)，4.40-4.60(3H，m)，7.70(1H，d，J＝12Hz)，8.65(1H，s)。實驗32(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-異丁氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3350mg25(0,138mmol)和等摩爾的氯甲酸異丁酯反應，操作同實驗30，柱層析(洗脫劑乙酸己酯/石油醚＝1.5∶1)。得產物25mg，收率39％。mp260-262℃。MSm/e462(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm0.95(6H，2×s，)，1.55(3H，d，J＝6Hz)，1.98(1H，m)，3.32(4H，m)，3.65(4H，m)，3.90(2H，d，J＝2Hz)，4.18-4.35(3H，m)，8.45(1H，s)。實驗33(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-乙氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3450mg25(0,138mmol)和0.026ml氯甲酸乙酯反應，操作同實驗30。乙醇重結晶，得35mg產物，收率61％。mp281-282℃。MSm/e＝434(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.36(3H，m，J＝8Hz)，1.60(3H，d，J＝6Hz)，3.30(4H，m)，3.50(4H，m)，4.20(2H，m)，4.35-4.50(3H，m)，8.45(1H，s)。實驗34(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基-4-乙氧羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3550mg26(0.138mmol)和0.026ml氯甲酸乙酯反應，操作同實驗30。乙醇重結晶，得30mg。收率50％。mp240-242℃。MSm/e448(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.30(3H，m)，1.48(3H，d)，3.15-3.45(7H，m)，3.95(2H，m)，4.05-4.40(3H，m)，8.40(1H，s)。實驗35(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基-4-異丁基氧羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3650mg26(0,133mmol)和0.038ml氯甲酸異丁酯反應，操作同實驗30，柱層析(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝30∶1)。得產物43mg，收率68％。mp224-226℃。MSm/e476(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm0.95(6H，2×s，)，1.35(3H，m)，1.95(1H，m)，3.15-3.50(7H，m)，3.95(2H，m)，4.40(3H，m)，8.50(1H，s)。實驗36(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基-4-異丁基氧羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3750mg26(0,138mmol)和0.036ml氯甲酸異丁酯反應，操作同實驗30。乙醇重結晶得40mg37，收率63％。mp205-206℃。MSm/e461(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm0.98(6H，2×s)，1.45(3H，m)，1.53(3H，d)，1.95(1H，m)，3.15-3.50(7H，m)，3.90(2H，m)，4.35-4.55(3H，m)，7.65(1H，d，12)，8.60(1H，s)。實驗37(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-甲氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3850mg25(0,138mmol)和0.021ml(0.27mmol)氯甲酸甲酯及0.038ml三乙胺反應，操作同實驗29。洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1。得15mg38，收率26％。mp286-288℃。MSm/e420(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.45(3H，m)，3.28(4H，m)，3.50(4H，m)，3.75(3H，s)，4.15-4.40(3H，m)，8.45(1H，s)。實驗38(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基4-甲氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3950mg16(0.138mmol)和0.021ml(0.27mmol)氯甲酸甲酯及0.038ml三乙胺反應，操作同實驗29。展開劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1。得20mg產物，收率35％。mp195-198℃。MSm/e419(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.30(3H，m)，1.68(3H，d)，3.10-3.45(7H，m)，3.65(3H，m)，4.30-4.55(3H，m)，7.70(1H，d，J＝12Hz)，8.65(1H，s)。實驗39(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基-4-甲氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4050mg26(0,133mmol)和0.021ml(0.27mmol)氯甲酸甲酯及0.038ml三乙胺反應，操作同實驗29。洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1。得產物25mg，收率43％。mp＞280℃分解。MSm/e434(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.28(3H，m)，1.55(3H，d)，3.10-3.50(7H，m)，3.75(3H，m)，4.10-4.45(3H，m)，8.49(1H，s)。實驗40(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-三氯乙基氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4150mg15(0.144mmol)和0.020ml(0.15mmol)氯甲酸三氯乙酯及0.038ml三乙胺反應，操作同實驗29。展開劑二氯甲烷/甲醇＝30∶1。得37mg41，收率49％。mp238-240℃分解。MSm/e521(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.51(3H，d)，3.35(4H，m)，3.60(4H，m)，4.30-4.55(3H，m)，4.95(2H，s)，7.72(1H，d)，8.65(1H，s)。實驗41(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-三氯乙氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4250mg25(0.138mmol)和0.020ml(0.15mmol)氯甲酸三氯乙酯及0.020ml三乙胺反應，操作同實驗29。洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝30∶1。得23mg42，收率31％。mp＞260℃分解。MSm/e536(M+)。1H-NMR(CDCl3)5ppm1.55(3H，d，J＝6Hz)，3.35(4H，m)，3.70(4H，m)，4.15-4.20(2H，dd)，4.40(1H，d)，4.80(2H，s)，8.45(1H，s)。實驗42(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-乙氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4350mg21和0.025ml氯甲酸乙酯反應，操作同實驗30。洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝10∶1。得40mg43，收率67％。mp203-205℃分解。MSm/e433(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.28(3H，m)，1.65(3H，d)，2.10(1H，m)，3.45(4H，m)，3.65(4H，m)，4.25(2H，m)，4.30-4.45(2H，dd)，4.52(1H，d)，7.70(1H，d)，8.65(1H，s)。實驗43(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-甲氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4450mg21(0.138mmol)用4mlDMF加熱溶解，冷卻后加入0.048ml三乙胺，然后用針筒加入0.022ml氯甲酸甲酯，冷卻下反應30min.，然后室溫反應3hr，壓減抽凈DMF，殘留物二氯甲烷用溶解。柱層析(二氯甲烷-甲醇＝30∶1)，得40mg44，收率77％。mp210-211℃分解。MSm/e419(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.65(3H，d)，1.95(2H，d)，3.25-3.65(8H，m)，3.70(3H，s)，4.30-4.45(3H，m)，7.65(1H，d)，8.65(1H，s)。實驗44(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-三氯乙氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4550mg21(0.138mmol)用4mlDMF加熱溶解，冷卻后加入0.048ml三乙胺，用針筒加入0.022ml氯甲酸三氯乙酯，冷卻下反應30min.。然后室溫反應3hr，油泵壓減抽凈DMF，殘留物二氯甲烷用溶解。柱層析(二氯甲烷-甲醇＝20；1)。得20mg產物，收率27％。mp215-217℃。MSm/e535(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.65(3H，d)，2.05(2H，d)，3.45(4H，m)，3.75(4H，m)，4.30-4.55(3H，m)，4.78(2H，s)，7.65(1H，d)，8.61(1H，s)。實驗45(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-乙氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4640mg28(0.106mmo1)，0.036ml三乙胺，0.019ml氯甲酸乙酯反應，操作同實驗30。柱層析(洗脫劑氯仿-甲醇＝30∶1)，然后乙醇重結晶，得25mg2產物，收率53％。mp240-241℃。MSm/e448(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.25(3H，d)，1.62(3H，d)，2.05(2H，d)，3.45(4H，m)，3.65(4H，m)，4.20(2H，m)，4.30(1H，m)，8.35(1H，s)。實驗46(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-三氯乙氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4740mg28(0.106mmol)，0.020ml三乙胺，0.011mmol氯甲酸三乙酯反應，操作同實驗30。柱層析(洗脫劑，氯仿-甲醇＝30∶1)，然后乙醇-氯仿重結晶，得35mg產品。收率60％。mp＞280℃分解。MSm/e551(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.55(3H，d，J＝6Hz)，2.00(1H，m)，3.50(4H，m)，3.70(4H，m)，4.15-4.30(2H，dd)，4.35(1H，d)，4.80(2H，s)，8.45(1H，s)。實驗47(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-芐氧羰基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4840mg15(0.115mmol)和0.024ml氯甲酸芐酯(0.12mmol)及0.035ml三乙胺反應，操作同實驗29。柱層析(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝30∶1)。得46mg產物，收率83％。mp218-220℃。MSm/e481(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.65(3H，d)，3.30(4H，m)，3.65(4H，m)，4.13-4.30(2H，dd)，4.45(1H，d)，5.15(2H，s)，7.27-7.35(5H，m)，7.75(1H，d，J＝11Hz)，8.60(1H，s)。實驗48(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-對氨基苯磺酰基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4950mg15(0.144mmol)溶解在4ml0.1N的氫氧化鈉溶液中，在0℃時加入對硝基苯磺酰氯35mg(0.15mmol)，加完繼續反應30分鐘，室溫再反應3-4小時，用1N的鹽酸酸化到pH＝3-4，冷卻過濾，沉淀水洗，干燥。DMF-乙醇重結晶，得50mg淡黃色晶體，收率65％。取40mg上述晶體用甲醇加熱溶解，20mgPd/C(10％)催化氫化8小時，過濾掉催化劑，蒸去甲醇，殘留物用乙醇重結晶，得16mg產物，收率42％。mp＞260℃分解。MSm/e502(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.65(3H，d，J＝7Hz)，3.38(4H，m)，3.75(4H，m)，4.45-4.62(2H，dd)，4.95(1H，d)，7.80(1H，d，J＝9Hz)，7.85-8.00(4H，m)，9.15(1H，s)。實驗49(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-對氨基苯基磺酰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪嗪-6-羧酸5050mg25和35mg對硝基苯磺酰氯反應操作同實驗48。得16mg產物，收率22％(兩步合算)。mp＞280℃分解。MSm/e＝517(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.55(3H，d，J＝6Hz)，3.30(4H，m)，3.60(4H，m)，4.45-4.62(2H，dd)，4.75(1H，d)，7.75-8.00(4H，dd)，8.95(1H，s)。實驗50(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基10-(4-甲基磺酰基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5150mg15(0.144mmol)和MsCl(0.15mmol)反應，操作實驗48。氯仿-甲醇重結晶得產物31mg，收率50％。mp＞250℃分解。MSm/e425(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.75(3H，d)，3.00(3H，s)，3.51-4.10(8H，m)，4.59-4.75(2H，m)，5.10(1H，d)，7.95(1H，d)，9.25(1H，s)。實驗51(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-苯磺酰基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5250mg15(0.144mmol)和苯磺酰氯(0.15mmol)反應，操作實驗48。收率55％。mp＞250℃分解；MSm/e487(M+)；1H-NMR(CF3COOD)δppm1.68(3H，d)，3.51-4.10(8H，m)，4.50-4.25(2H，m)，5.10(1H，d)，7.55-8.00(5H，m)，9.15(1H，s)。實驗52(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-對甲苯磺酰基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5350mg15(0.144mmol)和對甲苯磺酰氯(0.15mmol)反應，操作實驗48，收率70％。mp＞260℃分解。MSm/e501(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.65(3H，d)，2.39(3H，s)，3.45(4H，m)，4.00(4H，m)，4.51-4.72(2H，m)，5.10(1H，d)，7.74-7.90(4H，3×d)，9.25(1H，s)。實驗53(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-對乙酰胺基苯磺酰基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5450mg15(0.144mmol)和對乙酰胺基磺酰氯(0.15mmol)反應，操作同上，收率64％。mp205-207℃分解。MSm/e544(M+)。H-NMR(CF3COOD)δppm1.45(3H，d)，2.10(3H，s)，3.00(4H，m)，3.30(4H，m)，4.30～4.55(2H，dd)，4.90(1H，m)，7.58～7.75(4H，2×d，)，7.85(1H，d)，8.95(1H，s)。實驗54(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-(2溴乙基羰基)哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5550mg15(0.144mmol)溶解在飽和NaHCO3溶液中，冷卻到0℃，滴加30mgβ-溴丙酸酰氯的2ml乙二醇二甲醚溶液，加完之后，繼續反應1hr，在18-20℃反應3hr，反應畢，用1N鹽酸調到pH＝3-4，過濾，烘干沉淀，用甲醇重結晶，得35mg55，收率50％。mp221-223℃。MSm/e482(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm2.55(3H，d，J＝7Hz)，4.10(2H，m)，4.50(2H，m)，4.50-5.00(8H，m)，5.45-5.55(2H，dd)，5.58(1H，dd)，8.80(1H，d)，10.00(1H，s)。實驗55(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-氯甲基羰基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5650mg15溶解在3ml干燥DMF中，加入0.020ml三乙胺，冷卻到0℃，滴加氯乙酰氯0.012ml的2ml乙二醇二甲醚溶液，加完之后，繼續反應3hr，過濾掉三乙胺鹽酸鹽，蒸干DMF，乙醇重結晶得50mg產物，收率82％。mp202-204。MSm/e423(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.48(3H，d)，2.48(4H，m)，3.25(4H，m)，3.60(2H，s)，4.40-4.60(2H，dd)，4.95(1H，dd)，7.65(1H，d)，9.00(1H，s)。實驗56(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基-4-氯甲基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5750mg16溶解在20ml干燥THF中，加入0.020ml三乙胺，冷卻到0℃，滴加氯乙酰氯0.012ml的2ml乙醇二甲醚溶液，加完之后，繼續反應3hr，過濾掉三乙胺鹽酸鹽，蒸于THF，乙醇重結晶，得產物30mg，收率50％。mp164-165℃。MSm/e437(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.60(3H，m)，1.65(3H，m)，3.20(4H，m)，3.40(4H，m)，4.10(2H，s)，4.35-4.55(3H，m)，7.75(1H，d，J＝12Hz)，8.65(1H，s)。實驗57(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基-4-氯甲基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5850mg26溶解在3ml干燥DMF中，加入0.020ml三乙胺，冷卻到0℃，滴加氯乙酰氯0.012ml的2ml乙醇二甲醚溶液，加完之后，繼續反應3hr。操作同實驗56。柱層析(洗脫劑三氯甲烷/甲醇＝30∶1)。得產物42mg，收率34％。mp269-270℃。MSm/e452(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.35(3H，d)，1.55(3H，d)，3.20-3.60(7H，m)，4.10(2H，s)，4.15-4.40(3H，m)，8.45(1H，s)。實驗58(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-氯甲基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5950mg25溶解在3ml干燥DMF中，加入0.020ml三乙胺，冷卻到0℃，滴加氯乙酰氯0.012ml的2ml乙醇二甲醚溶液，加完之后，繼續反應3hr。操作同實驗56。乙醇-水重結晶，得產物30mg，收率50％。mp＞280℃分解。MSm/e438(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.48(3H，d，J＝7Hz)，3.45(4H，m)，3.80(4H，m)，4.20(2H，s)，4.21-4.48(3H，m)，8.48(1H，s)。實驗59(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-氯甲基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸6040mg21(0.11mmol)，0.020ml三乙胺，氯乙酰氯0.010ml。操作同實驗56。柱層析(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1)。得21mg產物，收率44％。mp217-217℃。MSm/e437(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.62(3H，d)，2.00(1H，m)，3.45(4H，m)，3.70(4H，m)，4.10(2H，s)，4.30-4.55(3H，m)，7.55(1H，d)，8.65(1H，s)。權利要求1.一種結構式如下的左旋氧氟沙星衍生物其中R7為R1＝H，C1-C5的烷基；m＝1，2R2＝H，C1-C5的烷基R3＝C1-C5的直鏈或支鏈烷基，CH2PhR4＝H，C1-C5的烷基，吡啶，嘧啶，CO(CH2)nXX＝鹵素，n＝1，2R5＝H，NH2R6＝烷基或取代苯基2.根據權利要求1所述左旋氧氟沙星及其衍生物，其特征在于它們通過下列中間體(S)-5，(R)-6，(S)-7，(R)-7制備獲得3.根據權利要求1所述左旋氧氟沙星及其衍生物，其特征在于它的制備方法a三氟硝基苯在相轉移催化條件下與(S)-4縮合得縮合物(S)-5；b(S)-5脫去保護基得(R)-6，(R)-6用醋酸-氫溴酸進行溴乙酰化得(R)-7和(S)-7；c.(R)-7和(S)-7在甲醇鈉甲醇溶液中環化得環化物(R)-8；d(R)-8用鈀/碳還原，還原物與EMME縮合得縮合物(R)-10，(R)-10經環化，酸水解得關鍵中間體(S)-13；e.(S)-13與HR7在適當的無水溶劑中縮合得7-位被取代的上述左旋氧氟沙星及其衍生物；f.(S)-13在5-位引入氨得23，23與HR7在適當的溶劑中縮合得5-胺基取代的上述左旋氧氟沙星衍生物。g.烷基氨基氯甲酸酯，烷基或取代苯基磺酰氯，α-鹵代乙酰氯和7-位有仲氮結構的左旋氧氟沙星衍生物縮合，得化合物29-60。4.根據權利要求1所述左旋氧氟沙星衍生物，其特征在于它們具有抗革蘭氏陰、陽性菌的作用，可作為抗菌藥物應用。5根據權利要求1所述左旋氧氟沙星衍生物，其特征在于它們具有抗腫瘤活性，可作為抗抗腫瘤藥物應用。6.根據權利要求1所述左旋氧氟沙星衍生物，其特征在于它們具有抗支原體活性，可作為抗支原體藥物應用。全文摘要本發明左旋氧氟沙星及其類似物的制造方法,采用起始原料豐富易得,反應條件溫和,總收率高,光學活性純度高,更適合工業化生產,本發明在左旋氧沙星的5位和7位進行結構改造并經抗菌、抗腫瘤等試驗發現它們具有明顯的抗菌和抗腫瘤活性。文檔編號A61K31/535GK1181381SQ97106728公開日1998年5月13日申請日期1997年11月18日優先權日1997年11月18日發明者楊玉社,嵇汝運,陳凱先,蔣華良申請人:中國科學院上海藥物研究所