專利名稱：赤芝孢子的抗突變效果的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及萌發(fā)活化(germination activated)的赤芝(Ganoderma lucidum)孢子的粉末在胎兒保護(hù)中的用途。具體地，本發(fā)明涉及通過給懷孕的哺乳動(dòng)物給藥萌發(fā)活化的赤芝孢子的粉末以防止胎兒損傷的方法。
尤其，GASP已被用于、或被推薦用于免疫疾病、肝炎、AIDS、癌癥、糖尿病、防止自由基氧化、抑制肝毒性的活性、以及用于治療心血管疾病、細(xì)菌或病毒感染等等。但是，到目前為止還沒有GASP在懷孕中或?qū)Πl(fā)育的胎兒的效果的報(bào)道。
因此，本發(fā)明的目的在于提供一種保護(hù)胎兒的方法，其包括對(duì)懷孕的哺乳動(dòng)物給藥有效保護(hù)量的GASP。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，對(duì)懷孕的人給藥GASP。
但是，該方法一般對(duì)哺乳動(dòng)物都有效，包括大鼠、小鼠、犬、貓、兔、牛、羊等，包括更高級(jí)的非人靈長(zhǎng)類。尤其是，本發(fā)明的目的在于提供一種保護(hù)胎兒不發(fā)生突變的方法，該突變包括染色體畸變，其可能是由于環(huán)境中的有毒的物質(zhì)引起，或由于紫外或電離輻射引起。
“致畸”是指增加先天性的或發(fā)育的畸形的發(fā)生率。致畸劑可以是化學(xué)化合物，胎兒或懷孕婦女的遺傳基因座(genetic locus)(參見美國(guó)專利6,210,950，其在本文中引用作為參考)，或環(huán)境中的物理力，如紫外或電離輻射，電磁輻射等等。
盡管GASP活性的確切機(jī)理還未知，但本發(fā)明的發(fā)明者已證明對(duì)懷孕的雌性哺乳動(dòng)物給藥GASP能減少由任何來源引起的發(fā)育畸形、胎兒死亡和先天缺陷的發(fā)生率。
“突變”是指引起染色體或基因的結(jié)構(gòu)改變。
本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種保護(hù)胎兒免受懷孕婦女可能接觸的致突變化合物，以及保護(hù)胎兒免受這些化合物的致畸作用的方法。這些致突變化合物的實(shí)例包括，但不限于環(huán)磷酰胺、砷、黃曲霉毒素B1、氯乙烯、乙酰氨基芴、黃樟素、二甲亞硝胺、苯甲酸安替比林(benzo(a)pyrine)、二苯蒽、氮芥、β-丙酸內(nèi)酯、乙基甲磺酸酯(ethylmethane sulfonate)、甲基亞硝基脲、和硫酸二甲酯。很多致突變化合物是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟悉的，并且可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的檢測(cè)方法鑒別。盡管懷孕的哺乳動(dòng)物，尤其是人，通常不是故意暴露于這些化合物，但是在環(huán)境中可能存在可以影響胎兒的少量的這些或其它的化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供減少哺乳動(dòng)物，尤其是人的發(fā)育和先天缺陷的方法。
通過對(duì)懷孕的雌性哺乳動(dòng)物，尤其是人給藥GASP，能實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的這些和其它目的。
對(duì)于人，GASP的優(yōu)選給藥劑量是每人0.5g/天至50g/天，更優(yōu)選在每人1至25g/天，通常推薦的劑量是4.8g/天。認(rèn)為為了最佳的益處，GASP應(yīng)該在整個(gè)懷孕期間使用。
對(duì)于諸如獸醫(yī)目的的對(duì)其它哺乳動(dòng)物給藥，預(yù)期有效劑量按照接受動(dòng)物的單位體重的給藥量是大致相等的，并且本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以通過常規(guī)實(shí)驗(yàn)測(cè)定該有效劑量。
按照本發(fā)明的方法給藥GASP能預(yù)防或減少胎兒中的胎兒死亡、突變損傷和發(fā)育或先天缺陷的發(fā)生率或可能性。
發(fā)明詳述在本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案的描述中，為清楚起見使用了具體的術(shù)語。但是，本發(fā)明不限制于所選擇的具體術(shù)語。應(yīng)理解，每個(gè)具體的要素包括按照類似方式完成類似目的的所有技術(shù)等價(jià)物。
使用的測(cè)試為改進(jìn)的小鼠骨髓細(xì)胞小核測(cè)試，其在中國(guó)衛(wèi)生部的一份文件，“關(guān)于‘健康食品功能評(píng)價(jià)程序和測(cè)試方法’的修訂的項(xiàng)目的發(fā)布的公告”中具體說明，其在本文引用作為參考。
批號(hào)No.2000118的萌發(fā)活化的赤芝孢子的粉末從中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院的廣州綠色食品工程公司和瑞典和香港的綠色能源健康產(chǎn)品國(guó)際有限公司商業(yè)購(gòu)買。
90只NIH小鼠，雌雄各半，體重18-20g，從廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心獲得，其合格證書編號(hào)為200A025。
GASP的推薦臨床劑量為4.8g/天/人，其按照人和小鼠的各自體重?fù)Q算。其等價(jià)于小鼠的劑量為0.61g/kg(4.8g÷7.9＝0.61g/kg)。GASP的推薦臨床劑量的大約10倍量不會(huì)引起人和小鼠的副作用。如果高劑量組給藥每日劑量的10倍量，則三個(gè)小鼠劑量組分別給藥6.10g/kg、3.10g/kg和0.61g/kg，其等同于人臨床劑量的10、5、和1倍量。
將小鼠按體重隨機(jī)分為9組，每組分別雄性5只和雌性5只。每組動(dòng)物進(jìn)行下列治療第1組接受6.1g/kg GASP和50mg/kg環(huán)磷酰胺(“CP”)。
第2組接受3.1g/kg GASP和50mg/kg CP。
第3組接受0.6g/kg GASP和50mg/kg CP。
第4組接受0g/kg GASP和50mg/kg CP。
第5組接受6.1g/kg GASP和40mg/kg CP。
第6組接受3.1g/kg GASP和40mg/kg CP。
第7組接受0.6g/kg GASP和40mg/kg CP。
第8組接受0g/kg GASP和40mg/kg CP。
第9組接受0g/kg GASP和0mg/kg CP。
將每組的雄性和雌性分別在不同的籠中喂養(yǎng)。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)間為30天。在這段時(shí)間，嚴(yán)密監(jiān)控動(dòng)物的食物消耗和異常表現(xiàn)，每3-7天紀(jì)錄動(dòng)物的體重變化。
將藥物制備成在蒸餾水中的所需濃度的混懸液，以0.2mL/10g體重的單個(gè)劑量通過管口服給藥。陰性對(duì)照組每天一次，連續(xù)30天通過管施用等體積的蒸餾水。在該測(cè)試的第30天，受試藥物組和陽性對(duì)照組分別口服給藥CP40和50mg/kg一次。給藥CP后1小時(shí)，受試藥物組和陰性對(duì)照組再給藥受試藥物和蒸餾水一次，最后一次給藥后24小時(shí)處死小鼠。在處死小鼠4小時(shí)前，給其施用秋水仙堿，按照常規(guī)方法提取骨髓以制備染色體樣品。
觀察每組的樣品。觀察每個(gè)小鼠100個(gè)分裂中期細(xì)胞，紀(jì)錄染色體結(jié)構(gòu)和畸變數(shù)量。應(yīng)用Windows8.0的SPSS(t-檢驗(yàn))，對(duì)各個(gè)劑量組和陽性組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析，檢驗(yàn)以發(fā)現(xiàn)各組內(nèi)的雄性和雌性間是否存在顯著性差異。
在30天的測(cè)試期中各組小鼠的重量如表1所示。數(shù)據(jù)表明各測(cè)試組和陰性對(duì)照組動(dòng)物的體重沒有顯著性差異(p＞0.05)。該結(jié)果表明GASP的各個(gè)劑量對(duì)小鼠的體重增加沒有影響。表1.在給藥萌發(fā)活化的赤芝孢子的粉末期間小鼠體重的變化(X±S，g)組 測(cè)試藥CP 動(dòng) 性別 0天 4天 8天 15天 22天 29天 凈體重增物劑量 劑量物 加(g/kg) (mg/kg) 數(shù)1 6.1 50 5 M 20.5±0.7 20.0±1.8 25.0±1.4 25.0±2.9 26.3±2.628.1±3.17.6±2.86.1 50 5 F 18.1±0.1 19.9±1.3 22.3±1.7 22.5±1.7 23.6±1.225.5±1.07.4±1.02 3.1 50 5 M 20.2±1.2 22.1±1.3 24.2±1.7 26.2±2.6 29.6±3.831.0±3.610.8±4.13.1 50 5 F 18.4±0.5 19.9±1.1 22.3±1.5 23.6±2.3 24.7±2.026.2±1.27.8±1.13 0.6 50 5 M 18.7±1.6 21.1±0.5 24.1±2.7 26.1±3328.9±3.029.6±2.510.4±3.40.6 50 5 F 18.3±0.4 19.3±0.9 20.9±1.3 22.0±0.5 22.9±0.725.2±0.46.9±0.54 0 50 5 M 19.8±1.5 21.0±1.7 24.8±3.2 25.1±4.6 26.3±1.627.9±1.68.1±1.80 50 5 F 18.2±0.4 19.3±2.0 21.8±1.9 23.2±1.8 24.3±2.125.9±1.07.6±0.95 6.1 40 5 M 19.4±1.2 21.8±1.1 24.4±0.5 24.5±2.1 28.2±3.128.9±2.28.8±2.96.1 40 5 F 18.1±0.9 19.8±1.8 21.9±2.1 23.6±2.1 24.6±2.425.9±1.37.9±1.36 3.1 40 5 M 20.5±1.0 21.3±1.3 23.3±3.4 25.4±3.2 27.5±2.829.3±3.08.7±2.43.1 40 5 F 18.4±0.3 19.7±0.8 20.9±0.9 22.2±0.8 23.7±1.425.7±1.67.2±1.87 0.6 40 5 M 20.3±1.0 23.0±1.2 25.7±1.2 27.7±1.9 31.3±3.333.2±3.812.8±3.90.6 40 5 F 18.3±0.3 21.1±0.7 23.6±0.6 25.0±0.4 26.8±1.426.8±0.48.4±0.48 0 40 5 M 19.4±1.3 22.8±1.3 26.0±1.3 28.1±1.3 32.4±1.833.2±2.013.7±1.80 40 5 F 18.2±0.2 19.6±1.2 22.9±1.0 24.8±0.6 27.1±2.327.5±2.19.3±1.89 0 0 5 M 19.7±1.3 22.8±0.9 25.4±1.1 26.6±1.4 29.0±3.830.1±3.610.4±4.50 0 5 F 18.0±0.2 20.6±0.5 22.8±0.4 24.2±1.5 25.7±0.526.3±1.08.3±1.0各個(gè)GASP劑量組(第1，2和3組)中的被50mg/kg CP誘導(dǎo)的骨髓細(xì)胞染色體畸變率顯著低于陽性對(duì)照組，如表2所示。各個(gè)劑量組和陽性對(duì)照組間的差異是顯著的(p＜0.01)。GASP對(duì)CP誘導(dǎo)的小鼠染色體畸變的抑制率平均超過50％。結(jié)果還表明GASP劑量增加與染色體畸變抑制效果增加之間的劑量依賴關(guān)系。表2.萌發(fā)活化的赤芝孢子的粉末對(duì)50mg/kg CP誘導(dǎo)的小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變的抑制效果
1ctg染色單體間隙2csg染色體間隙3ctb染色單體斷裂4csb染色體斷裂5f染色體斷片(fragment)6tr三相交換體(triradial)7r環(huán)狀染色體8dmin二微體(dimicrobody)9del缺對(duì)染色體抑制率＝(陽性組細(xì)胞畸變率-GASP組細(xì)胞畸變率)/陽性組細(xì)胞畸變率*p＜0.05與陽性組相比**p＜0.013與陽性組相比如表3所示，各個(gè)GASP劑量組(即用GASP治療)被40mg/kg CP誘導(dǎo)的骨髓細(xì)胞染色體畸變率顯著低于陽性對(duì)照組。各個(gè)劑量組和陽性對(duì)照組間的差異是顯著的(p＜0.01)。各個(gè)GASP劑量組對(duì)CP誘導(dǎo)的小鼠染色體畸變的抑制率超過30％，但是沒有明顯的劑量-效果依賴關(guān)系。結(jié)果表明GASP對(duì)CP誘導(dǎo)的小鼠骨髓細(xì)胞染色體損傷有抑制效果。表3.萌發(fā)活化的赤芝孢子的粉末對(duì)40mg/kg CP誘導(dǎo)的小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變的抑制效果
1ctg染色單體間隙2csg染色體間隙3ctb染色單體斷裂4csb染色體斷裂5f染色體斷片6tr三相交換體7r環(huán)狀染色體8dmin二微體(dimicrobody)9del缺對(duì)染色體抑制率＝(陽性組細(xì)胞畸變率-GASP組細(xì)胞畸變率)/陽性組細(xì)胞畸變率*p＜0.05與陽性組相比**p＜0.013與陽性組相比結(jié)果表明小鼠給藥6.1、3.1和0.61g/kg GASP(相當(dāng)于推薦臨床劑量的10，5，和1倍)后30天，對(duì)40或50mg/kg CP誘導(dǎo)的小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變有抑制效果，其中最高劑量組(6.1g/kg)對(duì)50mg/kg CP誘導(dǎo)的小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變的抑制率可以達(dá)到67.8％。這表明GASP對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的小鼠染色體損傷有保護(hù)作用。
給大鼠喂食廣東省醫(yī)用動(dòng)物中心提供的標(biāo)準(zhǔn)小球狀食物。選擇體重在200-250g間的健康SD大鼠，以雌雄2∶1的比例一起喂養(yǎng)過夜。第二天開始，每天早晨檢查陰道涂片，當(dāng)發(fā)現(xiàn)精液的那天被認(rèn)為是懷孕的0天。
將懷孕的大鼠隨機(jī)分為5組，每組18只大鼠。按照急性毒性測(cè)試，SD大鼠的LD50大于21.5g/kg。人的臨床劑量為每劑量4個(gè)膠囊(每膠囊含有0.3g GSAP)，每天4次。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)使低劑量組為428.6mg/kg，中劑量組為2143mg/kg，高劑量組為4286mg/kg(當(dāng)按照大鼠和人各自的體表面積計(jì)算時(shí)，分別相當(dāng)于人臨床劑量的1，5，和10倍)。在懷孕的第6-15天，通過管飼法以1.5ml/100g的體積對(duì)各劑量組大鼠口服給藥GASP。陽性對(duì)照組在懷孕的第10-12天通過胃管以1.0ml/100g的體積口服給藥阿司匹林(250mg/kg)，而陰性對(duì)照組通過管飼法口服給予等量的蒸餾水。
所有懷孕的大鼠每3天稱重一次，以調(diào)節(jié)劑量。在懷孕的第20天，通過脊椎脫臼處死動(dòng)物，進(jìn)行剖腹產(chǎn)術(shù)得到胎兒大鼠，以檢測(cè)多種指標(biāo)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)懷孕大鼠體重增加的影響懷孕大鼠在20天測(cè)試期中的體重增加如表4所示。結(jié)果表明給藥阿司匹林的動(dòng)物組的凈體重增加明顯低于陰性對(duì)照組(p＜0.05)。各個(gè)GASP劑量組與陰性對(duì)照組的統(tǒng)計(jì)比較顯示凈體重增加無顯著性差異(p＞0.05)，表明本實(shí)驗(yàn)中的GASP劑量對(duì)懷孕大鼠的體重增加沒有影響。表4.通過萌發(fā)活化的赤芝孢子的粉末對(duì)懷孕大鼠體重增加的影響(g，x±s)
*p＜0.05.對(duì)早期胚胎發(fā)育的影響表5顯示了三個(gè)GASP劑量組與陰性對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比的研究。結(jié)果顯示GASP治療組和陰性對(duì)照組間在每同窩仔(litter)的胎兒存活率、吸收率(absorption rate)和胎兒死亡率上沒有顯著性差異(p＞0.05)。這明顯不同于阿司匹林組(陽性對(duì)照組)和陰性對(duì)照組間的研究，其顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的差異(p＜0.01)。結(jié)果表明GASP對(duì)早期胚胎發(fā)育沒有任何顯著的影響。表5.赤芝孢子的粉末對(duì)早期胚胎發(fā)育的影響
*p＜0.05與陰性對(duì)照組相比**p＜0.01與陰性對(duì)照組相比對(duì)胎兒大鼠發(fā)育水平的影響表6顯示了各個(gè)GASP劑量組與陰性對(duì)照組在胎兒大鼠各個(gè)指標(biāo)上的比較。結(jié)果顯示在GASP組和陰性對(duì)照組間沒有顯著性差異(p＞0.05)。但是，當(dāng)阿司匹林陽性對(duì)照組與陰性對(duì)照組進(jìn)行比較時(shí)，觀察到在胎兒大鼠的外觀上有顯著性差別，阿司匹林陽性對(duì)照組的外觀異常率為42.9％。阿司匹林陽性對(duì)照組的胎兒大鼠外觀較小，具有短的肢體和尾部，以及臍疝等。表6.通過萌發(fā)活化的赤芝孢子的粉末對(duì)胎兒大鼠發(fā)育水平的影響(x±s)
*p＜0.05與陰性對(duì)照組相比**p＜0.01與陰性對(duì)照組相比對(duì)胎兒大鼠骨骼發(fā)育的影響用茜素紅染色后，在顯微鏡下觀察胎兒大鼠，結(jié)果表明各個(gè)GASP劑量組與陰性對(duì)照組在骨骼發(fā)育上沒有顯著性差異(p＞0.05)，而阿司匹林陽性對(duì)照組顯示出變形如骨骼發(fā)育不全、肋骨融合、二頭肋和脊椎變形。結(jié)果顯示GASP在當(dāng)前劑量下不會(huì)影響胎兒大鼠的骨骼發(fā)育(結(jié)果如表7所示)。表7.赤芝孢子的粉末對(duì)胎兒大鼠骨骼發(fā)育水平的影響
*p＜0.05與陰性對(duì)照組相比**p＜0.01與陰性對(duì)照組相比對(duì)胎兒大鼠器官形成的影響將每同窩仔大約1/3的胎兒大鼠取出，用Bouins溶液固定，手工切片各個(gè)內(nèi)臟器官，然后在解剖顯微鏡下觀察。結(jié)果顯示阿司匹林陽性組檢測(cè)的17個(gè)胎兒大鼠中，2個(gè)為腦積水。但是在陰性對(duì)照組(40個(gè))、低劑量組(39個(gè))、中劑量組(53個(gè))和高劑量組(56個(gè))檢測(cè)的胎兒大鼠中，沒有發(fā)現(xiàn)大腦、頜、舌、唇、眼、脊髓、心、肺、腎、肝、膀胱和生殖器發(fā)育的任何異常。
這些結(jié)果表明GASP的測(cè)試劑量對(duì)各種指標(biāo)，諸如懷孕大鼠的體重增加、早期胚胎形成、胎兒生長(zhǎng)和發(fā)育、胎兒大鼠的骨骼發(fā)育和內(nèi)臟發(fā)育沒有任何顯著的影響。因此可得出結(jié)論在目前測(cè)試條件下，根據(jù)“中藥和新藥研究指南(Guide to Researches on Traditional Chinese Medicines和New Drugs)”中的毒理測(cè)試方法，GASP對(duì)大鼠沒有致畸作用。
使用廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的重量22-25g的雄性NIH小鼠。使用的劑量根據(jù)小鼠的百分之五十致死量(LD50)，其大于21.5g/kg(數(shù)據(jù)由暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院(Medical College of Jinan University)提供)。在該測(cè)試中，選擇1/2 LD50、1/10 LD50和1/50 LD50作為實(shí)驗(yàn)劑量，即10000mg/kg、2000mg/kg和400mg/kg。還使用了陰性對(duì)照組和陽性對(duì)照組(40mg/kg環(huán)磷酰胺)。每組包括5個(gè)小鼠。各個(gè)劑量都是連續(xù)三天每天通過管飼法口服給藥一次。
稱重GASP，加入適量的蒸餾水，在研缽內(nèi)研磨。然后加入蒸餾水調(diào)節(jié)混懸液至所需濃度。通過管飼法以0.4ml/10g體重的劑量口服給藥該化合物。陰性對(duì)照組給予等量的蒸餾水，而陽性對(duì)照組通過管飼法以40mg/kg(單次給藥)的劑量口服給藥環(huán)磷酰胺(“CP”)。末次給藥24小時(shí)后，通過頸椎骨脫臼處死動(dòng)物。取出股骨，剝離肌肉，應(yīng)用磷酸鹽緩沖液沖洗骨髓，離心，hyponotically固定，應(yīng)用本領(lǐng)域常規(guī)方法制備染色體樣品。然后應(yīng)用10％Giemsa染料(pH6.8)染色10分鐘。
選擇充分分散的分裂中期細(xì)胞在油浸鏡頭下觀察。每個(gè)動(dòng)物觀察100個(gè)分裂中期細(xì)胞，記錄染色體畸變細(xì)胞數(shù)，并計(jì)算染色體畸變率。應(yīng)用Windows8.0的SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算分析得到的結(jié)果(t-檢驗(yàn))。
各個(gè)GASP劑量組(應(yīng)用GASP膠囊)和陰性對(duì)照組間的染色體畸變率間的比較沒有顯著性差異(p＞0.05)，而CP組的染色體畸變率顯著高于陰性對(duì)照組(p＜0.01)。(結(jié)果如表8所示)表8.通過萌發(fā)活化的赤芝孢子的粉末對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞的染色體畸變率的影響
b表示染色體斷裂(chromosomal breakage)I表示染色體斷片(chromosomal fragmentation)f表示染色體融臺(tái)(chromosal fusion)*p＜0.01上述結(jié)果表明當(dāng)GASP以最高劑量(10000mg/kg)給藥時(shí)，不會(huì)引起小鼠骨髓細(xì)胞的染色體畸變率的增加。這又證明當(dāng)以最高劑量給藥時(shí)不會(huì)引起突變率的增加。
在本說明書中舉例說明和討論的實(shí)施方案只是為了教導(dǎo)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員據(jù)發(fā)明人所知的制備和應(yīng)用本發(fā)明的最佳方式。這些說明書中的內(nèi)容不應(yīng)被認(rèn)為是限制本發(fā)明的范圍。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)上述教導(dǎo)可以理解對(duì)本發(fā)明的上述實(shí)施方案進(jìn)行修改或改變，要素添加或刪減，而不偏離本發(fā)明的范圍。因此，可以理解本發(fā)明除上面具體描述外，在權(quán)利要求及其等同物的范圍內(nèi)可以以其它的方式實(shí)施。
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防或減少哺乳動(dòng)物胎兒突變損傷的方法，所述方法包括對(duì)懷孕的雌性給藥有效量的萌發(fā)活化的赤芝孢子粉末(GASP)。
2.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述突變損傷包括染色體畸變。
3.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述的突變損傷是通過暴露于毒性物質(zhì)而引起。
4.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述突變損傷是通過紫外或電離輻射而引起。
5.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述懷孕的雌性是人。
6.按照權(quán)利要求5的方法，其中所述有效保護(hù)量在每天0.5至50g之間。
7.按照權(quán)利要求6的方法，其中所述有效保護(hù)量在每天1至25g之間。
8.一種預(yù)防哺乳動(dòng)物胎兒死亡的方法，所述方法包括對(duì)懷孕的雌性給藥有效保護(hù)量的萌發(fā)活化的赤芝孢子粉末(GASP)。
9.按照權(quán)利要求8的方法，其中所述懷孕的雌生是人。
10.按照權(quán)利要求9的方法，其中所述有效保護(hù)量在每天0.5至50g之間。
11.按照權(quán)利要求10的方法，其中所述有效保護(hù)量在每天1至25g之間。
12.一種預(yù)防或減少哺乳動(dòng)物發(fā)育或先天缺陷的方法，所述方法包括對(duì)懷孕的雌性給藥有效保護(hù)量的萌發(fā)活化的赤芝孢子粉末(GASP)。
13.按照權(quán)利要求12的方法，其中所述懷孕的雌性是人。
14.按照權(quán)利要求13的方法，其中所述有效保護(hù)量在每天0.5至50g之間。
15.按照權(quán)利要求15的方法，其中所述有效保護(hù)量在每天1至25g之間。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種通過給懷孕的哺乳動(dòng)物口服給藥萌發(fā)活化的赤芝孢子粉末(“GASP”)用于胎兒保護(hù)的方法。證明GASP對(duì)懷孕的哺乳動(dòng)物，尤其是人的胎兒損傷有預(yù)防作用。
文檔編號(hào)A61P43/00GK1466991SQ0214250
公開日2004年1月14日 申請(qǐng)日期2002年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月5日
發(fā)明者鐘志強(qiáng), 唐筱勤 申請(qǐng)人:鐘志強(qiáng), 唐筱勤