專利名稱：一種水包油型復方硝唑尼特納米乳及其制備方法
技術領域：
本發明屬于醫藥領域，涉及一種可以用于人或畜禽原蟲(微小隱孢子蟲、阿米巴原蟲等)、蠕蟲(大部分的線蟲、絳蟲和吸蟲)、細菌(革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌)和病毒(輪狀病毒等)等感染引起的疾病的治療的一種水包油型復方硝唑尼特納米乳及其制備方法。
背景技術：
硝唑尼特別稱硝唑克酰胺；鄰[N-(5-硝基噻唑-2-基)氨基甲酰]苯酚乙酸酯，是一種硝噻柳酸酰胺的衍生物。最初于20世紀70年代由Romark Laboratories公司成功研制開發，1996年在墨西哥首次作為抗寄生蟲藥物上市。英文商品名Daxon和Colufase,后陸續在澳大利亞、新西蘭、美國等國上市，商品名CryptazTM,上市劑型為片劑(500mg)和干混懸劑(60ml，100mg/5ml)。美國于2002年11月22日批準硝唑尼特作為由隱孢子蟲、藍氏賈第鞭毛蟲引起的12月-11歲兒童腹瀉的治療藥物上市，劑型為混懸劑，商品名AlianaTM。 硝唑尼特以廣譜、高效、低毒，尤其是在抗耐藥性厭氧菌和幽默螺旋菌中的特點，弓I起人們的高度重視。臨床研究表明硝唑尼特有很強的抗原蟲、蠕蟲、細菌和病毒的活性。原蟲包括 微小隱孢子蟲、藍氏賈第鞭毛蟲，阿米巴原蟲和小孢子蟲等；蠕蟲包括大部分的線蟲、絳蟲和吸蟲，如豬帶絳蟲、微小膜殼絳蟲和肝片吸蟲等。細菌包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌，特別是擬桿菌、梭狀桿菌和幽門螺旋菌。資料顯示，與阿苯達唑、甲苯達唑和甲硝唑相比，硝唑尼特的抗蟲譜和抗菌譜更加廣泛。其實際的作用機制雖尚未弄清，但被認為與抑制丙酮酸鹽，鐵氧化還原蛋白氧化還原酶的酶依賴性電子轉移反應有關，后者對厭氧能量代謝至為重要。美國于2002年11月批準硝唑尼特作為由隱孢子蟲、藍氏賈第鞭毛蟲引起的 J L童腹灣的治療藥物上市。作為當前較為理想的抗蟲、抗菌和抗病毒新藥，硝唑尼特具有多種優點①治療譜廣泛，既可以驅蟲，又可殺菌，抗病毒。②對機體的耐受性高，利用推廣使用。③臨床效果證明，對于HIV感染者并伴隨感染微小隱孢子蟲等腸道孢子形成類原蟲所致長期慢性腹瀉的治療有了可能，將可能發揮更為重要的治療作用。④國內市場巨大，而目前市場卻幾乎處于真空狀態，且我國的原蟲性腹瀉率發病較高，有較大的醫療價值和市場開發價值。目前臨床上使用的硝唑尼特已知劑型為片劑和混懸劑，其他劑型幾乎沒有。片劑為傳統制劑和常用制劑，制劑時需加入賦形劑并壓縮制成，口服后藥物溶出速度較慢，生物利用度低，且對于某些特殊病人會有不易吞服的缺陷；混懸劑中的藥物微粒一般在0. 5 IOum之間，屬于熱力學不穩定的粗分散體系，生物利用度也不高，穩定性較差。因此，有必要開發更好的硝唑尼特新劑型以代替舊劑型的不足，滿足臨床的使用。

發明內容
本發明針對上述問題及現有技術中存在的缺陷與不足，提供一種使用安全，療效顯著，藥物生物利用度高，穩定性好的用于人和畜禽由于各種原蟲、線蟲、絳蟲、吸蟲、細菌和病毒等感染所引起的疾病的治療的一種水包油型復方硝唑尼特納米乳。該納米乳使用安全、毒副作用小。實現上述發明目的的技術方案是該水包油型復方硝唑尼特納米乳，它是由下列質量百分比的原料組成
表面活性劑19. 0% 35. 0%
助表面活性劑0 7. 0%
肉桂醛0. 1% 8. 0%
硝唑尼特0.01% 0.21%
余量為蒸餾水
上述原料的質量百分比之和為100%。本發明還有一個目的是提供上述水包油型復方硝唑尼特納米乳的制備方法，包括以下步驟
1)按配方準確稱取表面活性劑、助表面活性劑、硝唑尼特、肉桂醛、蒸餾水，備用；
2)將硝唑尼特溶解于肉桂醛中充分攪拌均勻作為油相；
3)將表面活性劑和助表面活性劑混合后加入到油相中并充分攪拌均勻；
4)向步驟3)制備的溶液是中緩慢滴加蒸餾水，邊加邊攪拌，加水和攪拌過程中該混合物體系會出現由稀變粘稠，最后又由粘稠變稀的一系列變化，直至最終澄清透明即形成水包油型復方硝唑尼特納米乳組合物。本發明在表面活性劑的選擇上，選用無毒性和生物相容性好的非離子型表面活性劑。由于非離子表面活性劑在水中不解離，不受強電解質和溶液PH值的影響，毒性和溶血性較小，能與多數藥物配伍，與其他表面活性劑相容性好，在溶液中比較穩定，因此，將非離子表面活性劑做為首選。又依據0/W型納米乳的制備需要表面活性劑的HLB值(親水親油平衡值)介于8 18之間且考慮到制備工藝的簡單性，即納米乳的易形成性和制備出來的納米乳的穩定性，本發明選用HLB介于10 15之間的液態非離子型表面活性劑。可選用的表面活性劑有聚氧乙烯醚蓖麻油(EL-40)、聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油(RH-40)和吐溫-80 中的一種或幾種混合物。本發明中的助表面活性劑不是水包油型復方硝唑尼特納米乳必要的成分，在助表面活性劑的比例為零的情況下，也可以形成水包油型復方硝唑尼特納米乳。本發明以硝唑尼特與肉桂醛作為組合，是因為硝唑尼特具有較好的抗蟲、抗菌和抗病毒活性，且對動物機體的耐受性良好，安全性高，目前無耐藥性的報道，療效確實；肉桂醛具有殺菌、消毒和防腐的功能，對機體無毒或低毒，對微生物的繁殖能起到較強的殺滅和抑制作用，特別是對大腸桿菌、金黃色葡萄菌、白色葡萄球菌、志賀氏痢疾桿菌、傷寒和副傷寒甲桿菌、肺炎球菌、產氣桿菌、變形桿菌、腸炎沙門氏菌，霍亂弧菌等均有抑制作用。可用于治療多種因細菌感染引起的疾病，還具有較強的抗潰瘍、加強胃腸道的運動功效，口服后對硝唑尼特的治療起到輔助和增強效果，且可以作為硝唑尼特的油相溶劑，有較高的溶解度。本發明經透射電子顯微鏡檢測，液滴直徑分布在I IOOnm之間，外觀為黃色或淡黃色的透明液體，具有很好的穩定性
I、經時穩定性
4本納米乳液在室溫自然變化條件下儲藏30天后，經檢驗外觀持久澄清透明，未發現渾濁或沉淀等破乳情況，說明經時穩定性好。2、熱貯穩定性
將本納米乳液分裝于幾個玻璃瓶中，密封之后置于50°C恒溫箱中貯存15d，每隔5d取樣觀察。結果表明，該納米乳熱貯后檢驗外觀仍保持澄清透明的外觀，未發現渾濁或分層等破乳情況，說明熱貯穩定性良好。3、抗冷凍穩定性
將本納米乳液在冰箱中_10 C保存一周后。恢復至室溫。該納米乳由固態融化為液態， 經稀釋檢驗后外觀仍澄清透明，放置一周后繼續檢驗，未發現渾濁或沉淀等破乳情況，表明抗冷凍性良好。4、加速穩定性
將本納米乳液置于試管，密封，在15000r/min的轉速下離心20分鐘，經稀釋檢驗后外觀仍澄清透明，未發現渾濁或沉淀等破乳情況。5、光穩定性實驗
將本納米乳液分裝于玻璃瓶中，密封置于日光下，室溫光照10d，于ld、3d、5d、10d分別取樣。經稀釋檢驗表明該納米乳液保持澄清透明，無渾濁或分層等破乳情況，表明光穩定性良好。本發明的水包油型復方硝唑尼特納米乳具有治療人和畜禽原蟲、線蟲、絳蟲、吸蟲、細菌和病毒等感染引起的疾病的功效。用法口服或飲水。本發明的水包油型復方硝唑尼特納米乳與現有技術相比，具有以下優點
1)熱力學穩定性高。制備時操作比較簡單，儲存后不分相、不破乳，穩定性提好；
2)劑型為水包油型液體制劑，為目前市場上除了片劑、混懸劑之外的新劑型，前景廣
闊；
3)生物利用度高。硝唑尼特納米乳滴粒徑在fIOOnm之間，具有較高的腸道吸收率， 且可以避開肝首過效應，提高了藥物的生物利用度，減少了藥物用量；
4)方法工藝簡單，適合規模化生產。
具體實施例方式以下通過藥物安全性試驗和藥效試驗來進一步闡述本發明所述藥物的有益效果。試驗例I 硝唑尼特納米乳口服藥物安全性實驗。選取體重為20g左右的昆明種健康小鼠50只，將其隨機分為對照組、空白納米乳組、復方硝唑尼特納米乳低劑量組、中劑量組和高劑量組5組，每組10只。對照組小鼠每只灌胃生理鹽水0. 5ml，空白納米乳組灌胃同等劑量的藥物溶劑，復方硝唑尼特納米乳低劑量組、中劑量組和高劑量組分別灌胃0. 5ml濃度為0. 5g/L、l. 0g/L、2. Og/L，每日2次，連續灌胃3天，期間每日觀察各組小鼠的精神、飲食和活動情況，末次灌胃5h后，將小鼠解剖，觀察各個臟器病變情況，并作詳細記錄。實驗結果各組小鼠精神、飲食和活動狀況均正常，小鼠臟器也無異常病變，各組之間無顯著差異。表明機體對本納米乳耐受性良好。4/5頁試驗例2 復方硝唑尼特納米乳治療家兔魏氏梭菌病效果試驗
選取臨疹上確診為魏氏梭菌疫情的兔場家兔10例，病兔表現精神沉郁，喜趴伏，食欲不振，飲欲正常或增強，部分家兔腹脹，聽診腸音不整且劇烈，糞便惡臭稀軟，肛門處被毛污穢潮濕，對糞便中的病原菌進行實驗室診斷，確診為魏氏梭菌感染。將10例病兔隨機分為 2組，每組5只，第一組為對照組，不做任何處理；第二組每只灌服本納米乳液5ml (含硝唑尼特原藥0.2%)，每日2次，連用3天。用藥期間禁用其他同類藥品。判斷病愈標準
痊愈患兔精神良好，食欲恢復，活動正常，腸音規律整齊，糞便成球；
顯效患兔精神一般，食欲好轉，活動改善，腸音基本正常，糞便成球；
有效患兔精神、食欲、活動情況仍欠佳但有所好轉，糞便偏軟稍臭；
無效患兔死亡或癥狀較治療前加重。總有效率為痊愈率+顯效率+有效率
表I復方硝唑尼特納米乳劑治療家兔魏氏梭菌感染藥效試驗結果
權利要求
1.一種水包油型復方硝唑尼特納米乳，其特征在于，由下列質量百分比的原料組成 表面活性劑19. 0% 35. 0%、助表面活性劑0 7. 0%、硝唑尼特0. 01% 0. 21%、肉桂醛0.1% 8. 0%、余量為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100% ；所述的表面活性劑是聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油、聚氧乙烯醚蓖麻油和吐溫-80中的任一種或兩種混合物；所述的助表面活性劑是無水乙醇。
2.根據權利要求I所述的一種水包油型復方硝唑尼特納米乳，其特征在于，該納米乳的粒徑在I IOOnm之間。
3.根據權利要求I所述的一種水包油型復方硝唑尼特納米乳的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟1)按配方準確稱取表面活性劑、助表面活性劑、硝唑尼特、肉桂醛、蒸餾水，備用；2)將硝唑尼特溶解于肉桂醛中充分攪拌均勻作為油相；3)將表面活性劑和助表面活性劑混合后加入到油相中并充分攪拌均勻；4)向步驟3)制備的溶液是中緩慢滴加蒸餾水，邊加邊攪拌，加水和攪拌過程中該混合物體系會出現由稀變粘稠，最后又由粘稠變稀的一系列變化，直至最終澄清透明即形成水包油型復方硝唑尼特納米乳組合物。
全文摘要
本發明公開了一種水包油型復方硝唑尼特納米乳組合物，該納米乳粒徑在1~100nm之間，由下列質量百分比的原料組成表面活性劑19.0%～35.0%、助表面活性劑0～7.0%、硝唑尼特0.01%～0.21%、肉桂醛0.1%～8.0%余量為蒸餾水，上述原料的質量百分比之和為100%。該納米乳提高了硝唑尼特的溶解度和藥物的生物利用度，增強了藥物療效，減少了藥物用量，具有較強的抗原蟲、蠕蟲、細菌和病毒的活性，用于人或畜禽原蟲、蠕蟲、細菌和病毒等感染引起的疾病的治療。本發明使用安全、療效顯著，制備方法簡單，便于推廣應用，在醫藥領域有廣闊的市場前景。
文檔編號A61K9/107GK102526039SQ201210055708
公開日2012年7月4日 申請日期2012年3月6日 優先權日2012年3月6日
發明者歐陽五慶, 沈巧艷, 郭建軍 申請人:西北農林科技大學