專利名稱：一種益母草生物堿和膽堿的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明屬于藥物組合物領域，特別涉及一種益母草生物堿和膽堿或其藥用鹽的組合物、其制備方法、及其用途。
背景技術：
目前，產后出血仍是導致我國孕產婦死亡最主要的原因。陰道分娩產后出血發生率占分娩總數的3% 5%。引起產后出血的主要原因有子宮收縮乏力、胎盤因素、軟產道損傷和凝血功能障礙。其中，子宮收縮乏力是導致出血最常見的原因。產カ包括子宮收縮力、腹壁肌和膈肌收縮カ以及肛提肌收縮力，其中以子宮收縮カ為主。在分娩過程中，子宮收縮的節律性、対稱性及極性不正常或強度、頻率有改變，稱為 子宮收縮カ異常。臨床上多因產道或胎兒因素異常形成梗阻性難產，使胎兒通過產道阻力増加，導致繼發性產カ異常。子宮收縮力異常臨床上分為子宮收縮乏力和子宮收縮過強兩類，每類又發為協調性子宮收縮和不協調性子宮收縮。子宮收縮乏力多由幾個因素綜合引起，常見的原因有1.頭盆不稱或胎位異常胎兒先露部下降受阻，不能緊貼子宮下段及宮頸，因而不能引起反射性子宮收縮，導致繼發性子宮收縮乏力。2.子宮因素子宮發育不良、子宮畸形(如雙角子宮等)、子宮壁過度膨脹(如雙胎、巨大胎兒、羊水過多等)、經產婦(multipara)子宮肌纖維變性或子宮肌瘤等，均能引起子宮收縮乏力。3.精神因素初產婦(primipara)[尤其是35歲以上高齡初產婦(elderly primipara)],精神過度緊張使大腦皮層功能紊亂,睡眠少，臨產后進食少以及過多地消耗體力，均可導致子宮收縮乏力。4.內分泌失調臨產后，產婦體內雌激素、催產素、前列腺素、こ酰膽堿等分泌不足，孕激素下降緩慢，子宮對こ酰膽堿的敏感性降低等，均可影響子宮肌興奮閾，致使子宮收縮乏力。5.藥物影響臨產后不適當地使用大劑量鎮靜劑與鎮痛劑，如嗎啡、氯丙嗪、度冷丁、巴比妥等，可以使子宮收縮受到抑制。近年來，隨著我國產科治療水平不斷提高，麻醉技術不斷改善，剖宮產逐漸成為解決難產和產科并發癥、合并癥的主要治療措施，但是如何減少剖宮產術中、術后的出血量，仍是困擾我國產科醫師的主要問題之一。目前縮宮藥物最常用的是縮宮素。它便宜、使用方便，但存在較大的個體差異，前列腺素類縮宮藥物價格較昂貴、變態反應較重。益母草治療產后出血，在我國已有上千年的歷史，其ロ服治療產后出血有效，且安全可靠。益母草為唇形科植物益母草(Leonurus heterophyllus Sweet)的嫩莖葉。益母草嫩莖葉含有蛋白質、碳水化合物等多種營養成分，性味辛苦涼，具有活血、祛瘀、調經、消水的功效，治月經不調、浮腫下水、尿血、瀉血、痢疾、痔疾。益母草中含益母草堿(Leonurine)、水蘇堿(Stachydrine)、益母草定(Leonuridine)、益母草寧(Leonurinine)、亞麻酸(Linolenic acid)、β-亞麻酸、月桂酸(Laurie acid)、油酸、苯甲酸、蕓香式(Rutin)、延胡索酸(Fumaric acid)、留醇、維生素A等。此外亦含精氨酸、4-胍基-I-丁醇(4-Guanidino-l-butanol)、4_胍基丁酸(4-Guanidino-butyric acid)、水蘇糖(Stachyose)。尚提取得五種結晶物質,兩種為生物堿即益母草堿甲、乙;三種為非生物堿，即益母草素甲、こ、丙。益母草對子宮具有興奮作用。益母草煎劑、水浸或こ醇浸膏及益母草總堿對豚鼠、兔、貓、犬等多種動物的子宮均有興奮作用。實驗證明，益母草煎劑對未孕、早孕、晩期妊娠或產后離體兔子宮，均有興奮作用。快速靜脈注射于在位子宮，半分鐘后即出現興奮作用，其強度和作用時間隨用量加大而增加。兔子宮瘺試驗，用益母草煎劑灌胃，當子宮內加壓或未加壓時，均于給藥15 20分鐘后，使子宮呈顯著的興奮作用。益母草總堿對豚鼠離體子宮有興奮作用，其作用類似麥角新堿。益母草總生物堿3mg與馬來酸麥角新堿O. 04mg的效價相當。益母草水浸或こ醇浸膏對離體及在位子宮均有顯著興奮作用。但對在位子宮，興奮前先有一短時間的抑制作用，經こ醚提取后之水溶液，則無此抑制作用。因此，益母草中可能含有抑制性和興奮性ニ種成分。益母草堿能使動情前期或卵巣切除后肌注雌ニ醇50mg的大鼠離體子宮振幅増加，其作用與劑量相關，表現為劑量-張カ呈線性關系。益母草堿對子宮的收縮作用可持續幾個小時，但沖洗后可恢復。阿托品2mg/ml不影響其收縮。益母草堿甲2. 5 5mg/kg給麻醉貓靜脈注射，對子宮有興奮作用，能増加子宮張力，井能降壓；對貓、豚鼠離體子宮亦有興奮作用。經蒸餾法制得的益母草針劑卻無子宮收縮作用。益母草水煎劑給小鼠ロ服4 5次(總量200 250mg)，有一定的抗著床和抗早孕作用.有報告指出，益母草興奮子宮的有效成分主要存在于葉部，根部作用很弱，基部無效。膽堿英文名稱為Choline,分子式為C5H15NO2,分子量為12L 18,是一種強有機堿，是卵磷脂的組成成分，也存在于神經鞘磷脂之中，是機體可變甲基的ー個來源而作用于合成甲基的產物，同時又是こ酰膽堿的前體。膽堿耐熱，在加工和烹調過程中的損失很少，干燥環境下，即使很長時間儲存食物中膽堿含量也幾乎沒有變化。膽堿是卵磷脂的鞘磷脂的重要組成部分，卵磷脂即是磷脂酰膽堿，廣泛存在于動植物中。膽堿呈無色味苦的水溶性白色漿液，有很強的吸濕性，暴露于空氣中能很快吸水。膽堿容易與酸反應生成更穩定的結晶鹽(如氯化膽堿)，在強堿條件下也不穩定，但對熱和儲存相當穩定。由于膽堿耐熱，因此在加工和烹調過程中的損失很少，干燥環境下即使長時間儲存食物中膽堿含量也幾乎沒有變化。膽堿是卵磷脂和鞘磷脂的重要組成部分，卵磷脂即是磷脂酰膽堿(phosphalidychlines)，廣泛存在于動植物體內，在動物的腦、精液、腎上腺及細胞中含量尤多，以禽卵卵黃中的含量最為豐富，達干重的8% 10%。鞘磷脂(sphingomyelin)是神經醇磷脂的典型代表，在高等動物組織中含量最豐富，它由神經氨基醇、脂肪酸、磷脂及膽堿組成。

發明內容
本發明的目的之ー是提供一種新的藥物組合物，本發明的藥物組合物含有益母草生物堿和膽堿。本發明中的益母草生物堿選自水蘇堿、益母草堿、益母草定、益母草寧、益母草堿甲、益母草堿こ中的ー種或多種，還可以是益母草提取物，益母草提取物包括但不限于益母草水提物和益母草醇提物。本發明中的益母草生物堿優選水蘇堿、益母草堿或益母草寧，更優選水蘇堿。本發明中的膽堿可以是游離堿的形式，也可以是其藥用鹽的形式，膽堿藥用鹽包括但不限于氯化膽堿、琥珀酸膽堿。本發明中的膽堿優選為游離堿的形式。 本發明藥物組合物中益母草生物堿與膽堿的重量比為100 1-1 100，優選益母草生物堿與膽堿的重量比為10 1-1 10。本發明研究人員驚奇地發現膽堿能夠明顯增強益母草生物堿抑制大鼠子宮出血的作用。本發明的組合物通過將益母草生物堿和膽堿直接混合，或者用適宜溶劑或藥用輔料混合制備。本發明中的水蘇堿可以按照文獻報道的方法通過化學合成或從植物中提取制 備。例如，何黎琴等報道了水蘇堿的合成方法(水蘇堿合成エ藝研究，華西藥學雜志，2005，20(1) 50-51) ο本發明中的益母草堿可以依據專利申請(申請公開號CN1415602)中提供的方法制備。本發明的藥物組合物通過加入合適的藥用輔料，可以制成不同的藥物制劑，本發明藥物組合物可以制成的藥物制劑包括但不限于注射劑、粉針劑、片劑、膠囊、軟膠囊、丸劑、滴丸劑、顆粒劑、ロ服液、糖漿劑、散劑、膏劑、油剤、栓劑、涂膜劑、凝膠劑。例如，本發明藥物組合物制成的片劑可以根據需要加入粘合剤、崩解劑、填充劑、濕潤劑、潤滑劑等。其中填充劑選自淀粉、糖粉、糊精、乳糖、預膠化淀粉、微晶纖維素、無機鹽類、甘露醇等。其中濕潤劑和粘合劑選自蒸餾水、こ醇、淀粉漿、羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、甲基纖維素和こ基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚こ烯吡咯烷酮、明膠溶液、蔗糖溶液等等。其中崩解劑選自干淀粉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素、交聯聚こ烯吡咯烷酮、交聯羧甲基纖維素鈉等等。其中潤滑劑選自硬脂酸鎂、硅膠、滑石粉、氫化植物油、聚こニ醇等等。在本發明的具體實施方式
中，膽堿和水蘇堿在對孕豚鼠離體子宮平滑肌收縮作用試驗中表現出協同作用。采用大鼠藥物流產后子宮出血模型考察本發明的藥物組合物對大鼠子宮出血的影響，發現膽堿能明顯增強益母草生物堿的止血作用，膽堿和益母草生物堿具有協同作用。本發明的藥物組合物制成的藥物制劑可以用于治療功能性子宮出血；人流、藥流(中期引產)、自然流產后陰道出血；更年期綜合癥；產后妊娠斑、月經不調，經血過多，閉經，痛經(經期腹痛、小腹脹痛、腰酸腿痛等)；崩漏(經血來勢兇猛量多而不止謂之崩；經血淋漓不斷謂之漏)；產后惡露不盡、胎盤滯留等。本發明的藥物組合物的藥物制劑還可臨床用于改善心肌供血緩解心絞痛、降低血粘度、降血脂等。本發明的藥物組合物還可在制備化妝品、日用品中應用。
具體實施例方式以下實施例用于進ー步闡釋本發明，并不構成對本發明的限制。實施例I對孕豚鼠離體子宮平滑肌收縮作用英國種孕豚鼠產后24h內，進行試驗。于實驗當天用鉄器猛擊頭部處死豚鼠，仰位固定在手術盤中，中下腹部作一“V”字切ロ，找出子宮，分離周圍組織，取輸卵管至子宮分叉處之間的中段子宮約I. 5-2cm，剪除周圍組織，沿系膜縱軸剖開子宮角，在臺氏液中漂洗干凈。將其平鋪在含有臺氏液(溫度37°C ±0. 5°C)的培養皿中，用眼科鑷固定子宮條，沿平滑肌纖維方向取寬為5mm的縱行肌條，備用。用縫合線將肌條打結，另一端打結后再結ー個直徑約O. 5cm的環，并將環接到傳感器上。置入60ml臺氏浴皿中，放入恒溫水浴槽。張カ換能器與BL-410系統的輸入接ロCH-I連接。設定負荷調至1±0. lg，水溫恒定在37°C ±0. 5°C，供O2 60個氣泡/min。待肌條的自發活動平穩后再注入不同濃度的供試品和陽性對照品。調試BL-410系統，選擇I通道，設置相應參數(G100，TDC, F30HZ)、掃描速度64S/
diVo由于孕豚鼠分娩期的不確定性，故按孕鼠分娩的先后順序將28只產后豚鼠輪流分入陽性對照組(I組)，水蘇堿+膽堿組(2組)，膽堿組(3組)，水蘇堿組(4組)。
檢測參數選擇如下頻率(次/min)—每分鐘的收縮次數張カ(mg) —各收縮的最低點強度(mg)—各收縮的最高點子宮收縮振幅(mg)=強度-張カΔ頻率(次/min)=給藥后頻率-給藥前頻率Δ張カ(mg)=給藥后張力-給藥前張カΔ強度(mg)=給藥后強度-給藥前強度Δ子宮收縮振幅(mg)=給藥后子宮收縮振幅-給藥前子宮收縮振幅陽性對照組向容皿中注入60ml臺氏液(37°C ±0. 5°C )，觀察記錄正常情況下肌條收縮頻率、收縮波平均振幅、收縮波間隔平均持續時間和平滑肌條的張力20-25min。向60ml臺氏液容皿中注入10 μ /ml縮宮素O. 18ml (終濃度為O. 03 μ /ml)，記錄給藥后25min內上述相同指標數值。放空容皿中的溶液，用臺氏液沖洗2-3次，然后向容皿中注入60ml臺氏液(37°C ±0. 5°C)，平衡并記錄20-25min，再向60ml臺氏液容皿中注入10 μ/ml縮宮素O. 36ml (終濃度為O. 06 μ /ml),記錄給藥后25min內上述相同指標數值作為效應值。更換2次肌條，同法重復2次上述步驟，測得相同指標數值作為效應值。水蘇堿+膽堿組先觀察記錄正常情況下肌條收縮頻率、收縮波平均振幅、收縮波間隔平均持續時間和平滑肌條的張力20-25min。向60ml臺氏液容皿中注入20mg/ml濃縮液I. 5ml (終濃度為O. 5mg/ml)，記錄給藥后25min內上述相同指標數值。放空容皿中的溶液，用臺氏液沖洗2-3次，然后向容皿中注入60ml臺氏液(37°C ±0. 5°C )，平衡肌條并記錄20-25min,再向60ml臺氏液容皿中注入20mg/ml濃縮液3ml (終濃度為I. Omg/ml),記錄給藥后25min內上述相同指標數值作為效應值。更換2次肌條，同法重復2次上述步驟，測得相同指標數值作為效應值。膽堿組、水蘇堿組給藥和試驗方法同水蘇堿+膽堿組。表I對產后豚鼠離體子宮平滑肌的作用試驗的劑量設置和分組表
權利要求
1.一種藥物組合物，含有益母草生物堿和膽堿，其中膽堿可以是游離堿的形式，也可以是膽堿藥用鹽的形式。
2.權利要求I所述的藥物組合物，其中益母草生物堿選自水蘇堿、益母草堿、益母草定、益母草寧、益母草堿甲、益母草堿乙中的一種或多種，還可以是益母草提取物。
3.權利要求I所述的藥物組合物，其中膽堿藥用鹽包括但不限于氯化膽堿、琥珀酸膽堿。
4.權利要求1-3任一所述的藥物組合物，其中益母草生物堿與膽堿的重量比為100 1-1 100。
5.權利要求4所述的藥物組合物，其中益母草生物堿與膽堿的重量比為10 1-1 10。
6.權利要求5所述的藥物組合物，其中膽堿是游離堿的形式。
7.權利要求4藥物組合物制備成的藥物制劑，包括但不限于注射劑、粉針劑、片劑、膠囊、軟膠囊、丸劑、滴丸劑、顆粒劑、口服液、糖漿劑、散劑、膏劑、油劑、栓劑、涂膜劑、凝膠劑。
8.權利要求4藥物組合物在制備治療功能性子宮出血；產后出血；人流、藥流、自然流產后陰道出血(產后惡露不盡、胎盤滯留)；更年期綜合癥；月經不調，經血過多，閉經，痛經等，用于改善心、腦血管供血、降低血粘度、降血脂等臨床藥物中的應用。
9.權利要求4藥物組合物在制備化妝品、日用品中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種益母草生物堿與膽堿的藥物組合物，尤其是水蘇堿和或益母草堿與膽堿的藥物組合物，其制備方法及其用途。
文檔編號A61P7/04GK102670592SQ201210155378
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月18日 優先權日2012年5月18日
發明者劉昭華 申請人:成都第一藥業有限公司