專利名稱：一種納米參芪扶正注射制劑的制備方法及其應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于中藥制藥技術領域，具體涉及一種納米參芪扶正注射制劑的制備方法及其應用。
背景技術：
納米中藥主要是指運用納米技術制造的，粒徑小于100納米的中藥有效成分、有效部位、原藥及復方制劑。納米中藥的制備是研究納米中藥最基礎、最重要的問題。將納米技術引入中藥的研究時，必須考慮中藥組方的多樣性、中藥成分的復雜性。中藥的有效部位和有效成分又包括無機化合物和有機化合物、水溶性成分和脂溶性成分等。因此，針對不同的藥物，在進行納米化時必須采用不同的技術路線。納米中藥與中藥新制劑關系十分密切，如何在中藥理論的指導下進行納米中藥新制劑的研究，將中藥制成高效、速效、長效、計量小、低毒、服用方便的現代制劑，也是進行中藥納米化時必須考慮的問題。
參芪扶正注射液是采用我國傳統扶正補氣藥物黨參、黃芪為主要原料，采用水提取醇沉淀的方法分離出有效成分配制而成的靜脈型大輸液，具有扶正固本、益氣補虛的功效，與化療合用有助于提高療效，保護血象，可改善患者免疫功能，改善氣虛癥狀及生存質量。經多年的臨床應用表明，參芪扶正注射液有抑制腫瘤細胞生長的作用，對氣虛型的晚期腫瘤患者有較好的治療效果，具有益氣健脾、補氣養血的扶正作用，可與化療配合，用于氣虛證肺癌、胃癌的輔助治療，是一種理想的抗腫瘤輔助中成藥。
由于腫瘤患者體質虛弱，氣血不足的病理特點帶有普遍性和根本性，因此扶助正氣，補益氣血是治療腫瘤的根本法則。參芪扶正注射液用于氣虛證腫瘤病人的治療，可改善患者的氣虛癥狀，提高生存質量。但是，參芪扶正注射液在臨床應用中劑型為液體輸液，穩定性較差，貯存一定時間后往往出現pH值的改變，引起外觀色澤變深，甚至出現渾濁和沉淀，使澄明度不合格；此外，參芪扶正注射液在臨床應用中曾有少數患者出現低熱、口腔炎、嗜睡等不良反應。這些癥狀可能與患者長期患有癌癥，身體虛弱，對藥物耐受性差等因素有關。
申請號為01100151.8“納米參芪制劑藥物及其制備方法”的專利中只是單純的將黨參和黃芪兩味中藥粉碎成納米級顆粒，并沒有藥理試驗證明該制劑的藥理作用，只是泛泛的說生物利用度提高，實用性不強。

發明內容
基于上述原因，本發明研究人員經過大量試驗研究，運用中藥納米技術，將參芪扶正注射液制備成本發明納米注射制劑，該方法簡便，易于大生產，采用本發明方法制備的制劑有明顯的靶向作用，溶解性好、理化性質穩定、載藥量大并且制劑穩定性顯著提高，本發明制劑安全性更好、刺激性小，能顯著提高扶正固本、益氣補虛等功效。本發明制劑能顯著提高癌癥病人的生活質量，減輕化療后癌癥病人的疾病痛苦。藥理研究表明該制劑在活血化瘀、補氣養血、提高機體免疫力、輔助癌癥晚期的治療效果等藥效作用方面均有顯著性提高。
本發明旨在提供一種穩定、安全、療效好、具有靶向作用的納米參芪扶正注射制劑。
本發明與參芪扶正注射液比較，其特征在于采用本發明工藝將黨參、黃芪有效部位制備成達到納米粒徑的制劑，采用本發明方法制備的納米制劑具有顯著的靶向性。
本發明旨在應用納米技術將中藥復方制備成納米注射制劑，使其療效顯著提高。
本發明還提供了納米參芪扶正注射制劑的制備方法。
本發明通過以下技術方案實現一、工藝制法(1)有效部位的制備按照中成藥部頒標準[ws-459(z-065)和ws-387(z-50)-99]項下的制備方法提取純化，黨參和黃芪最后濾液減壓回收乙醇至干，得到有效部位。
(2)制劑處方重量份組成為有效部位1-5重量份，藥用載體6-30重量份；(3)主藥混懸液的制備方法取有效部位、乳化劑和脂質，在通氮氣條件下加熱至70-90℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer-188的水溶液，制成粗乳，在70-90℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(或高速剪切乳勻)在35-45MPa壓力下乳勻5-7次，充氮氣分裝后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
(4)制劑的制備水針制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正水針制劑；輸液制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，加入氯化鈉或葡萄糖調等滲，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正輸液制劑；凍干粉針制劑的制備取上述混懸液，加入賦形劑，加注射用水調整濃度，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成本發明納米參芪扶正凍干粉針制劑。
上述制備方法中，脂質、乳化劑統稱為載體。
本發明所用的脂質可以選用脂肪酸甘油酯類(包括三硬脂酸甘油酯、三棕櫚酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35、Witepsol H35、Witepsol H42、單硬脂酸甘油酯)及脂肪酸類(如硬脂酸、棕櫚酸)中的一種或幾種。
本發明所用乳化劑可以選用磷脂(包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂及磷脂酰膽堿等)、Pluronic F-68、泊洛沙姆、聚山梨醇、膽酸鹽、四丁酚醛中的一種或幾種。
本發明主藥混懸液制備方法中溫度優選為75℃-85℃本發明的一種納米參芪扶正注射制劑的水針劑、輸液劑中加入少量PVP(聚乙烯吡咯烷酮)，可以提高制劑的穩定性。
本發明的一種納米參芪扶正注射制劑的凍干粉針制劑的賦形劑為甘露醇、葡萄糖、乳糖、右旋糖酐、葡聚糖中的一種或兩種。
將主藥應用納米技術制備成納米藥物，提高了藥物血腦屏障的透過率。但是透過率的大小與藥物的載體及制備溫度有密切關系，脂質、乳化劑的選擇及其它們的比例關系，溫度的選擇都對藥物透過血腦屏障有很大的影響，為了確保本發明制劑能最大最有效的透過血腦屏障，本實驗室研究人員對脂質、乳化劑、溫度等相關條件進行了優選實驗，最終得到本發明納米參芪扶正注射制劑，該制劑在臨床治療方面得到了很好的臨床治療效果。
二、優選試驗本發明優選實驗以藥物在腦脊液中的濃度為指標。具體實驗方法為取新西蘭家兔，體重約2.5kg，雌雄不限。靜脈注射納米參芪扶正注射液(生藥)1.2g/kg，于給藥后20分鐘抽取0.5ml腦脊液進行實驗。取腦脊液0.25ml加溶劑混懸15min后，靜置15min，以10000r/min離心1min，取上清液20μl進樣，以毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷為指標，用高效液相色譜法(HPLC法)測定。
1.不同脂質對主藥透過血腦屏障的影響制備一系列藥物，其中主藥、乳化劑的種類和用量相同，脂質按下表的設計進行安排，測定腦脊液中的藥物濃度。實驗結果見表1。
為了比較方便，將測定的兔腦脊液中的最大濃度計為100％。
表1不同脂質對主藥透過血腦屏障的影響

由上述實驗結果可以看出，不同脂質對主藥通過血腦屏障有影響，均可以增加主藥對于血腦屏障的通透性，其中三硬脂酸甘油酯和三月桂酸甘油酯的作用效果最好。
2.不同乳化劑對主藥透過血腦屏障的影響制備一系列藥物，其中主藥、脂質的種類和用量相同，乳化劑按下表的設計進行安排，測定腦脊液中的藥物濃度。實驗結果見表2。
為了比較方便，將測定的兔腦脊液中的最大濃度計為100％。
表2不同乳化劑對主藥透過血腦屏障的影響


由上述實驗結果可以看出，不同乳化劑對主藥通過血腦屏障有影響，均可以增加主藥對于血腦屏障的通透性，其中大豆卵磷脂和蛋黃卵磷脂的作用效果最好。
3.脂質和乳化劑用量比例的選擇制備一系列藥物，脂質和乳化劑用量按下表的設計進行安排。測定了500個粒徑，計算平均粒徑。結果見表3。
表3脂質和乳化劑用量比例的選擇

由上述實驗結果可以看出，當脂質和乳化劑、助乳化劑用量為4-6∶2時，粒徑較小。
4.溫度的選擇制備一系列藥物，主藥、脂質、乳化劑的種類和用量相同，在不同溫度下制備藥物，以包封率為指標。結果見表4。
表4溫度的選擇

由上述實驗結果可以看出，當溫度在65-90℃時，包封率較好；當溫度為75-85℃時，包封率最好。
三、質量標準標準依據《中國藥典》2005年版附錄XIX E“微囊、微球與脂質體制劑指導原則”中的方法。H-7000型透射電鏡儀(日本Hitachi公司)；Zetamaster光子相關光譜儀(英國Malvern公司)；LC-10A高效液相色譜儀(日本島津)；TGL-18G型臺式高速離心機。
1.形態觀察及粒徑將本專利納米藥物在透射電鏡下進行形態觀察，可見呈圓球體，大小較均勻，表面光滑，無粘連。根據納米藥物的光學顯微照片測定了500個，平均粒徑為55±10nm，最大粒徑為120nm，最小粒徑為45nm，且粒徑分布符合正態分布規律。
2.包封率和載藥量測定采用反相高效液相色譜法進行含量測定，并用下述公式計算包封率和載藥量包封率(％)＝(投藥量-游離藥物量)/投藥量×100％；載藥量(％)＝(投藥量-游離藥物量)/納米藥物的重量×100％。
結果包封率為90.8％，載藥量為8％-20％。
3.穩定性考察將納米藥物分別置于小瓶內，密封。于冰箱(3-5℃)、室溫(20-25℃)和37℃(RH75％)的環境中放置，于0、1、2和3月觀測納米藥物的外觀、大小、再分散性等。結果均未見明顯變化，3種條件下的納米藥物再分散性保持良好，無聚合現象的發生。結果見表5。
表5穩定性實驗結果


4.加速實驗含量測定參芪扶正注射液(麗珠集團制藥廠生產)；本發明納米參芪扶正注射制劑(按本發明制備工藝制備，由北京聯合偉華藥業中藥實驗室提供)；將以上制劑分別置40℃，RH75％條件下放置6個月，分別測定制劑中的成分毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量，考察加速條件下納米參芪扶正制劑含量的變化(以0月含量為100％計算)。結果見表6。
表6制劑穩定性試驗毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量測定結果

試驗結果表明在加速實驗過程中參芪扶正注射液的毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量下降明顯，而采用本發明方法制備的納米參芪扶正注射制劑變化較小，說明本發明納米參芪扶正制劑的制備方法顯著提高了制劑的質量和穩定性，具有重要的實際意義。
結論通過上述實驗表明，本專利納米藥物具有很好的穩定性，充分說明本發明工藝具有實際意義。
四、藥理和耙向試驗試藥與動物參芪扶正注射液(麗珠集團利民制藥廠生產)；本發明納米參芪扶正注射制劑(按本發明制備工藝制備，由北京聯合偉華藥業中藥實驗室提供)；Wistar大鼠，體重180-220g；健康昆明種小鼠，體重18-22g；瘤株小鼠S180，小鼠肝癌Heps、人中分化胃癌細胞株MKN-45(中國醫學科學院腫瘤所動物中心)。
1.抗腫瘤試驗1.1對小鼠移植性肝癌Heps的影響和靶向作用無菌抽取接種后第7d的肝癌Heps荷瘤小鼠腹水，加4倍量生理鹽水混勻，立即接種于小鼠右前肢腋窩處皮下，每只接種0.2ml，接種后24h隨機分組，每組10只，小鼠尾靜脈注射給藥，給藥劑量相當于1.2g生藥/kg，給藥容積同為0.2ml/只，對照組給予等量生理鹽水，每日給藥1次，連續給藥10d，于末次給藥后24h脫頸處死小鼠，剝取腫瘤稱重，取腫瘤細胞然后按組織∶生理鹽水為1∶1.5(W/V)的比例勻漿，離心10min(2000rpm)，取上清液用HPLC法測定毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量。同時末次給藥后1h取血測定血清中的毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的濃度。結果見表7、表8。
表7對移植性肝癌Heps小鼠的影響

注與生理鹽水組比較**P＜0.01，與參芪扶正注射液組比較ΔP＜0.01表8對移植性肝癌Heps的靶向作用

結果表明本發明納米參芪扶正注射制劑能顯著抑制小鼠移植性肝癌Heps的生長，具有比參芪扶正注射液更好的藥理作用，本發明納米注射制劑與參芪扶正注射液比較血清中藥物濃度相當，而腫瘤細胞中有效成分含量顯著增加，表明本發明納米注射制劑對腫瘤細胞具有較好的靶向性。
1.2對人中分化胃癌細胞株MKN-45的影響和靶向作用無菌抽取接種后第7d的胃癌細胞株MKN-45荷瘤小鼠腹水，加4倍量生理鹽水混勻，立即接種于小鼠右前肢腋窩處皮下，每只接種0.2ml，接種后24h隨機分組，每組10只，小鼠尾靜脈注射給藥，給藥劑量相當于1.2g生藥/kg，給藥容積同為0.2ml/只，對照組給予等量生理鹽水，每日給藥1次，連續給藥10d，于末次給藥后24h脫頸處死小鼠，剝取腫瘤稱重，取腫瘤細胞然后按組織∶生理鹽水為1∶1.5(W/V)的比例勻漿，離心10min(2000rpm)，取上清液用HPLC法測定毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量。同時末次給藥后1h取血測定血清中的毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的濃度。結果見表9、表10。
表9對人中分化胃癌細胞株MKN-45小鼠的影響

注與生理鹽水組比較**P＜0.01，與參芪扶正注射液組比較ΔP＜0.01表10對人中分化胃癌細胞株MKN-45的靶向作用

結果表明本發明納米參芪扶正注射制劑能顯著抑制人中分化胃癌細胞株MKN-45的生長，具有比參芪扶正注射液更好的藥理作用，本發明納米注射制劑與參芪扶正注射液比較血清中藥物濃度相當，而腫瘤細胞中有效成分含量顯著增加，表明本發明納米注射制劑對腫瘤細胞具有較好的靶向性。
1.3對小鼠S180腫瘤的抑制作用和靶向作用取接種傳代小鼠S180，在勻漿器中加入生理鹽水，制成小鼠S180瘤勻漿液，再以生理鹽水1∶3稀釋，然后取0.2ml注入小鼠左腋皮下，24小時稱重，分組，每組10只，給藥組小鼠每日尾靜脈給藥一次，給藥劑量為1.2g生藥/kg，給藥容積同為0.2ml/只，對照組給予等量生理鹽水，共7天。停藥次日處死小鼠，稱體重并細心剝離皮下瘤塊，于EM50電子天平稱取瘤重，并計算抑瘤率，將稱重后的瘤塊按組織∶生理鹽水為1∶1.5(W/V)的比例勻漿，離心10min(2000rpm)，取上清液，用HPLC法測定腫瘤組織和血清中的毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量。同時末次給藥后1h取血測定血清中的毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的濃度。結果見表11、表12。
表11對小鼠S180腫瘤生長抑制作用

注與生理鹽水組比較**P＜0.01，與參芪扶正注射液比較ΔP＜0.01表12對小鼠S180腫瘤的靶向作用

結果表明本發明納米參芪扶正注射制劑能顯著抑制小鼠腫瘤S180生長，具有比參芪扶正注射液更好的藥理作用，本發明納米注射制劑與參芪扶正注射液比較血清中藥物濃度相當，而腫瘤細胞中有效成分顯著增加，表明本發明納米注射制劑具有較好的靶向性。
1.4對荷瘤S180小鼠死亡率和存活時間的影響取接種傳代小鼠S180，在勻漿器中加入生理鹽水，制成小鼠S180瘤勻漿液，再以生理鹽水1∶3稀釋，然后取0.2ml注入小鼠左腋皮下，于接種腫瘤后一周，小鼠尾靜脈注射給藥，給藥劑量相當于1.2g生藥/kg，給藥容積同為0.2ml/只，對照組給予等量生理鹽水，每日給藥1次，讓其自然死亡，待對照組動物全部死亡后，比較死亡率，并比較90天各組動物的存活時間差異，設給藥組與對照組，每組小鼠20只，結果見表13。
表13對小鼠死亡率和存活時間的影響

注與生理鹽水組比較**P＜0.01，與參芪扶正注射液組比較ΔP＜0.05結果表明本發明納米參芪扶正注射制劑能顯著降低荷瘤小鼠死亡率，延長荷瘤小鼠存活時間，與參芪扶正注射液比較作用更顯著。
2.對小鼠白細胞減少癥的影響取體重18-22g的昆明種小鼠50只，隨機分5組，每組10只，雌雄各半，即正常對照組、環磷酰胺組、參芪扶正注射液組、本發明納米參芪扶正注射制劑組。除正常對照組外均給予環磷酰胺100g/kg腹腔注射，每日1次，連續3日，同時各給藥組分別靜脈給藥，給藥劑量相當于生藥1.2g/kg，每天給藥2次，連續8天，分別于第4天和第8天由眼眶靜脈取血，鏡檢白細胞總數，結果見表14。
表14對小鼠白細胞減少癥的影響

注與正常對照組比較**P＜0.01，與參芪扶正注射液組比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01實驗結果表明，對于環磷酰胺所致的白細胞減少癥，本發明納米參芪扶正注射制劑組與參芪扶正注射液比較具有更好的升高白細胞作用。
3.血管刺激性考察取家兔8只，隨機均分2組，每組4只，分別于左耳把家兔置于固定器中，且頭用兔頭固定儀固定，用酒精將皮膚消毒后，于右側耳緣靜脈注射參芪扶正注射液和本發明納米參芪扶正注射制劑，給藥劑量相當于生藥1.2g/kg，于另一側對應部位注射同一體積的生理鹽水作為對照，每日注射1次，連續1周，觀察兔耳緣靜脈反應，每日觀察注射部位血管有無發紅、水腫、周圍有無滲血，觸摸血管有無變硬現象，左右耳比較觀察。于末次給藥后24h，將動物處死，取下兩耳，進行組織切片檢查，切片部位為進針部位的向心端，距進針部位1-4cm，分1-2.5cm和2.5-4cm兩段取樣。
觀察指標及評分標準觀察方法包括肉眼觀察和顯微鏡下病理觀察。觀察給藥血管及其周圍組織的變化，顯微鏡下觀察耳緣靜脈有無血栓形成、內皮損傷及血管周圍組織的病理變化情況。對各項指標評分。①血管變化肉眼觀察無明顯充血記0分，輕度充血發紅、紋路清晰記1分，充血發紅、紋路不清記2分，重度充血、呈紫紅色記3分；顯微鏡觀察血管內皮及血管壁完整記0分，有內皮損傷記1分，有血栓栓塞記2分，血管破裂記3分。②血管周圍組織變化肉眼觀察無明顯水腫記0分，輕微水腫記1分，明顯水腫記2分，嚴重水腫記3分；顯微鏡觀察周圍組織正常記0分，水腫記1分，出血記2分，有炎癥細胞浸潤記3分。將每組4只家兔各項觀察指標得分累加，計算各組平均得分值，見表15。
表15刺激性試驗結果

由以上實驗結果可知本發明納米參芪扶正注射制劑與參芪扶正注射液比較刺激性具有明顯改善。
4.溶血毒性考察2％紅細胞混懸液的制備取兔耳緣靜脈取血10-20ml，放入盛有玻璃珠的錐形瓶中，振搖10分鐘，除去纖維蛋白原，使成脫纖血。加10倍量的生理鹽水溶液，搖勻，離心，除去上清液，沉淀的紅細胞再用生理鹽水溶液洗滌2-3次，至上清液不呈紅色時為止。將所得的紅細胞用生理鹽水配成濃度為2％的混懸液，即得。
試驗方法取試管6支，按表中的配比量依次加入2％紅細胞混懸液和生理鹽水溶液，混勻，于37℃恒溫箱中放置30分鐘，分別加入不同量的藥液(以第6管為空白對照)，搖勻后，置37℃恒溫箱中，開始每隔15分鐘觀察1次，1小時后，每隔1小時觀察1次，共觀察2小時。結果見表16。
表16溶血實驗結果

結果以第3試管為準，各管均未染有紅色，顯微鏡下觀察未見有紅細胞破裂，說明本品不溶血，安全性好。
5.急性毒性實驗取Wistar大鼠80只，雌雄各半。禁食24h，隨機分4組，每組20只。濃縮成相同的生藥濃度，各組分別尾靜脈注射藥物，給藥劑量按生藥量折算相當于1.2g生藥/kg，每天給藥3次，連續7天，觀察小鼠死亡情況，結果見表17。
表17急性毒性實驗結果


急性毒性實驗結果表明本發明納米參芪扶正注射制劑與參芪扶正注射液比較安全性更好。
6.靶向組織中藥物含量的測定取大鼠40只，體重約180-220g，雌雄不限，分為4組。靜脈注射本發明制劑和參芪扶正注射液1.2g/kg，30min后立即斷頭處死，取血漿和腦組織，取血漿離心10min(2000rpm)，取血清分析測定含量。取出的腦組織用生理鹽水輕輕沖洗，用濾紙吸干，腦膜血管剝離干凈后取兩側大腦皮層處組織，稱重。然后按組織∶生理鹽水＝1∶1.5(W/V)的比例勻漿，離心10min(2000rpm)，取上清液分析測定含量，計算結果以血清中用毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的絕對含量為1，計算其他組織中毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的相對含量，結果見表18。
表18各組織中毛蕊異黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量的測定(℃)

結果血清中藥物濃度相當，而靶向組織中藥物濃度顯著提高，說明本發明制劑具有一定靶向性。
小結以上藥理實驗結果表明本發明納米參芪扶正注射制劑藥理作用顯著好于參芪扶正注射液，且本發明納米參芪扶正注射制劑具有更好的靶向性和安全性。
五、制備實施例實施例1取黨參、黃芪藥材各400g，粉碎成粗粉，加入去離子水加熱提取3此，每次加水量分別為8倍、6倍、6倍。煎煮時間分別為1小時、1小時、0.5小時，合并3次提取液，濃縮至每1ml中含生藥量約為1.0-1.5g，攪拌下加入乙醇，使含乙醇量達60％，充分攪拌后靜置24小時，過濾，濾液回收乙醇并濃縮至每1ml含生藥量1.8-2.2g，攪拌下加入乙醇，使含乙醇量達80％，充分攪拌后冷處(2-10℃)靜置24小時，過濾，濾液減壓回收乙醇至干，濃縮至每1ml中含生藥量為1.8-2.2g，得到本發明參芪扶正有效部位。
實施例2(1)取有效部位5g、大豆卵磷脂12g和三月桂酸甘油酯18g，在通氮氣條件下加熱至75℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油4g和poloxamer-188 20g的水溶液，制成粗乳，在80℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(或高速剪切乳勻)在41.4MPa壓力下乳勻6次，充氮氣分裝后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
(2)制劑的制備水針制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正水針制劑1000支；輸液制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，加入氯化鈉調等滲，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正輸液制劑500瓶；凍干粉針制劑的制備取上述混懸液，加入甘露醇，加注射用水調整濃度，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成本發明納米參芪扶正凍干粉針制劑1000支。
將上述納米制劑進行檢測，其納米粒徑為45-120納米實施例3
(1)取有效部位10g、蛋黃卵磷脂24g和三硬脂酸甘油酯36g，在通氮氣條件下加熱至84℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油6g和poloxamer-188 35g的水溶液，制成粗乳，在88℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(或高速剪切乳勻)在42MPa壓力下乳勻4次，充氮氣分裝后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
(2)制劑的制備水針制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正水針制劑1000支；輸液制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，加入葡萄糖調等滲，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正輸液制劑500瓶；凍干粉針制劑的制備取上述混懸液，加入葡萄糖，加注射用水調整濃度，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成本發明納米參芪扶正凍干粉針制劑1000支。
將上述納米制劑進行檢測，其納米粒徑為45-120納米實施例4(1)取有效部位8g、磷脂酰膽堿15g和三棕櫚酸甘油酯25g，在通氮氣條件下加熱至82℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油4g和poloxamer-188 25g的水溶液，制成粗乳，在85℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(或高速剪切乳勻)在41.5MPa壓力下乳勻6次，充氮氣分裝后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
(2)制劑的制備水針制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正水針制劑1000支；輸液制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，加入葡萄糖調等滲，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正輸液制劑500瓶；凍干粉針制劑的制備取上述混懸液，加乳糖，加注射用水調整濃度，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成本發明納米參芪扶正凍干粉針制劑1000支。
將上述納米制劑進行檢測，其納米粒徑為45-120納米實施例5(1)取有效部位15g、泊洛沙姆30g和三肉豆蔻酸甘油酯50g，在通氮氣條件下加熱至80℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油10g和poloxamer-188 40g的水溶液，制成粗乳，在85℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(或高速剪切乳勻)在41MPa壓力下乳勻5次，充氮氣分裝后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
(2)制劑的制備水針制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正水針制劑1000支；輸液制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，加入葡萄糖調等滲，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正輸液制劑500瓶；凍干粉針制劑的制備取上述混懸液，加入右旋糖酐，加注射用水調整濃度，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成本發明納米參芪扶正凍干粉針制劑1000支。
將上述納米制劑進行檢測，其納米粒徑為45-120納米實施例6(1)取有效部位3g、聚山梨醇6g和三窬酸甘油酯10g，在通氮氣條件下加熱至85℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油2g和poloxamer-188 10g的水溶液，制成粗乳，在90℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(或高速剪切乳勻)在41.8MPa壓力下乳勻4次，充氮氣分裝后，迅速冷卻形成主藥混懸液。
(2)制劑的制備水針制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正水針制劑1000支；輸液制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，加入氯化鈉調等滲，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正輸液制劑500瓶；凍干粉針制劑的制備取上述混懸液，加入葡聚糖，加注射用水調整濃度，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成本發明納米參芪扶正凍干粉針制劑1000支。
將上述納米制劑進行檢測，其納米粒徑為45-120納米
權利要求
1.一種納米參芪扶正注射制劑，其特征在于該藥物組成包括有效部位1-5重量份，藥用載體6-30重量份；其特征還在于納米參芪扶正注射制劑中納米粒徑為45-120納米；
2.如權利要求1所述的納米參芪扶正注射制劑的制備方法，其特征包括以下步驟(1)制劑處方重量份組成為有效部位1-5重量份，藥用載體6-30重量份；(2)主藥混懸液的制備方法取有效部位、乳化劑和脂質，在通氮氣條件下加熱至70-90℃，在攪拌條件下加入相同溫度甘油和poloxamer-188的水溶液，制成粗乳，在70-90℃通氮氣條件下用高壓乳勻機在35-45MPa壓力下乳勻5-7次，充氮氣分裝后，迅速冷卻形成主藥混懸液；(3)制劑的制備水針制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正水針制劑；輸液制劑的制備取上述混懸液，加PVP適量，加注射用水至全量，攪勻，加入氯化鈉或葡萄糖調等滲，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成本發明納米參芪扶正輸液制劑；凍干粉針制劑的制備取上述混懸液，加入賦形劑，加注射用水調整濃度，調pH值為6.5-7.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成本發明納米參芪扶正凍干粉針制劑；
3.如權利要求1所述的納米參芪扶正注射制劑的制備方法，其特征在于所述的脂質為三硬脂酸甘油酯和三月桂酸甘油酯；
4.如權利要求1所述的納米參芪扶正注射制劑的制備方法，其特征在于所述的乳化劑為大豆卵磷脂和蛋黃卵磷脂；
5.如權利要求1所述的納米參芪扶正注射制劑的制備方法，其特征在于所述的脂質與乳化劑的用量比是4-6∶2；
6.如權利要求1所述的一種納米參芪扶正注射制劑的制備方法，其特征在于所述的溫度為75℃-85℃；
7.如權利要求1所述的一種納米參芪扶正注射制劑，其特征在于用作氣虛型癌癥的輔助治療；
全文摘要
本發明公開了一種納米參芪扶正注射制劑的制備方法及其應用，將黨參和黃芪的總提取物與適宜的藥用輔料采用本發明工藝方法制成納米載體，并制備成水針劑、凍干粉針劑和輸液劑。采用本發明方法制備的制劑有明顯的靶向作用，溶解性好、理化性質穩定、載藥量大并且制劑穩定性顯著提高；本發明制劑安全性更好、刺激性小，能顯著提高扶正固本、益氣補虛等功效。本發明制劑能顯著提高癌癥病人的生活質量，減輕化療后癌癥病人的疾病痛苦。藥理研究表明該制劑在活血化瘀、補氣養血、提高機體免疫力、輔助癌癥晚期的治療效果等藥效作用方面均有顯著性提高。
文檔編號A61P37/02GK1923223SQ200510098530
公開日2007年3月7日 申請日期2005年9月2日 優先權日2005年9月2日
發明者張樹祥, 闞迎昕 申請人:北京聯合偉華藥業有限公司